西南国防医药2021年1月第31卷第1期•35 ••临床论著•
Hippo-YAPl/TAZ信号通路在神经胶质瘤中的表达和临床意义 孙菱琦，孙红斌
「摘要1目的探讨Hippo-YAP/TA Z信号通路在神经胶质瘤组织中的表达水平、临床意义。方法通过免疫组织化学染法(IH C)，在89例神经胶质瘤组织中，观察Y A P和T A Z蛋白的表达水平，采用P e m o Y s字2检验和Spearm an统计学方法，研究 Y A P和T A Z蛋白水平与胶质瘤病理组织学分级之间的相关性，以及Y A P和T A Z蛋白表达之间的相关性。结果在89例胶质 瘤组织中，YA P1和T A Z蛋白髙表达率分别为50.6%和44.9%。结果显示，两种蛋白的髙表达分别与胶质瘤的髙病理组织分级之间呈正相关（相关系数=0.307和0.392，尸<0.001)；两种蛋白之间的表达也呈正相关（相关系数=0.990，卩<0.001)。结论 Hippo-Y A P l/T A Z信号通路与神经胶质瘤肿瘤病理组织分级密切相关，YA P1和T A Z蛋白相互促进并参与胶质瘤的恶性进程。 「关键词1H ippo信号通路;YA P1;TA Z；胶质瘤；临床意义
中图分类号R 730.264 文献标识码A
文章编号 1004-0188(2021)01-0035-04 doi:10.3969/j.issn.1004-0188.2021.01.009
Expression of Hippo-YAPl/TAZ signaling pathway in glioma and its clinical significance
数字人Sun Lingqi1,2,Sun Hongbin1,31.Department of Neurology,the Affiliated Hospital of Southwest Medical University,Luzhou,Sichuan, 646000, China; 2.Department of Neurology,Air Force Hospital of Western Theater Command of PLA,Chengdu,Sichuan, 610065, China;3.Department of Neurology,Sichuan Academy of Medical Sciences&Sichuan Provincial People's Hospital,Chengdu, Sichuan, 610072, China
吴敏伦「^bstractl Objective To explore the expression level of Hippo-YA P1/TAZ signaling pathw-ay in glioma tissues and its clinical significance.M eAods Immunohistochemical(IHC)staining"was used to observe the protein expression levels of Y A P1and TAZ in 89 glioma tissue samples.Pearson's字2test and Spear^nan correlation analysis were used to analyze the correlation betw-een the protein expression levels of YA P1and TAZ and the histopathological grading of glioma,as well as the correlation between YA P1and TAZ protein expressions.Results In the89 glioma tissues,the high expression rates of Y A P1and TAZ were50.6% and 44.9% , respectively.Statistical analysis showed that the high expression of the two proteins was positively correlated with the high grade of glioma tissues,respectively(correlation coefficient = 0.307 and 0.392, P< 0.001). The expression of the tw，o proteins w，as positively correlated(correlation coefficient = 0.820, P< 0.001). Conclusion In gliom
a,the Hippo-YA P1/TAZ signaling pathway is positively correlated with the grade of tumor pat hological tissues,and Y A P1and TAZ proteins promote each other and participate in the malignant procession of glioma.
