一种伊维菌素脂肪乳浓缩液、其制备方法及用途

一种伊维菌素脂肪乳浓缩液、其制备方法及用途

技术领域

本发明属于药物学和制药学领域，涉及一种伊维菌素脂肪乳浓缩液、其制备方法及用途。

背景技术

伊维菌素（Ivermectin，IVM) 是美国Merck公司开发出的第一个阿维菌素类药物衍生物，与阿维菌素比，IVM毒性更小，更稳定。国外，IVM己被广泛应用于猪、牛、羊、兔、马、骆驼、鹿、狐狸等多种经济动物和犬、猫等宠物。1996年，在全球兽药原料和制剂销售额中，IVM原料药及其主要制剂一害获灭的销售额均为首位，分别达到7．5亿美元和7．35亿美元。此外，IVM还被用于防治人的丝虫和人螨虫病。1996年，全球用过IVM的人达60多万。在国内，IVM作为兽药己在家畜和宠物中开始广泛使用。

伊维菌素水溶性差（4μg/ml），为增强伊维菌素溶解度，专利CN101623256A公开的伊维菌素纳米组合物，使用了大量的Tween-80（除水相外，Tween-80含量高达65.96%），给动物安全性带来巨大风险。脂肪乳（又称脂质微球）是目前医药领域发展较快的剂型，能保护被包被的药物，可提高药物稳定性、延长药物作用时间、降低副作用等，具有一定的缓释性和靶向性。

脂肪乳在热力学及动力学上均属于不稳定体系，制备过程对设备、工艺参数、辅料配比等有着严格的要求，如专利CN101590016A、CN101773470A公开的伊维菌素亚微乳制剂，就是典型的脂肪乳，制备过程需要初乳、高压均质等工艺。另外，现有的脂肪乳需要专门设备在高压下灭菌。本技术领域人员所熟知的，脂肪乳产品需在2~8℃条件下保存，并且要严格避免冷冻，我国养殖区多分布于北方，这给冬季的运输、储存带来不便。

一种理想的伊维菌素脂肪乳，是能保持脂质微球的特性，同时具有制剂稳定性高、外观透明清澈、工艺简单、无需特殊设备，可以通过微孔滤膜方式除菌，以降低生产成本。

发明内容

本发明人经过深入的研究和创造性的劳动，得到了一种伊维菌素脂肪乳浓缩液，本发明人惊奇地发现，本发明的伊维菌素脂肪乳浓缩液，与水混合后，不经过均质手段，即可形成稳定的乳液，可以有效地克服油-水分离现象，并且能有效地克服不同辅料间的密度差而带来的制剂分层现象，由此获得单相、透明、稳定，遇水后能够自发乳化的脂肪乳 

