七年级英语教学论文路文雅;张丽;关美娟;董建臻
【摘 要】为了获得高效的杀线虫生防菌资源,以山药短体线虫(Pralylenchus sp.)、黄瓜根结线虫(Meloidogyne sp.)为靶标,对10种白僵菌菌株发酵液的杀线虫活性进行测定,同时测定了白僵菌菌株发酵液对昆虫病原线虫小卷蛾斯氏线虫(Steinernema carpocapsae All)的生物活性.结果表明,菌株BD-B173、BD-B180、BD-B061-3和BD-B315对山药短体线虫具有高毒力,24 h校正死亡率分别为97.20％、96.50％、91.16％、90.32％;48 h校正死亡率分别为97.30％、97.67％、92.45％、94.40％.菌株BD-B061-3、BD-B198、BD-B118和BD-B173对黄瓜根结线虫具有高毒力,24 h校正死亡率分别为97.47％、91.65％、81.37％、68.92％;48 h校正死亡率分别为98.73％、95.27％、87.53％、96.53％.10种白僵菌菌株发酵液对小卷蛾斯氏线虫24 h及48 h的校正死亡率均不超过10％.说明10种白僵菌菌株发酵液对2种植物线虫的杀虫活性具有特异性,且对昆虫病原线虫小卷蛾斯氏线虫的毒力均较弱. 【期刊名称】《河南农业科学》
【年(卷),期】2016(045)002
【总页数】5页(P82-86)
【关键词】白僵菌;发酵液;线虫;生物活性
【作 者】路文雅;张丽;关美娟;董建臻书录解题
【作者单位】河北农业大学植物保护学院,河北保定071000;河北省植保植检站,河北石家庄050000;河北农业大学植物保护学院,河北保定071000;河北农业大学植物保护学院,河北保定071000
【正文语种】中 文
【中图分类】S476.1
植物寄生线虫是一类重要的病原微生物，分布广、种类多。目前全世界已报道的植物线虫有 200 多属 5 000 余种，给农林业生产造成了严重危害[1]。山药短体线虫(Pralylenchus sp.)是一种给山药带来毁灭性危害的植物寄生线虫。近年来随着农业产业结构的调整，山药种植面积逐年增加，且给农民带来了可观的经济效益，其开发前景极为广阔。然而，山
药因重茬连作，遭受短体线虫病的危害也逐年增加，从而严重制约着山药生产的发展。根结线虫(Meloidogyne spp.)可以侵染很多作物，其中蔬菜和果树受害较严重[2]，近年来随着蔬菜产业的迅速发展，蔬菜种植规模越来越大，标准化程度越来越高，蔬菜根结线虫的危害程度逐年增加[3]，给国家的蔬菜产业造成了巨大损失。
长期以来生产中主要采用化学方法防治植物寄生线虫，由于人工合成的杀线虫剂毒性均较高，导致线虫产生抗药性，更重要的是严重污染人类生存环境。同时，也致使农产品农药残留和杀伤天敌等副作用日益严重[4-5]，因此化学防治已不适应农林业生产发展的需要。近年来，随着国家大力倡导农业生产的可持续发展，生物防治越来越受到重视，特别是利用真菌的代谢产物控制线虫病害在国内外已取得了显著的成果[6-7]。
沈阳营销
目前已记载的杀虫真菌约100属800多种，白僵菌是研究和应用较多的一种，它的杀虫谱非常广泛，能寄生700余种昆虫和螨[8-10]。至1999年，在国际上白僵菌已有17种产品注册登记[11]。近年来有研究发现，白僵菌可产生白僵菌素[12]、球孢白僵菌素[13]、卵孢毒素以及其他毒素，其对植物线虫也具有活性[14]。刘霆等筛选出了1株具有杀线虫毒力的球孢白僵菌菌株Snf907，明确了其对根结线虫[14]、甘薯茎线虫[15]和大豆胞囊线虫[16]都有很强
