方法一：
1、 分别称取EDC和NHS各10mg，分别装于2个干净离心管中。 2、取羧基微球悬浊液1ml，移至干净离心管中，10000rpm×5min，用Tip头小心弃去上清。3、用80ul Activation Buffer洗涤微球，10000rpm×5min，用Tip头小心弃去上清。共洗涤2次。4、在离心管底部轻轻地加80ul Activation Buffer，不用吹打微球。5、将离心管在超声波下，声浴60s。6化工辞典
、用去离子水将EDC和NHS配成浓度为50mg/ml的溶液。分别取10ul NHS溶液和10ul EDC溶液，加入到微球悬浊液中，暗室孵浴20min。7、10000rpm×5min，小心弃去上清。Coupling the capture molecule to the activated beads8、用Couple Buffer将抗体配成终浓度为100ug/ml的溶液，配500ul。9、用500ul Couple Buffer重悬微球（by votexing）。 10、用500ul Couple Buffer洗涤微球，10000rpm×5min，小心弃去上清。共洗涤2次。
11、用500ul Couple Buffer重悬微球（by votexing）。
12、将事先配好的500ul抗体加入到微球管中。
13、将离心管置水平振荡器上，室温，暗室，轻振2hours（Gently agitate）。
14、用PBS/BSA洗涤微球2次。
15、用PBS/BSA重悬微球，如需较长时间保存，可用0.05% azide保存。
方法二：
1、待标记蛋白于Buffer A透析1h。
2、负指数分布用1000u1 Buffer A 稀释250 u1乳胶颗粒（10%）至2%的胶乳悬液。
3、用Buffer A溶解EDC至终浓度20mg/ml.宏大叙事
4、250 u1 EDC溶液（20mg/ml.）加入到1250 u1乳胶悬液混匀。
5、按理论预算值滴加待标记蛋白于上述混匀悬液中。
6、室温缓慢搅动2 h或4℃过夜孵育
7、用Buffer A漂洗2次。
8、用工作液重悬至工作浓度。
Na2HPO4 20Mm
Glgcin 100mM
NaH2PO4调PH7.5
BSA用量0.1~1%
保护剂的选择：若用作辣根过氧化物酶的系列免疫分析应避免应用NaN3
1. Buffer A: 0.01m pH6.0 NaH2PO4
NaH2PO护理安全4 (MW 119.98) 0.48g
ddH2O to 400ml
Adjust to pH6.0 with HCI
2. Buffer B:
Na2HPO4 (MW141.96) 0.02m 1.42g
2012年2月6日Glgcin (MW75.07) 0.01m 3.75g
ddH2O to 500ml
二项分布adjust to pH7.5 with NaH2PO4
3. EDC
EDC 1g
Buffer A 50ml
0.45um过滤。
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