浓缩液，特别是一种伊维菌素脂肪乳浓缩液。由此提供了下述发明：

 本发明的一个方面涉及一种伊维菌素脂肪乳浓缩液，其包含：

主药：伊维菌素，

油：中链脂肪酸甘油酯，

助溶剂：1, 2-丙二醇，

低HLB值表面活性剂（4≤HLB≤9）：磷脂，和

高HLB值表面活性剂（HLB≥12）：聚乙二醇十二羟基硬脂酸酯和/或聚氧乙烯醚(35)蓖麻油；

可选地，所述油还包含大豆油；

可选地，所述低HLB值表面活性剂还包含聚甘油油酸酯；

可选地，所述高HLB值表面活性剂还包含吐温80。

根据本发明任一项所述的伊维菌素脂肪乳浓缩液，其特征在于如下的（1）－（5）项中的任意一项或者多项： 

（1）所述伊维菌素的含量为1－20%（w/w），优选为5－15%（w/w）；

（2）所述油的含量为45－85％（w/w），优选为50－70％（w/w）；

（3）所述助溶剂的含量为5－30%（w/w），优选为5－20%（w/w）；

（4）所述低HLB值表面活性剂的含量为5%－20％（w/w）；

（5）所述高HLB值表面活性剂的含量为5%－20％（w/w）。

根据本发明任一项所述的伊维菌素脂肪乳浓缩液，其特征在于如下的（1）－（9）项中的任意一项或者多项：

（1）所述伊维菌素的含量为5－15%（w/w），优选为7.5－12%（w/w）；

（2）所述中链脂肪酸甘油酯的含量为20％－70%（w/w），优选为25％－65%（w/w）；

（3）所述大豆油的含量为0－50%（w/w），优选为0－30%（w/w）；

（4）所述1, 2-丙二醇的含量为5％－15％（w/w），优选为7.5％－10％（w/w）；

（5）所述磷脂的含量为5％－15％（w/w），优选为6.5％－10.5％（w/w）；

（6）所述聚甘油油酸酯的含量为0－8％（w/w），优选为0－5％（w/w）；

（7）所述聚乙二醇十二羟基硬脂酸酯的含量为0－15％（w/w），优选为0－10％（w/w）；

（8）所述吐温80的含量为0－15％（w/w），优选为0－10％（w/w）；

（9）所述聚氧乙烯醚(35)蓖麻油的含量为0－15％（w/w），优选为0－10％（w/w）。

根据本发明任一项所述的伊维菌素脂肪乳浓缩液，其特征在于如下的（1）－（5）项中的任意一项或者多项：

（1）所述的伊维菌素脂肪乳浓缩液不含水或含水量低于1％；

（2）所述的伊维菌素脂肪乳浓缩液不含糖类；

（3）所述的伊维菌素脂肪乳浓缩液不含糊精；

（4）所述的伊维菌素脂肪乳浓缩液其制备方法不包含除去或者降低水分的步骤（例如旋转蒸发、喷雾干燥或冷冻干燥）；

（5）可选地，所述伊维菌素脂肪乳浓缩液还包含抗氧化剂；具体地，所述抗氧化剂选自油酸、油酸钠、维生素E和维生素A的任意一种或多种；

（6）所述的伊维菌素脂肪乳浓缩液为透明、单相溶液。

根据本发明任一项所述的伊维菌素脂肪乳浓缩液，其组分和含量如下面1）－2）组中的任意一组所示：

1）

伊维菌素                        7.5~12克

中链脂肪酸甘油酯                25~65克

大豆油                         0~30克

1, 2-丙二醇                      7.5~10克

大豆卵磷脂                     6.5~10.5克

聚甘油油酸酯                    0~5克

聚乙二醇十二羟基硬脂酸酯       5~10克

吐温80                         2~10克

油酸                             0~0.3克

油酸钠                          0~0.3克

维生素E                         0~0.3克；

2）

伊维菌素                        7.5~12克

中链脂肪酸甘油酯                55~65克

1, 2-丙二醇                       9~10克

大豆卵磷脂                     6.5~10.5克

聚甘油油酸酯                   0~5克

聚氧乙烯醚(35)蓖麻油           8~10克

油酸                            0~0.3克

油酸钠                         0~0.3克

维生素E                        0~0.3克。

根据本发明任一项所述的伊维菌素脂肪乳浓缩液，其组分和含量如下面的（1）－（4）组中的任意一组所示：

（1）

伊维菌素                                     7.6克

中链脂肪酸甘油酯（Capmul MCM，Abitec）      26.6克

大豆油                                     26.6克

1, 2-丙二醇                                  8.3克

大豆卵磷脂                                 9.4克

聚甘油油酸酯                                 3.1克

聚乙二醇十二羟基硬脂酸酯（Solutol HS 15，BASF）     10克

吐温80                                     8.2克

油酸                                          0.1克

维生素E                                       0.1克；

（2）

伊维菌素                                      10.8克

中链脂肪酸甘油酯（Capmul MCM，Abitec）       60克

1, 2-丙二醇                                  7.5克

大豆卵磷脂                                 6.7克

聚甘油油酸酯                                 3.7克

聚乙二醇十二羟基硬脂酸酯（Solutol HS 15，BASF）     7.4克

吐温80                                     3.7克

油酸                                          0.1克

维生素E                                      0.1克；

（3）

伊维菌素                                     11.7克

中链脂肪酸甘油酯（Capmul MCM，Abitec）      59.7克

1, 2-丙二醇                                  9.4克

大豆卵磷脂                                 10.5克

聚氧乙烯醚(35)蓖麻油（Cremophor EL，BASF）      8.7克；

（4）

伊维菌素                                     10.9克

中链脂肪酸甘油酯（Crodamol， GTCC）        60.6克

1, 2-丙二醇                                 9克

大豆卵磷脂                                6.7克

聚甘油油酸酯                                4.5克

聚氧乙烯醚(35)蓖麻油（Cremophor EL，BASF）      8.2克

油酸钠                                     0.1克。

需要说明的是，上述的1）－2）组或者（1）－（4）组中的单位克表示各组分之间的比例，如果修改为其它的重量单位，包括但不限于，例如千克等，也均在本发明的保护范围之内。