沧州日报的毒杀作用。之后陈增齐等[17]研究发现，该菌株发酵液处理接种线虫的番茄幼苗后，对番茄根结线虫病害具有较好的防治效果，并且随着发酵液浓度的升高，番茄幼苗根内几种防御酶活性上升。刘丹丹等[18]通过活体检测方法，分别测定了不同浓度的球孢白僵菌发酵液对线虫死亡率的影响，并对杀虫活性物质进行了分离纯化，其纯度达97.38%。刘琼等[19]研究了球孢白僵菌代谢产物对南方根结线虫的作用机制，明确其通过抑制南方根结线虫的运动能力、呼吸作用和降低乙酰胆碱酯酶活性，同时干扰线虫体内糖和蛋白质的代谢，以及增加虫体内容物的渗漏，从而起到毒杀植物线虫的作用。
目前关于白僵菌发酵液对植物寄生线虫生物活性的研究仍较少，尤其对山药短体线虫的防治效果还未见报道。因此，本研究测定10种白僵菌菌株发酵液对山药短体线虫和黄瓜根结线虫的毒力，以期筛选出对2种线虫具有高毒力的菌株，为植物线虫防治提供理论依据，同时对1种昆虫病原线虫小卷蛾斯氏线虫(Steinernema carpocapsae All)进行了生物活性测定，以明确白僵菌发酵液对生防线虫的影响。
1.1 试验材料
1.1.1 供试线虫 山药短体线虫(Pralylenchus sp.)和黄瓜根结线虫(Meloidogyne sp.)由河北
农业大学植物保护学院生物防治实验室分离并保存，小卷蛾斯氏线虫(Steinernema carpocapsae All)也由该实验室保存。
1.1.2 供试菌株及培养基 白僵菌菌株BD-B173、BD-B198、BD-B161、BD-B118、BD-B008-2、BD-B180、BD-B015、BD-B061-3、BD-B315、BD-B511由河北农业大学植物保护学院生物防治实验室提供。
菌种保存培养基为PDA培养基：马铃薯(去皮)200 g、葡萄糖20 g、琼脂20 g、蒸馏水1 000 mL；发酵培养基为改良查氏液体培养基：蛋白胨5 g、酵母粉5 g、葡萄糖20 g、K2HPO4 0.5 g、MgSO4 0.5 g、KCl 0.5 g、蒸馏水1 000 mL。
银川爆炸1.2 试验方法
1.2.1 白僵菌发酵液的制备 25 ℃下用PDA培养基培养白僵菌7 d，在菌落边缘用5 mm直径的打孔器打菌饼2个，接种于装有50 mL灭菌改良查氏液体培养基的三角瓶内，25 ℃摇床振荡培养(150 r/min)7 d，培养好的白僵菌发酵液经8 000 r/min离心10 min去除孢子和菌丝体，将滤液置于4 ℃冰箱中保存备用。
1.2.2 植物线虫的分离和保存 山药短体线虫的分离和保存：将带有山药短体线虫的山药切成小块，放入铺有3层面巾纸、孔径大小为0.15 mm的筛子上，将筛子放入适宜大小的托盘内，然后向托盘内加水直至病组织完全浸没，静置24 h。将收集到的线虫液用灭菌水洗3次，放入4 ℃冰箱保存备用。
黄瓜根结线虫的分离与保存：将带有根结线虫的黄瓜根部剪成3～5 cm长的根段，放在盛有清水的培养皿中，剥掉根的表皮，挑出卵囊和雌虫。将卵囊和雌虫放在培养皿中，用0.5%次氯酸钠处理3 min，再用无菌水冲洗3次，置于25 ℃培养箱中进行孵化。3 d后将孵化的2龄幼虫放在培养皿中并加少量水，10 ℃保存备用。
1.2.3 白僵菌发酵液对线虫的活性测定 取洁净灭菌的24孔板，分别加入 200 μL 线虫悬液(内含线虫2龄幼虫约 130 条)，再向其中滴加 200 μL白僵菌发酵液，混匀。以清水处理为对照(CK)，每个处理重复3次，分别于24 h、48 h镜检并记录供试线虫总数和死亡数，计算线虫死亡率和校正死亡率。将处理靶标线虫24 h及48 h后校正死亡率分别达到80%及90%以上作为筛选标准[20]。
线虫死亡率=死亡线虫数/供试线虫数×100%
校正死亡率=(处理线虫死亡率-对照线虫死亡率)/(1-对照线虫死亡率)×100%。
许成彪所得数据经DPS软件统计处理，用Duncan氏新复极差法进行差异显著性分析。
2.1 白僵菌发酵液对山药短体线虫的室内毒力