「^^ words l Hippo signaling pathway;Y A P1;TAZ;glioma;clinical significance
神经胶质瘤是最常见的大脑、脊髓原发性恶性肿瘤「1-2]。在组织学上，胶质瘤具有正常胶质细胞的特征。然而，胶质瘤是否起源于正常的胶质细胞、胶质或神经前体细胞、其他类型的细胞仍然是不完全清楚「31。针对于胶质瘤的研究，一方面集中在发病机制和调控信号通路的探索；一■方面集中在临床手段的优化「《]。神经胶质瘤的现在主要还是手术切除，而放化疗效果较差。由于胶质瘤细胞恶性程度非常高，很多患者在术后容易出现转移和复发，预后很差「61。研究参与胶质瘤疾病进程的分子信号通路，探寻对疾病诊断预后和有价值的分子标志物，是临床和基础研究的热点。
基金项目：四川省中医药管理局科技项目（30504010338)
作者单位院646000四川泸州，西南医科大学附属医院神经内科 (孙菱琦，孙红斌）曰西部战区空军医院神经内科(孙菱琦）曰四川省医学科学院四川省人民医院神经内科(孙红斌）
通信作者：孙红红武，E-mail:
“H ippo信号通路”是一种新近发现且高度保守的调控通路「\Y A P1(yes-associated protein 1)和 TAZ (transcription coactivator with PDZ-binding motif)作为重要的同源转录共刺激因子，在H ippo信号通路下游发挥关键的作用「8]。目前研究发现，Y A P1和T A Z在许多肿瘤的表达增高，能够促进肿瘤恶变和生长「9-1°]。尽管如此，Hippo-Y A P1/T A Z信号通路在神经胶质瘤中的表达状态如何、是否具有临床意义尚不完全清楚。本研究重点研究Hippo-Y A P1/T A Z信号通路在神经胶质瘤组织中的表达水平和临床意义，为进一步研究H ippo信号通路的致癌作用和机理提供一定的研究基础。
1材料与方法
1.1 标本来源和试剂研究中涉及的组织标本，选取2015~2018年期间行外科手术切除的神经胶质瘤
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患者组织标本89例，手术前患者未进行任何放化疗。兔抗人Y A P1单克隆抗体(1:00，批号14074)及兔抗人T A Z单克隆抗体（1:00，批号72804)均购自美国Cell Signaling Technology 公司，免疫组化二抗、DAB 显试剂均购自中国博士德生物公司，苏木精染料购自美国Sigm a公司，梓檬酸钠缓冲液购自北京谱析科技有限公司。
1.2实验方法对组织芯片标本采用免疫组织化学染法（IH C)观察Y A P1和T A Z蛋白的表达情况。具
体方法如下：组织切片先脱蜡、脱水处理，再在梓檬酸钠缓冲液中微波修复10m in，3%氏〇2室 温孵育5~10m in以抑制内源性过氧化酶的活性，再用二抗来源的血清进行封闭，接着使用Y A P1或T A Z的一抗，滴加在组织后，于4益孵育过夜，对一抗进行漂洗后，室温孵育对应的二抗2 h，再行DAB 显、苏木精染核，观察显并分析。
1.3染评分所有组织芯片的染评分均由两位病理科医师独立、双盲进行显微镜下观察判读。根据免疫组化染情况对Y A P1和T A Z表达进行评估：首先阳性细胞百分率打分(<5%为0分、6~ 25%为 1 分、26~50%为 2 分、51~75%为 3 分、>75%为4分）曰接着染强度打分（阴性染为0分、弱 阳性染为1分、中度阳性染为2分、强阳性染为3分）；最后，阳性细胞百分率分数乘以染强度分数，0~4分为低表达，5~12分为高表达。依据评估结果分为高表达组和低表达组。
1.4统计学方法应用SPSS 23.0版软件对以上数据进行统计分析，Y A P1和T A Z蛋白水平与胶质瘤的病理组织学分级之间的相关性，通过皮尔森卡方检验、斯皮尔曼法分别统计分析。Y A P1和T A Z蛋白水平之间的相关性，通过斯皮尔曼法统计分析。P< 0.05为差异具有统计学意义。
2结果
2.1 在胶质瘤组织中Y A P1和T A Z的蛋白表达情况采用IH C法检测并观察Y A P1和T A Z两种蛋白在胶质瘤组织中的表达，结果显示:Y A P1蛋白有45例高表达，占50.6%；而T A Z蛋白有40例高表达，占4
4.9%。Y A P1在1~域、芋~郁级胶质瘤中高表达率分别为31.3%和61.4%；而T A Z的高表达率分别为28.1%和70.2%(表1)。
2.2Y A P1和T A Z蛋白表达水平与胶质瘤病理组织级别的关系研究Y A P1和T A Z表达与胶质瘤W H O病理组织级别之间的关系，发现两种蛋白表达与胶质瘤病理组织级别之间具有相关性(P= 0.023，P=0.001，表 1)。
