荧光定量PCR是一种常用的分子生物学技术,常用于测量目标DNA的含量。在PCR反应中使用内参基因来标准化目标基因的表达是很重要的,因为它可以消除反应的效率差异和不同样品之间的差异性。
内参基因也被称为参比基因或标准基因,它们是稳定表达的基因,其表达量在各个细胞和组织中基本不变。通过选择一个稳定的内参基因,可以确保PCR反应的可靠性和准确性。 以下是一些常用的荧光定量PCR内参基因:
北京技术交易促进中心1. GAPDH:糖酵解途径中的酶,参与氧化糖分解过程,在多个细胞和组织中表达水平稳定。
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2. β-actin:负责细胞的细胞骨架形态维持,在多个细胞和组织中表达水平稳定。
3. 18S rRNA:核糖体组成部分之一,在不同种类的细胞和组织中表达水平相对稳定。
4. HPRT:鸟嘌呤磷酸核苷酸转移酶,参与细胞DNA合成,在多个细胞和组织中表达水平稳
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铁岭大葱5. Cyclophilin A:负责细胞免疫应答和蛋白质折叠,在不同种类的细胞和组织中表达水平相对稳定。
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选择合适的内参基因并进行相关实验前,需要充分了解目标基因和研究细胞/组织的特点。同时,还要确定一个高质量的RNA样品并进行RNA纯化和浓度测定等步骤。只有这样,荧光定量PCR才能提供可靠准确的分析结果。