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DNA连接酶是否具有专一性要求

DNA连接酶是否具有专一性要求?
作者：崔若河
来源：《新高考·教师版》2011年第04期

限制酶在DNA的任何部位都能将DNA切开吗？以下是四种不同限制酶切割形成的DNA片段：

你能用DNA连接酶将它们连接起来？

和能连接形成；

答案

2 和 7 能连接形成

…ACGT…

…TGCA…；

4 和 8 三讲一落实能连接形成

…GAATTC…

…CTTAAG…；

3 和 6 能连接形成

…GCGC…

…CGCG…；

1 和 5 sas macro能连接形成

…CTGCAG…kmplayer rmvb

…GACGTC…；

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这是人教版《生物（选修3）现代生物技术专题》第7页“思考与探究”的第1题，此题的原意是想让学生形成对限制酶特异性的感性认识，但却容易让学生对DNA连接酶产生一种误解。部分学生因此认为：DNA连接酶对所连接的DNA两端碱基序列具有专一性要求。但事实上，DNA连接酶对所连接的DNA两端碱基序列不具有专一性要求，DNA连接酶可以连接任意两个平末端。

乌螺 DNA连接酶是一种能够催化DNA中相邻的3′OH和5′磷酸基末端之间形成磷酸二酯键并把两段DNA拼接起来的核酸酶。它封闭DNA双螺旋骨架上的切口，而不能封闭缺口，也就是说当3′OH和5′P彼此相邻，而它们又各自位于互补链上互补碱基配对的两个脱氧核苷酸的末端时，DNA连接酶才可弥合这个切口。当双链DNA中某一条链由于缺失一个或几个核苷酸造成单链断裂，出现缺口时，DNA连接酶无法连接这样的单链片段。

DNA连接酶有两种：E.coliDNA连接酶和T4DNA连接酶。张家港突发聚集性疫情T4DNA连接酶既可以连接黏性末端，也可以连接平末端，而E.coliDNA连接酶只能连接黏性末端。DMA连接反应经常使用T4DNA酶。

本文发布于:2024-09-23 20:12:06，感谢您对本站的认可！

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