果胶酶讲解

从以下六个方面来了解和认识
1.酶的催化特性和来源   
2. 酶的功能用途   
3. 酶的结构和理化性质   
4. 酶的生产方法和提取纯化工艺   
5. 酶制剂在生产中的应用   
6. 该酶制剂的发展趋势   
一、酶的催化特性和来源
葡萄糖异构酶又称木糖异构酶,它可以催化D-里约欢迎你木糖、D-葡萄糖,D-核糖等醛糖转化为相应的酮糖。
目前为止,发现的产酶菌为细菌和放线菌,还有少量的米曲霉和酵母中。
1、催化特性
    由于葡萄糖异构化为果糖具有重要的经济意义,因此工业上习惯将D-木糖异构酶称为葡萄糖异构酶。
    该酶一般只能催化C2C4羟基为顺式的戊糖和己糖异构化,即只能催化D-木糖、D-核糖和D-葡萄糖异构化为对应的酮糖
    大多数微生物该酶是胞内酶,可以直接利用细胞进行异构化反应,但也有一些微生物可以产生胞外酶,因菌种菌龄培养条件而异。
2、来源
细菌
主要是乳酸杆菌,如短乳杆菌、发酵乳杆菌、盖氏乳杆菌、李氏乳杆菌、甘露醇乳杆菌、产气气杆菌、阴沟气杆菌、果聚糖气杆菌、凝结芽孢杆菌、嗜热芽胞脂肪杆菌等。
放线菌
主要是链霉菌和诺卡菌,如白链菌、包氏链霉菌、多毛链霉菌、黄微绿链霉菌、橄榄链霉菌、秀红链霉菌、委内瑞拉链霉菌、达氏诺卡菌等。
还有密苏里游动放线菌
其他
米曲霉
酵母菌
    密苏里游动放线菌胞内酶达95%以上,嗜热放线菌M1033的胞外异构酶达99%,我国7号淀粉酶链霉菌M1033菌株也可以产生胞外葡萄糖异构酶。
生产葡萄糖异构酶的微生物分为
诱导型      需要木糖作为诱导剂
组成型      不添加木糖,是工业生产发展的方向
二、酶的功能用途
1. 将葡萄糖异构化为高果糖浆,味道纯正,具有较强保温性、着性和防腐性,营养价值较高
2. 可不经消化直接被肠胃吸收,果糖的代谢不受胰岛素调节,糖尿病人可以利用。
3. 是饮料、糕点等食品工业的理想用糖,在蜂蜜中含量最为丰富,它的甜度约为蔗糖的1.2-1.8倍。
4. 目前在全国范围内各国都大力发展果葡糖浆和结晶果糖的生产
三、酶的结构和理化性质
淀粉的浆液经过α-淀粉酶的催化作用,可以形成糊精,糊精经过糖化酶的催化作用形成葡萄糖,葡萄糖在葡萄糖异构酶的催化作用下,分子的结构变化,这叫做G的异构化,G经异构化就形成了果糖,如果把果葡糖浆中的果糖和葡萄糖分离开来,经分离出来的葡萄糖再
次进行异构化,并且如此反复多次,最后的混合物中果糖的含量可以达到70%-90%,这样的混合物就叫做高果糖浆。
葡萄糖异构酶的理化性质
1.热稳定性
2.底物专一性
3.金属离子的影响
4.最适pH值和温度
    该酶能催化D2葡萄糖至D2果糖的异构化反应,它是工业上大规模从淀粉制备高果糖浆的关键酶,且该酶可将木聚糖异构化为木酮糖,再经微生物发酵生产乙醇。
四、酶的生产方法和提取工艺
1、酶的生产菌种的选择
2、酶的发酵条件
3、主要菌种工艺介绍
4、酶的筛选
1、生产菌种的选择
产生该酶的异构物很多,但适合于工业生产的菌种并不多。目前工业上主要采用的菌种有暗产链霉菌、凝结芽孢杆菌、橄榄链霉菌、密苏里游动放线菌以及节杆菌等
多数微生物的葡萄糖异构酶为诱导型,需要木糖的诱导,当有葡萄糖时异构酶的产生受到抑制,可诱变选育抗葡萄糖分解代谢阻遏物的突变株获得组成型突变株,以提高酶产量。
2、发酵条件
1.胞内外酶的分布和酶的稳定化
2.碳源
3.氮源
4.金属离子
5.pH
6.培养温度和时间
7.通风量
1)碳源
多数野生型菌株需要木糖诱导产酶。木二糖的诱导力更强,特别是与木糖共存时,诱导产酶的效果更好。
G是组成型酶生产菌种常用的碳源,但是G异构酶的产生也受到G分解代谢阻遏物的调节,一般是在G耗尽之后开始产酶。
此外,可以作为碳源的还有果糖、蔗糖、甜菜糖蜜、淀粉、阿拉伯糖、山梨糖与甘油、乳糖。
2)氮源
胨、玉米浆、酪蛋白水解物、大豆粉、肉粉等有机氮均是生产G异构酶良好的氮源。
不同形式的铵盐,对不同菌株的效果不同。
3)金属离子
不同菌株对金属离子依赖性不同
主要对其有重要作用的离子有:Cu2+Ni2+Zn2+Fe2+Mn2+Al3+Co2+Mg2+
4pH
生产异构酶的培养基初始pH在中性附近,当培养基组成不同时,同一菌株的最适pH也不同。
5重庆卫星电视)培养基温度和时间
链霉菌为24~30,密苏里游动放线菌29~33,高温放线菌要求45,嗜热脂肪、凝结芽孢杆菌需要50~60,
中温菌一般培养24~28h可达到产酶高峰,嗜热菌在较短时间可达到高峰。
6)通风量