本发明的再一方面涉及一种伊维菌素脂肪乳，其由本发明中任一项所述的伊维菌素脂肪乳浓缩液加注射用水自乳化制得；具体地，所述伊维菌素脂肪乳平均粒径为0.01－0.7μm；优选为0.1－0.4μm；更优选地，为0.11－0.24μm。

本发明的伊维菌素脂肪乳浓缩液遇水稀释后，可自发乳化为伊维菌素脂肪乳。

本发明的再一方面涉及本发明中任一项所述的伊维菌素脂肪乳浓缩液的制备方法，包括下述步骤：

1）在20－45℃，将低HLB值表面活性剂加入油，在1000－10000rpm条件下，搅拌至形成透明清亮溶液；

2）在20－45℃条件下，将伊维菌素、助溶剂、高HLB值表面活性剂、及可选的抗氧化剂加入步骤1）产物，在并在200－2000rpm搅拌条件下持续搅拌，直至整个体系呈透明清亮状，经0.22μm微孔滤膜除菌后，最终获得伊维菌素脂肪乳浓缩液。

关于步骤1）或步骤2）中所使用的油、低HLB值表面活性剂、高HLB值表面活性剂和助溶剂，其中水分含量要低于1%，或者没有游离水的存在。

步骤2）中的产品，在不经过除去或者降低水分的步骤（例如旋转蒸发、喷雾干燥或冷冻干燥），含水量低于1％（按重量百分比计）。

本发明的再一方面涉及本发明中任一项所述的伊维菌素脂肪乳浓缩液或者本发明的伊维菌素脂肪乳制剂在防治禽畜的胃肠道线虫病、牛皮蝇蛆、纹皮蝇蛆、羊鼻蝇蛆、羊痒螨病和猪疥螨病，及其他寄生性昆虫病中的应用。

本发明涉及的部分术语的解释：

本发明中，对于各个组分的含量的百分比，如果没有特别说明，均指占药物组合物总重量的重量百分比（w/w）。

发明的有益效果

本发明产品流动性好，不挂壁，外观呈单相、透明、清亮状，反复冻融后不会发生制剂分层现象；本发明的产品遇水形成伊维菌素脂肪乳体系过程中，仅需要轻微振荡即能自发乳化，使用时经生理盐水等水溶液稀释并轻微振荡后，能够自发乳化为脂肪乳体系。

本发明的产品，所用辅料为药用级，安全性高，环境友好。本发明制备工艺简单，仅涉及普通搅拌过程，易于运输、储存，极具应用前景。

具体实施方式

下面将结合实施例对本发明的实施方案进行详细描述，但是本领域技术人员将会理解，下列实施例仅用于说明本发明，而不应视为限定本发明的范围。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规产品。

实施例1：伊维菌素脂肪乳浓缩液样品1的制备

其组成成分如下：

伊维菌素                                     7.6克

中链脂肪酸甘油酯（Capmul MCM，Abitec）      26.6克

大豆油                                     26.6克

1, 2-丙二醇                                  8.3克

大豆卵磷脂                                 9.4克

聚甘油油酸酯                                 3.1克

聚乙二醇十二羟基硬脂酸酯（Solutol HS 15，BASF）     10克

吐温80                                     8.2克

油酸                                          0.1克

维生素E                                       0.1克

该伊维菌素脂肪乳浓缩液制备方法如下：

1）在20℃，将上述重量的大豆卵磷脂、聚甘油油酸酯加入中链脂肪酸甘油酯和大豆油中，在8000rpm条件下，搅拌至形成透明清亮溶液；

2）在45℃条件下，将上述重量的伊维菌素、1, 2-丙二醇、聚乙二醇十二羟基硬脂酸酯、吐温80、油酸、维生素E加入步骤1）产物，在并在1000rpm搅拌条件下持续搅拌，直至整个体系呈透明清亮状，经0.22μm微孔滤膜除菌后，最终获得伊维菌素脂肪乳浓缩液。

