刘晨;黄攀攀;李敏;刘强
【摘 要】以牛心朴子(Cynanchum komarovii)的水、无水乙醇和甲醇等3种溶剂的粗提物为材料,以地红蝽为测试对象,研究牛心补子对刺吸式口器昆虫的毒杀作用.胃毒活性采用改进的药剂浸渍法,触杀活性采用微量点滴法.结果表明:(1)牛心朴子的3种粗提物对地红蝽均有较强的胃毒作用,其中,无水乙醇粗提物的毒杀效果最好,质量浓度为15 g/L时,72 h的校正死亡率达到73.3％；(2)在触杀实验中,甲醇粗提物的效果最好,质量浓度为15g/L时,72 h的校正死亡率为83.3％,与无水乙醇粗提物触杀效果相差不大；(3)牛心朴子水粗提物的毒杀效果均低于其他2种提取物. 【期刊名称】《天津师范大学学报（自然科学版）》
【年(卷),期】2013(033)004
【总页数】4页(P56-59)
【关键词】牛心朴子;地红蝽;刺吸式口器;毒杀;粗提物
【作 者】刘晨;黄攀攀;李敏;刘强
武汉时代职业学院【作者单位】天津师范大学生命科学学院,天津300387;天津师范大学天津市动植物抗性重点实验室,天津300387;天津师范大学生命科学学院,天津300387;天津师范大学天津市动植物抗性重点实验室,天津300387;天津师范大学生命科学学院,天津300387;天津师范大学天津市动植物抗性重点实验室,天津300387;天津师范大学生命科学学院,天津300387;天津师范大学天津市动植物抗性重点实验室,天津300387
【正文语种】中 文
【中图分类】Q965
地红蝽（Pyrrhocoris tibialis）属半翅目、红蝽科，是一种重要的农业害虫，分布较为广泛[1]，已连续多年在我国许多地方暴发成灾.地红蝽为刺吸式口器昆虫，吸食草本科及禾本科植物种子的汁液，常栖息于植物上或在地面爬行，产卵于泥土或腐败的落叶层中.
牛心朴子（Cynanchum komarovii）属萝摩纲、萝摩科、鹅绒藤属（Cynanchum）植物，为多年生的直立半直立丛生草本植物[2]，广泛分布于我国的中西部地区.牛心朴子植株含有
牡丹酚等多种生物碱，气味浓烈，茎叶皆有毒[3]，是一种应用较多的植物源生物农药杀虫剂.近年来，国内对牛心朴子化学成分和毒力测定方面的研究较多[4-12]，包括无机元素、全花蛋白、微量元素、挥发性化学成分及根须化学成分等方面.国外学者[13-14]对牛心朴子根部化学成分和糖类分析也开展了一系列研究.这些研究中，关于牛心朴子毒力方面，主要是针对咀嚼式口器昆虫、线虫等的毒杀作用或对细菌的抑制作用.为了考察牛心朴子对刺吸式口器昆虫的毒杀效果，课题组分别以水、无水乙醇、甲醇等为溶剂，制备了3种牛心朴子粗提物.以地红蝽为材料，研究不同溶剂的粗提物在5个浓度下对刺吸式口器昆虫的胃毒和触杀效果，确定最佳的提取溶剂和粗提物作用浓度，为以牛心朴子为植物源农药防治刺吸式口器害虫提供理论和实践依据.
1 材料与方法
1.1 实验材料
采集早春未交尾的地红蝽，置于室内湿润环境下.用水浸泡黄豆，吸涨后以其饲养地红蝽供试.
将牛心朴子的3种粗提物分别用相应溶剂稀释为 15、25、50、75 和 100 g/L 的溶液，各取 100 mL，密封，置于4℃冰箱内备用.
1.2 实验方法
1.2.1 胃毒作用测定
采用改进的药剂浸渍法[15]测定3种牛心朴子的粗提物对地红蝽成虫的胃毒效果.每种粗提物的不同浓度均设置处理组和对照组（以相应溶剂为对照）.取一个铺有湿润滤纸的无菌培养皿（Φ=10 cm），放入10粒经牛心朴子粗提物浸泡萌芽的黄豆，接入饥饿处理4h的地红蝽成虫10头.每个实验重复3次.观察记录地红蝽取食黄豆24、48和72h后的存活情况，计算校正死亡率.以校正死亡率转换的几率值为Y值，以粗提物作用时间的对数为X值，求出毒力回归方程及致死中时（LT50）.