链霉菌发酵时,强烈的通风搅拌能促进生长与产酶,通风强弱可影响链霉菌内外酶的分布。
凝结芽孢杆菌是碱性微生物,在氧成为限制因子时,可以提高产酶。
限制断乳杆菌氧的供应可促进产酶,强烈的通风,不利于生长和酶的合成。
7)胞内外酶的分布和酶的稳定化
不同菌株产生的胞内外酶的比例不同,同时也受培养条件、菌龄的影响。
可以低温保存,但在-20℃冰冻可使之顷刻失活。
3、主要生产菌种工艺介绍
1.密苏里游动放线菌G异构酶生产
压缩天然气密度2.乳酸杆菌G异构酶生产
3.嗜热放线菌G异构酶生产
4.链霉菌G异构酶生产
    不同菌对培养基和发酵工艺要求不同,但都有相似的过程。
培养基
斜面培养基  种子培养基      发酵培养基
发酵工艺
斜面菌种培养    种子培养  发酵罐培养
4、酶的筛选河南大学学报
酶的提取:盐溶液提取法、碱溶液提取法、有机溶剂提取法
提取
首先破碎细胞,然后过滤、离心,逐步逐级分离,浓缩
分离纯化
分子筛,DEAE-FF,透析
固定
载体结合,交联法,包埋法
五、酶制剂在生产中的应用
    1.是工业上大规模以淀粉制备高果糖浆的关键酶
    2.高果糖浆的应用领域主要是食品工业、医药和饮食业
    3.该酶的另一重要潜在应用在于半纤维素资源的开发
六、酶制剂的发展趋势
    随着人民生活水平提高和国内饮料工业的迅速发展,中国成为高果糖浆发展潜力最大的国家。
    目前我国高果糖浆的潜在销售市场为150万吨干基,从长远观点来看,高果糖浆将成为我国一个新的主要糖原,根本解决我国的糖原问题。
    基因重组G异构酶的产业化将促进高果糖浆工业的发展并带来极大的经济效益。
    若能用葡萄糖异构酶使木糖异构化为木酮糖,则可供酿酒酵母发酵产生酒精,其经济价值不言而喻。
【补充】:
一、该酶的应用
1、秸秆还田中,水解液中D-木糖约占水解液的30%,不可被普通酵母直接发酵利用,葡萄糖异构酶能使D-木糖异构为木酮糖。
2、血清6-磷酸葡萄糖异构酶应用于类风湿关节炎临床诊断。
3、在鱼体内的GPI能抑制鱼糜的凝胶劣化,其他来源的GPIRA(类风湿关节炎)、消化道癌症、红斑狼疮诊断指标和药物研究也有紧密的联系。
4、木糖异构酶的另一重要潜在应用在于可再生半纤维素资源的开发。半纤维素占植物成分的20%~30%,大部分为木糖聚合物,木糖经异构化后得木酮糖,后者能为酿酒酵母发酵产生酒精。酒精是一种环保燃料,可替代有限的能源石油。
5、木糖是除葡萄糖外自然界中含量最为丰富的单糖之一。其广泛存在于可再生的木质纤维素材料中, 如农副产品及林产业的木质废弃物,以及以农产、林产品为原料的工业如造纸厂废弃物中。当前随着能源危机和环境污染的日益严重,对再生资源的利用已受到广泛的关注,其中对木糖的利用,也成为热点之一。
二、用嗜热放线菌生产固定化葡萄糖异构酶的方法: 
第一步:把嗜热放线菌放在含有淀粉、硝酸钾、硫酸镁、氯化钠、磷酸氢二钾、硫酸亚铁的培养基上高温培养。 
第二步:把前一步得到的嗜热放线菌放在含有麸皮、豆饼、硫酸镁、磷酸氢二钾、氯化钴的培养基上通气高温培养种子。 
第三步:把种子放入发酵罐内,用含有麸皮、豆饼、硫酸镁、磷酸氢二钾、氯化钴的培养基上通气高温发酵。 
第四步:把前一步得到的发酵液过滤,得清发酵液。 
第五步:使清发酵液中的酶固定在载体上。
三、高果糖浆的生产
生产高果糖浆的原料是葡萄糖,葡萄糖是由淀粉转化而来的。生产高果糖浆的基本过程是,含淀粉的浆液经过α-淀粉酶的催化作用,可以形成糊精;糊精经过糖化酶的催化作用形成葡萄糖;葡萄糖在葡萄糖异构酶的催化作用下,分子的结构发生变化,这叫做葡萄糖的异构化。葡萄糖经过异构化,就形成了果糖。葡萄糖异构酶在6070珍肽℃时催化效率最高时,葡萄糖的转化率可达到53.5%56.5%,此反应需经较长时间达到反应平衡,因此在实际的催化反应上一次只能将45%左右的葡萄糖转化为果糖形成果葡糖浆。生产上为获取
j.d.塞林格
甜度更大的高果糖浆,通常会将混合物中的葡萄糖分离出来,反复进行异构化生成果糖从而提高混合糖浆中的果糖含量。 

本文发布于:2024-09-23 18:33:45,感谢您对本站的认可!

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标签:葡萄糖   异构酶   糖浆   生产   果糖   杆菌   高果
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