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药品检验
离子谱法测定肝素钠中草酸根的含量
邓锋.
(广东省药品检验所,
严全鸿
广东广州510180)
摘要：目的加强肝素钠的质量控制，建立草酸根检测方法.方法采用离子谱法对肝素钠中草酸根离子进行测定，并进行方法学 验证.结果线性相关系数r=0.9998，加样回收率为95.2%～99.7%，检测4O批肝素钠原料发现部分草酸根离子含量较高.结论
本方法操作简单，结果准确，灵敏度高，可对肝素钠进行更进一步的质量控制.
关键词：肝素钠；离子谱；草酸根
中图分类号:R927.2文献标志码:A文章编号:l673～4610(2009)07—0048—02 DeterminatiOnOfOxalicIOninHeparinSOdiumbylOn—chrOmatOgraphy DENGFeng,YANQuan—hong
(Guangd0ngPmVincialInstitutef0rDI.ugcontr0l,cuangzhou,Guangd0ng510180,China) Abstract:objectiV eTbestab1ishamethodtodetermine0xalici0ninheparins0dium,andt0im pmveitsquality
cont1.o1.MethodsTheoxa1icjoninheparjnsodju瑚wasdetemlinedbyi0n—chr0mat0graphy.Resu_tSn1elinear
c0emcientc0rrelationwas0.9998,andtherec0veryratewas95.2%～99.7%.Atotalof40batchesofheparinsodium
weretested.rhec0ntentofoxalici0nins0meofth0sebatcheswasrelativelyhigh.ConcIusion Themet}IodissiIIIple
andaccurate.
KeywordS:heparinsodium;ion—chr0matography;oxaJici0n 近年来，围绕肝素钠以及肝素钠注射液的质量问
题不断，药品不良反应时有发生，特别是今年初美国
使用了原料来自中国的肝素钠注射液发生不良反应的报告，其原料和成品的生产监控才引起了相关部门的
高度重视.由于肝素钠原料来源于猪小肠，粗制品的
提取加工基本处于不受监控状态，肝素粗制品的相对
混乱导致了成品的质量和安全受到了很大影响，如近
期研究发现部分肝素钠产品中含有类肝素物质"多硫
酸软骨素"_lJ.但后续的研究和监控发现，无机离子
如草酸根的含量也是肝素钠质量控制的重要指标.本
文利用离子谱对肝素钠中草酸根含量进行了测定,
并参照中国药典关于药品质量分析方法验证指导原
则对本方法进行了验证.此法简单准确，可对肝素
钠产品进行更进一步的质量控制.
1仪器和试药
离子谱仪:D10NExIcsl000；阴离子交换谱
柱10nPacAGl9Guard(4mm×50mm),10nPac
电压比较器电路ASl9(4mm×250mm)；抑制型电导检测器ASRS3O0
(4mm);MILLlPORE超纯水仪.
肝素钠原料(生产企业抽样，共40批)；草酸及
氢氧化钾均为分析纯.
2实验方法
2.1实验条件
淋洗液:28mm0l//L氢氧化钾；抑制电流:70mA;
进样量:25"l；流速:1.0Hd/mjn；柱温:30℃.
2.2检测方法
供试品溶液的制备：精密称取肝素钠0.1g至50lIIl
量瓶中，加超纯水溶解并稀释至刻度.
对照品储备溶液的制备：精密称取草酸0.73g至
200ml量瓶中，加超纯水溶解并稀释至刻度，精密吸
取2ml，加水稀释至100ml(5g/m1)，作为草酸对
照品储备液.取对照品储备液稀释至需要的浓度梯
度.
测定法：精密取对照品溶液与供试品溶液25,
注入谱仪，以草酸浓度与谱峰面积的对应关系计
算供试品溶液中草酸根的含量.
作者简介：邓锋，主管药师,1'el:02O一81887684,Email:deng"************** 48
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2009年7月第19卷第7期?日药学
3线性范围7讨论
取草酸对照品储备液，超纯水稀释至草酸根浓
度分别为0.1,0.2,O.6,1.Ornl，按2.1条件各进
羟基氧化钴
两针，以草酸根浓度为横坐标，峰面积为纵坐标绘制标
准曲线，得到回归方程y=0.1562x,r=0.9998，线性
范围0.1—1.0mI，标准曲线呈线性并通过原点.
4精密度试验
取样品l批，按2.2方法制备6份供试品溶液,
测定含量，平均标准偏差值(RsD)为1.3%.
5加样回收试验
准确称取已知草酸根含量的肝素钠，精密称取6
份，分别精密加入草酸对照品溶液，按2.2方法进行
测定，结果见表l.
表1回收率结果表
6样品测定
分别对抽取的肝素钠原料样品共40批，按2.2方
法制备供试品溶液并进行测定(图1，图2)，结果显
示，有6批样品草酸根含量达到100ppm以上，最高
为181ppm；其余绝大部分样品含量均<50ppm.
金属圆锯片l对照品溶液(0.2g/m1)草酸根谱图
图2样品溶液草酸根谱图
肝素钠分子量一般约为l5000Da，配制成溶液注
入离子谱仪后会残留在离子谱柱中，长期积累会
影响谱柱的分离效果.由于本实验线性好，检测灵
敏度达到0.05g/m1，所以本实验使用了较低的浓
度.此外，还采用了10000Da超滤离心管对样品溶液
进行离心超滤分离，最大限度减少溶液对谱柱的伤害.
阴离子谱柱一般都可以对大多数阴离子进行分
离，而抑制型离子谱分析的优势更加明显J，有报
道采用DIONExIonPacASl4阴离子谱柱用于草酸
根的分离J，但使用后发现其有不足之处，主要问题
是分析时间长，灵敏度较低，谱柱长期使用后草酸
根与硫酸根峰分离度下降等，影响测定结果.采用
Asl9谱柱，分离效果明显改善，且灵敏度高，我
们还适当提高氢氧化钾浓度，使之能达到更好的出峰
时间和分离效果.
通过对40批肝素钠的检测发现，部分批次草酸
根含量异常偏高，说明对肝素钠草酸根进行质量控制
是非常有必要的.虽然没有证据表明草酸根会引起相
关不良反应，但生产和使用过程中，其理化指标的明
显变化说明生产环节可能出现问题，应进行及时检查
和质量监控，保证药品的安全性.
(收稿日期:2O09一O5—12)
参考文献
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