1.2.2 触杀作用测定
中国兽药监察所采用微量点滴法[16-17]测定不同浓度的牛心朴子粗提物对地红蝽成虫的触杀效果.每种粗提物的不同浓度均设置处理组和对照组（以相应溶剂为对照）.每组选取10头大小一致、生命
活性相近的地红蝽成虫为供试虫体，取0.1 mL粗提物点滴到虫体上，自然晾干.然后将处理过的各组地红蝽分别放入铺有湿润滤纸的培养皿（Φ=10 cm）中，用水萌发的黄豆饲养.每个实验重复3次.观察记录24、48、72h后虫体的存活情况.计算校正死亡率（公式参照1.2.1），求出触杀作用的毒力回归方程及LT50.
1.3 数据处理
利用Excel统计数据并作图，利用SPSS软件进行统计学检验.
2 结果与分析
2.1 胃毒作用
牛心朴子3种溶剂的粗提物对地红蝽的胃毒效果如图1所示.
由图1可知，3种牛心朴子的粗提物都是随着药液浓度的增大和作用时间的延长，地红蝽的校正死亡率增加.无水乙醇粗提物在质量浓度为25 g/L时，地红蝽24h的校正死亡率就超过了70%，48h的校正死亡率达到90%，72h后，在此浓度下的校正死亡率已达到100%；甲
浦东实践的现实意义醇粗提物的效果略低于无水乙醇粗提物，质量浓度为25 g/L时，24h的地红蝽校正死亡率仅有25%，质量浓度超过75 g/L时，24h的地红蝽校正死亡率达到85%，48h后校正死亡率达到100%；水粗提物的胃毒效果最差，在质量浓度最大时（100 g/L），地红蝽24h的校正死亡率低于35%，48h的校正死亡率也未超过70%，而此质量浓度下的其他2种粗提物作用于地红蝽时，48h的校正死亡率已接近100%.
综合分析可知，牛心朴子3种溶剂的粗提物作用于地红蝽产生胃毒效果的顺序为：无水乙醇粗提物>甲醇粗提物>水粗提物.
不同浓度粗提物对地红蝽的毒力回归方程以及由此求出的各浓度粗提物的LT50，结果如表1所示.
表1 牛心朴子粗提物对地红蝽胃毒作用的回归方程及LT50Tab.1 Toxic regression equationsand LT50 of stomach poison effect of Cynanchum komarovii extractson Pyrrhocoris tibialis注：表中Y为地红蝽校正死亡率转换的几率值；X为牛心朴子粗提物对地红蝽产生胃毒作用时间的对数.溶剂 粗提物质量浓度/（g·L-1）回归方程相关系数R LT50/h水水15 Y=3.063X－1.118 0.986 99.32 25 Y=2.678X－0.268 0.965 92.47 50 Y=2.316X+0.
925 0.998 80.72 75 Y=2.036X+1.687 0.995 42.36 100 Y=3.919X－0.925 0.978 32.51无水乙醇15 Y=2.578X+0.800 0.997 42.56 25 Y=6.246X－3.399 0.903 22.13 50 Y=6.228X－3.151 0.963 20.37 75 Y=4.947X－0.133 0.931 10.91 100 Y=4.190X+1.222 0.931 7.98甲醇15 Y=2.663X+0.319 0.931 52.28 25 Y=4.978X－2.613 0.973 33.81 50 Y=8.522X－1.672 0.961 29.58 75 Y=5.808X－1.672 0.931 14.09 100 Y=5.431X－0.997 0.931 12.71
由表1可知，3种溶剂粗提物中，药剂作用于地红蝽的LT50都是随着浓度的增大而降低.水粗提物在质量浓度达到75 g/L时LT50才有显著降低；无水乙醇粗提物和甲醇粗提物在质量浓度为25 g/L时，LT50就显著下降.比较3种溶剂的牛心朴子粗提物，无水乙醇粗提物在任一浓度下的LT50都显著低于其他2种溶剂粗提物.如无水乙醇粗提物质量浓度为25 g/L时，LT50为22.13h，而水粗提物在质量浓度为100 g/L时，LT50才达到32.15h，即产生同样作用效果的时间和药剂浓度均显著高于无水乙醇粗提物.甲醇粗提物与无水乙醇粗提物在同样的浓度下，前者LT50高于后者，但显著低于水粗提物.