2.3Y A P1和T A Z蛋白表达水平与胶质瘤病理组织级别的相关性分析进一步研究Y A P1和TAZ 蛋白表达与胶质瘤W H O病理组织级别的相关性，统计结果发现Y A P1蛋白表达水平与病理组织级别之间呈正相关(/=0.307,P< 0.01)；同时也发现，TAZ 蛋白表达水平与病理组织级别之间也呈正相关(/= 0.392, P< 0.01)。这就表明，胶质瘤病理组织级别越高，Y A P1和T A Z蛋白阳性表达也越高(表2)。
表2 YAP1、TAZ蛋白表达、胶质瘤病理组织级别的相关性分析
项目W HO分级YAP1TAZ
相关系数 1.0000.3070.392
P NA0.003<0.001
2.4 在胶质瘤中Y A P1和T A Z蛋白表达的相关性分析观察Y A P1和T A Z蛋白之间表达是否具有相关性，结果发现，两种蛋白表达水平呈正相关(r=0.820，P< 0.01)。在胶质瘤中Y A P1 和 TAZ 蛋白具有互相促进作用(表3)。
表3 YAP1和TAZ蛋白表达的相关性分析
项目YAP1TAZ 相关系数 1.0000.820
P NA<0.001
3讨论
神经胶质瘤主要发生在大脑和脊髓的胶质细胞，是常见的大脑恶性肿瘤[1]，而且对放化疗反应不理想[1，11]。当前，胶质瘤的手段主要是手术切除，
表1 YAP1和TAZ蛋白表达水平与胶质瘤病理组织级别的关系分析
WHO分级y a p1〇TAZ
P
低表达髙表达低表达高表达I10293
n128
0.023146
0.001
n12161018 w1019722
术后替莫唑胺为主的化疗和瘤床的放疗。尽管如 此，胶质瘤在手术、放化疗后1年的生存率为57% 左右[12-13]。除了常规外，以分子生物学研究为基 础的靶向可能是胶质瘤的新突破。这依赖 于对胶质瘤发病机制和促癌通路的基础研究。
ffipp 。信号通路是一种高度保守的信号模块组 成的，主要包括了激酶MST 1/2和LATS 1/2、转录共 激活因子Y A P 1和T A Z 、含有序列特异性转录因子 T E A D 的T E A 区域[8，m 5]。越来越多的证据表明， H ippo 信号通路不仅在维持组织器官大小、干细胞 干性、组织再生方面发挥作用，而且有一定的促癌 作用[w °]。Y A P 1和T A Z 最为H ippo 信号通路的核心 成员，在一些恶性肿瘤中被过度激活，包括：肝癌、 乳腺癌、结肠癌、肺癌等[16-19]。研究发现，在小鼠肿瘤 模型中，H ipp o 信号的减弱导致Y A P 1过度激活表 达，显著的促进了小鼠肿瘤的生长，同时这种Y A P 1 过表达还会促使正
常细胞表型的恶化[20]。T A Z 在绝 大多数乳腺癌中高表达或基因过度扩增，这种情况 增强了乳腺正常细胞M CF 10A 形成微球体的能力， 逐步向干细胞转化™。另外，在三阴性乳腺癌中，高 表达Y A P 1可以引起细胞化疗耐药，有效的抑制 Y A P 1表达，原本耐药的乳腺癌细胞恢复了对化疗 药物的敏感性[22]。因此，Hippo -Y A P /T A Z 信号通路的 进一步研究将为肿瘤的靶向提供潜在的靶点， 为临床拓展新的思路。
有关H ippo 信号通路在神经胶质瘤中的研究还 不多见。有研究发现，Y A P 1能够调控放射线照射对 胶质瘤细胞的杀伤作用[23]。Y A P 1和T A Z 蛋白在老 年芋~郁级胶质瘤中的阳性表达率较1~域级胶质 瘤中明显增加；而且与正常脑组织相比，Y A P 1和 T A Z 蛋白在胶质瘤组织中表达显著升高[24]。虽然研 究人略有不同，该研究结果同本文结果比较一 致，本研究纳入标本量较多，更具有说服力。另有学 者发现，无论是蛋白质免疫印迹还是IH C ，都观察到 Y A P 1和T A Z 在32~36例胶质瘤标本中较非肿瘤脑 组织表达升高，且随着胶质瘤病理组织级别增加两 种蛋白表达也增加[25]。虽然该研究仅有30多例胶质 瘤标本，但是也获得和本研究相一致的结果。本研 究在组织标本的数量上有一定的优势，选取89例 胶质瘤标本，通过免疫组织化学染法，检测Y A P 1 和T A Z 的蛋白表达情况，进而分析两种蛋白的表达 与胶质瘤组织分级之间的关系。本研究发现，胶质 瘤组织中Y A P 1和T A Z 蛋白的表达水平都比较高， 分别为50.6%和44.9%，而且病理分级越高两种蛋 白的高表达率也越高，Y A P 1和T A Z 在1~域级胶质