由表1可知，10种白僵菌菌株发酵液对山药短体线虫的毒力存在显著性差异。处理24 h后，10株白僵菌菌株发酵液对山药短体线虫的毒力大小依次为：BD-B173>BD-B180>BD-B061-3>BD-B315>BD-B008-2>BD-B511>BD-B118>BD-B198>BD-B015>BD-B161。对山药短体线虫校正死亡率超过80%的菌株有BD-B173、BD-B180、BD-B061-3和BD-B315，其校正死亡率分别为97.20%、96.50%、91.16%、90.32%。
处理48 h后，10株白僵菌菌株发酵液对山药短体线虫的毒力大小依次为： BD-B180>BD-B173>BD-B315>BD-B061-3>BD-B511>BD-B008-2>BD-B118>BD-B198>BD-B015>BD-B161。对山药短体线虫的校正死亡率超过90%的菌株有BD-B180、BD-B173、BD-B315、BD-B061-3，其校正死亡率分别为97.67%、97.30%、94.40%、92.45%。虽然菌株BD-B511毒力也较高，在处理山药短体线虫48 h后校正死亡率达到82.14%，但尚未达到筛选标
准。因此，处理24 h及48 h对山药短体线虫的校正死亡率超过80%及90%的菌株有BD-B173、BD-B180、BD-B061-3和BD-B315，这4株可以作为对山药短体线虫有高毒性潜力的生防菌株。
白僵菌菌株BD-B511和BD-B008-2的发酵液在处理山药短体线虫24 h与48 h的校正死亡率存在显著性差异。BD-B511处理山药短体线虫24 h后的校正死亡率为14.83%，48 h后的校正死亡率达到82.14%；BD-B008-2处理山药短体线虫24 h后的校正死亡率为17.73%，48 h后的校正死亡率为58.13%。
2.2 白僵菌发酵液对黄瓜根结线虫的室内毒力
由表2可知，10种白僵菌菌株发酵液对黄瓜根结线虫的毒力存在显著性差异。处理24 h后，10株白僵菌菌株发酵液对黄瓜根结线虫的毒力大小依次为：BD-B061-3>BD-B198>BD-B118>BD-B008-2>BD-B173>BD-B511>BD-B315>BD-B180>BD-B015>BD-B161。对黄瓜根结线虫的校正死亡率超过80%的菌株有BD-B061-3、BD-B198、BD-B118，其校正死亡率分别为97.47%、91.65%、81.37%。
处理48 h后，10株白僵菌菌株发酵液对黄瓜根结线虫的毒力大小依次为：BD-B061-3>BD-B173>BD-B198>BD-B180>BD-B008-2>BD-B118>BD-B511>BD-B015>BD-B315>BD-B161。对黄瓜根结线虫校正死亡率超过90%的菌株有BD-B173、BD-B061-3、BD-B198，其校正死亡率分别为96.53%、98.73%、95.27%。虽然菌株BD-B180、BD-B008-2、BD-B118、BD-B511毒力也较高，在处理黄瓜根结线虫48 h后校正死亡率均达到80%以上，但尚未达到筛选标准。因此，处理24 h及48 h对黄瓜根结线虫的校正死亡率超过80%及90%的菌株有BD-B061-3、BD-B198、BD-B118、BD-B173，这4株可以作为对黄瓜根结线虫有高毒性潜力的生防菌株。
白僵菌菌株BD-B015和BD-B180的发酵液在处理黄瓜根结线虫24 h与48 h的校正死亡率存在显著性差异。BD-B015处理黄瓜根结线虫24 h后的校正死亡率为19.71%，48 h后的校正死亡率为78.98%；BD-B180处理黄瓜根结线虫24 h后的校正死亡率为28.68%，48 h后校正死亡率达到89.51%。
豫公网安备41160202000603
站长QQ:729038198
关于我们
投诉建议