聚合硫酸铝铁2.2 触杀作用
牛心朴子3种溶剂的粗提物对地红蝽的触杀效果如图2所示.由图2可知，3种溶剂粗提物中，
水粗提物对地红蝽的触杀作用较小，尤其是在作用24h后，低浓度的水粗提物对地红蝽几乎没有触杀作用，高浓度下地红蝽的校正死亡率也未超过10%，随着作用时间的延长和浓度的增大，水粗提物对地红蝽的触杀效果逐渐显现，但质量浓度100 g/L的水粗提物在作用72h后，地红蝽的校正死亡率也仅为50%左右.无水乙醇粗提物和甲醇粗提物对地红蝽都有显著的触杀作用，即使是在15 g/L时，24h后地红蝽的校正死亡率也超过了60%，即这2种粗提物的触杀效果远远好于水粗提物.随着作用时间的延长和浓度的增大，这2种粗提物对地红蝽的触杀效果缓慢增强，除了粗提物的质量浓度为100 g/L时地红蝽的校正死亡率显著高于其他浓度之外，其他浓度的粗提物对地红蝽的触杀作用没有显著的差异，尤其是在作用72h后.比较这2种粗提物对地红蝽的触杀效果，甲醇粗提物略优于无水乙醇粗提物，但没有显著差异.
求出触杀作用的毒力回归方程和各浓度下粗提物的LT50，结果如表2所示.由表2可知，水粗提物的质量浓度达到50 g/L时，地红蝽的LT50较25 g/L时降低约20h，质量浓度为75 g/L时，LT50又下降了约13h，浓度进一步增加，LT50不再有显著变化；无水乙醇粗提物中，质量浓度从25 g/L增加到50 g/L时，LT50才有显著降低（约1.5h），此后随着浓度增加，下降缓慢；甲醇粗提物中，随着药液浓度的增加，LT50一直呈缓慢下降趋势.比较3种溶剂
不锈钢锻件标准的粗提物，水粗提物对地红蝽的触杀效果极差；无水乙醇粗提物在各浓度下的LT50略高于甲醇粗提物，表明二者对地红蝽的触杀效果相近，尤其是在粗提物的质量浓度超过50 g/L时.
表2 牛心朴子粗提物对地红蝽触杀作用的回归方程及LT50Tab.2 Toxic regression equationsand LT50 of contact toxicity effect of Cynanchum komarovii extractson Pyrrhocoris tibialis注：表中Y为地红蝽校正死亡率转换的几率值；X为牛心朴子粗提物对地红蝽产生触杀作用时间的对数.溶剂 粗提物质量浓度/（g·L-1）回归方程相关系数R LT50/h水水15 Y=3.338X－1.725 0.986 103.51 25 Y=2.508X－0.183 0.965 100.00 50 Y=3.400X－1.479 0.998 80.54 75 Y=4.063X－2.422 0.995 67.14 100 Y=3.533X－1.309 0.978 61.09无水乙醇15 Y=1.106X+3.895 0.997 10.00 25 Y=1.068X+3.923 0.903 10.00 50 Y=1.357X+3.723 0.963 8.59 75 Y=1.576X+3.529 0.931 8.57 100 Y=4.190X+1.222 0.931 7.98甲醇水15 Y=1.191X+3.835 0.931 9.51 25 Y=1.258X+3.806 0.973 8.89 50 Y=1.470X+3.652 0.961 8.26 75 Y=1.470X+3.652 0.931 8.26 100 Y=4.190X+1.222 0.931 7.98花木水
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