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瘤中表达较低，在芋~郁级胶质瘤中高表达率分别 为61.4%和70.2%。同时，本研究发现，两种蛋白表 达情况与W H O 分级呈正相关，即W H O 分级越高， 两种蛋白的表达也越高。这就提示Y A P 1和T A Z 很 有可能是胶质瘤发生发展过程中的促癌因子。另 外，笔者也发现，Y A P 1和T A Z 两种蛋白在胶质瘤中 的表达呈正相关，即两种蛋白可同时高表达。这就 意味着两种蛋白在胶质瘤的进程中互相促进互相 调控，同时在胶质瘤细胞的恶性事件中扮演促进作 用。这些发现与Hippo -Y A P 1/T A Z 信号通路在其他 恶性肿瘤中的研究结果是一致的。
综上所述，本研究证实了 Hippo -Y A P 1/T A Z 信号 通路在神经胶质瘤中的表达和临床意义，Y A P 1和 T A Z 在胶质瘤中过度表达和互相调控促进了胶质瘤 的进一步发展，本研究为以Hippo -Y A P 1/T A Z 信号通 路为靶点的研究提供了理论依据。【参考文献】
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股指期货仿真交易(收稿日期:2020-12-18)
运动疗法对盘源性腰痛患者功能恢复的疗效观察
黄莉，李越，廖涛，邓尚，曾巧
[摘要1目的观察运动疗法对盘源性腰痛患者功能恢复的临床疗效。方法2019年3月~2020年9月医院收治盘源性 腰痛患者116例，按住院号尾数的奇偶数分为对照组和试验组，各58例。对照组施以常规，试验组在对照组的基础上 施以运动疗法。观察两组患者前和1个月后的疼痛(V A S)评分和JO A评分变化以及1个月后的腰椎功能恢复优 良率。结果1个月后，两组患者的V A S评分J O A评分均较前有不同程度的改善；且试验组V A S评分低于对照组(P< 0.05)，JO A评分、腰椎功能恢复优良率高于对照组(P< 0.05)。结论运动疗法能更有效改善盘源性腰痛患者的临床症状，提高 其日常生活自理能力，促进其腰椎功能的恢复，具有较高的临床价值。
[关键词]运动疗法；盘源性腰痛；疗效
中图分类号R 681.53 文献标识码A
文章编号 1004-0188(2021)01-0038-04 doi:10.3969/j.issn.1004-0188.2021.01.010
Observation on effect of exercise therapy on functional recovery of patients wilfa discogenic low back pain
Huang L i,Li Yue,Liao Tao,Deng Shang,Zeng Qiao Neck-shoulder and Lumbocrural Pain Department1,Sichuan Provincial Orthopedics Hospital,Chengdu,Sichuan, 610041, China
「^bst^act1Objective To obser^^e the clinical effect of exercise therapy on functional recover^^of patients with discogenic low back pain.M eAods A total of116 patients with discogenic low back pain admitted to our hospital from March2019 to September 2020 were equally divided into a control group(n=58) and an experimental group(n=58) according to the parity of their last inpatient number.Conventional treatment was performed on the control group,and exercise therapy based on conventional treatment was performed on the experimental group.The changes in Visual Analogue Scale(V A S)and Japanese Orthopaedic Association (JO A)scores before and one month after treatment,and the lumbar functional recovery after one month of treatment
基金项目：四川省干部保健科研课题(17P J211)
作者单位院610041成都，四川省骨科医院颈肩腰腿痛1科
通信作者：黄莉，电话：136****2654;E-mail:410170484@qq .
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