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细胞转染是指将外源分⼦如 DNA RNA 等导⼊真核细胞的技术。可分为瞬时转染，稳定转染等
瞬时转染是指外源 DNA/RNA 不整合到宿主染⾊体中，因此⼀个宿主细胞可存在多个拷贝数，产⽣⾼⽔平的表达，但通常只持续⼏天，多⽤于启动⼦和其他调控元件的分析。⼀般来说，超螺旋质粒 DNA 转染效率较⾼，在转染后 24-72 h 内分析结果，常常⽤到⼀些报告系统如荧光蛋⽩，β半乳糖苷酶等来帮助检测。 稳定转染是指外源 DNA 既可以整合到宿主染⾊体中，也可能作为⼀种游离体存在。尽管线性 DNA ⽐超螺旋 DNA 转⼊量低但整合率⾼。外源 DNA 整合到染⾊体中概率很⼩，通常需要⼀些选择性标记反复筛选得到稳定转染的同源细胞系。
主要有下⾯⼏种⽅法：
青山郭外斜的斜读XIE 还是XIA
化学法：磷酸钙法、DEAE-右旋糖苷法、阳离⼦脂质体法；物理法：电穿孔法、显微注射法、biolistic 颗粒传递法；病毒介导法：逆转录病毒、腺病毒
A. 阳离⼦脂质体法：
带正电的脂质体与核酸带负电的磷酸基团形成复合物被细胞内吞。过程如下图：
特点：
简单通⽤，适⽤性⼴，转染效率⾼，重复性好，但转染时需除⾎清，转染效率随细胞类型变化⼤。由于脂质体复合物与
简单通⽤，适⽤性⼴，转染效率⾼，重复性好，但转染时需除⾎清，转染效率随细胞类型变化⼤。由于脂质体复合物与贴壁细胞的接触机会远⼤于悬浮细胞，所以贴壁⽐悬浮转染效率要⾼。悬浮细胞建议使⽤电穿孔法。
B. 电穿孔法：
利⽤⾼压电脉冲对细胞膜的⼲扰，使其形成利于核酸进⼊的微孔。
C. 逆转录病毒（RNA）：
通过病毒中膜糖蛋⽩和宿主细胞表⾯的受体相互作⽤进⼊宿主细胞，之后反转录酶启动合成 DNA 并随机整合到宿主基因组中。
特点：稳定转染，可⽤于难转染的细胞、原代细胞，体内细胞等，但携带基因不能太⼤。
D. 腺病毒（双链 DNA）：
先和细胞表⾯的受体结合，继⽽在αV 整合素介导下被细胞内吞。
特点：可⽤于难转染的细胞。
影响转染的因素：
⾎清⾎清影响复合物的形成，降低转染效率
阳离⼦脂质体和 DNA 的最佳量在使⽤⾎清时会有所不同，因此想在转染培养基中加⼊⾎清时要进⾏条件优化。⼤部分细胞可以在⽆⾎清培养基中⼏个⼩时内保持健康，对于对⾎清缺乏⽐较敏感的细胞，可以使⽤ OPTI-MEM I 培养基。对于对⾎清缺乏⽐较敏感的贴壁细胞，建议使⽤ LIPOFECTAMINE 2000。
抗⽣素
⽐如青霉素和链霉素，是影响转染的培养基添加物。这些抗⽣素⼀般对于真核细胞⽆毒，但阳离⼦脂质体试剂增加了细胞的通透性，使抗⽣素可以进⼊细胞。这降低了细胞的活性，导致转染效率低。
细胞代数
转染前细胞最好经过 1-2 次传代保证细胞⽣长旺盛容易转染，注意贴壁细胞⼀旦长满就不好转染。
细胞铺板密度
⼀般转染时，贴壁细胞密度为 70%-90%，悬浮细胞密度为 2*10^6--4*10^6 细胞/ml 时效果较好。确保转染时细胞没有长满或处于静⽌期。铺板细胞数⽬的增加可以增加转染活性和细胞产量。
DNA 质量
DNA 质量对转染效率影响⾮常⼤。⼀般的转染技术基于电荷吸引原理，如果 DNA 不纯，如带少量的盐离⼦，蛋⽩，代谢物污染都会显著影响转染复合物的有效形成和转染的进⾏。
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