实施例2：伊维菌素脂肪乳浓缩液样品2的制备

其组成成分如下：

伊维菌素                                      10.8克

中链脂肪酸甘油酯（Capmul MCM，Abitec）       60克

1, 2-丙二醇                                  7.5克

大豆卵磷脂                                 6.7克

聚甘油油酸酯                                 3.7克

聚乙二醇十二羟基硬脂酸酯（Solutol HS 15，BASF）     7.4克

吐温80                                     3.7克

油酸                                          0.1克

维生素E                                      0.1克

该伊维菌素脂肪乳浓缩液制备方法如下：

1）在45℃，将上述重量的大豆卵磷脂、聚甘油油酸酯加入中链脂肪酸甘油酯，在10000rpm条件下，搅拌至形成透明清亮溶液；

2）在20℃条件下，将上述重量的伊维菌素、1, 2-丙二醇、聚乙二醇十二羟基硬脂酸酯、吐温80、油酸、维生素E加入步骤1）产物，在并在2000rpm搅拌条件下持续搅拌，直至整个体系呈透明清亮状，经0.22μm微孔滤膜除菌后，最终获得伊维菌素脂肪乳浓缩液。

实施例3：伊维菌素脂肪乳浓缩液样品3的制备

其组成成分如下：

伊维菌素                                     11.7克

中链脂肪酸甘油酯（Capmul MCM，Abitec）      59.7克

1, 2-丙二醇                                  9.4克

大豆卵磷脂                                 10.5克

聚氧乙烯醚(35)蓖麻油（Cremophor EL，BASF）      8.7克

该伊维菌素脂肪乳浓缩液制备方法如下：

1）在25℃，将上述重量的大豆卵磷脂加入中链脂肪酸甘油酯，在1000rpm条件下，搅拌至形成透明清亮溶液；

2）在25℃条件下，将上述重量的伊维菌素、1, 2-丙二醇、聚氧乙烯醚(35)蓖麻油加入步骤1）产物，在并在200rpm搅拌条件下持续搅拌，直至整个体系呈透明清亮状，经0.22μm微孔滤膜除菌后，最终获得伊维菌素脂肪乳浓缩液。

实施例4：伊维菌素脂肪乳浓缩液样品4的制备

其组成成分如下：

伊维菌素                                     10.9克

中链脂肪酸甘油酯（Crodamol， GTCC）        60.6克

1, 2-丙二醇                                 9克

大豆卵磷脂                                6.7克

聚甘油油酸酯                                4.5克

聚氧乙烯醚(35)蓖麻油（Cremophor EL，BASF）      8.2克

油酸钠                                     0.1克

该伊维菌素脂肪乳浓缩液制备方法如下：

1）在25℃，将上述重量的大豆卵磷脂、聚甘油油酸酯加入中链脂肪酸甘油酯，在3000rpm条件下，搅拌至形成透明清亮溶液；

2）在25℃条件下，将上述重量的伊维菌素、1, 2-丙二醇、聚氧乙烯醚(35)蓖麻油、油酸钠加入步骤1）产物，在并在200rpm搅拌条件下持续搅拌，直至整个体系呈透明清亮状，经0.22μm微孔滤膜除菌后，最终获得伊维菌素脂肪乳浓缩液。

实施例5：稳定性试验

实施例1－4制备的样品1－4。

实验方法：将不同样品在-20℃冷冻过夜后，放置于20℃自然解冻，如此反复冻融6次，环境条件下观察样品外观，并测定冻融前后粒径变化。

粒径检测方法：采用Malvern Zetasizer 3000HSA粒度分析仪检测粒径，测定前，样品加入10倍体积的生理盐水，经轻微振荡自发乳化后测定。

表1：不同样品经冻融后，样品外观变化

样品 外观变化

1 外观澄清，不分层，不挂壁，流动性好

2 外观澄清，不分层，不挂壁，流动性好

3 外观澄清，不分层，不挂壁，流动性好

4 外观澄清，不分层，不挂壁，流动性好

表2：不同样品平均粒径

由表1可见，样品1－4均具有极好的稳定性，经过反复冻融，外观仍能保持透明均一相，不挂壁、不分层，具有良好的流动性。由表2可知，四个实施例产品乳化后的平均粒径在110~250nm之间，属于典型的脂肪乳产品，并且粒径不受浓缩乳液冻融影响。

尽管本发明的具体实施方式已经得到详细的描述，本领域技术人员将会理解。根据已经公开的所有教导，可以对那些细节进行各种修改和替换，这些改变均在本发明的保护范围之内。本发明的全部范围由所附权利要求及其任何等同物给出。