G01N33/544
1.一种粮油中转基因成分的快速检测装置,其特征在于,包括加样装置、多根中空纤维 素聚丙烯膜和多孔板体,所述中空纤维聚丙烯膜上附着有与总蛋白中的转基因蛋白质特异 性结合的一抗,所述加样装置包括第2多孔板体,第2多孔板体上设置有与其形成一空腔的 圆锥体,所述圆锥体直径由下到上逐渐减小,所述多根中空纤维聚丙烯膜的一端固定在所 述第2多孔板体且与所述第2多孔板体上的孔洞连通,所述多根中空纤维聚丙烯膜的另一端 固定在所述第1多孔板体且与所述第1多孔板体上的孔洞连通,当总蛋白通过所述检测装置 时,封闭所述第1多孔板体上的孔洞,以使总蛋白的流动仅发生在所述多根中空纤维聚丙烯 膜的一端和所述中空纤维聚丙烯膜的膜孔之间,使该转基因蛋白质与所述一抗结合并附着 到所述中空纤维聚丙烯膜上。
2.根据权利要求1所述的粮油中转基因成分的快速检测装置,其特征在于,所述圆锥体 设置2个,每个圆锥体设置一组与其对应的中空纤维聚丙烯膜,每一组中空纤维聚丙烯膜独 立设置,一边同时检测多个待测样品。
3.根据权利要求2所述的粮油中转基因成分的快速检测装置,其特征在于,每一组中空 纤维聚丙烯膜设置5-15根,每根长10-20cm;每根中空纤维聚丙烯膜自己形成有一个腔,每 根中空纤维聚丙烯膜的直径为10~20mm。
本发明涉及食品转基因成分快速检测技术领域,具体地,涉及一种粮油中转基因 成分的快速检测装置。
为了增强作物抗虫害、抗病毒等的能力;提高农产品耐贮性,增加作物产量。转基 因作物是现在育种领域的新热点,通过基因工程技术将一种或几种外源性基因转移到某种 特定的生物体中,并使其有效地表达出相应的产物(多肽或蛋白质),此过程叫转基因。转基 因生物的安全评价是转基因生物及其产品市场化和商品化的前提,在安全评价中转基因成 分的检测是一项重要内容,建立转基因生物快速、简便、准确的检测方法为安全评价和管理 奠定基础。
植物性转基因食品的检测主要采用以下两条技术路线,一是应用PCR、Southern等 技术检测插入的外源基因,二是使用Elisa、Western等检测转基因表达的蛋白。蛋白质水平 的检测,主要是基于抗原和抗体相互作用的免疫学方法,针对转基因植物及其产品中外源 目的基因表达的特异性蛋白进行定性和定量检测,其结果相对更加精准,可靠性也更好。但 是目前的检测手段基本都是分子生物学方法,通常需要依赖具备良好实验条件的实验室进 行,而且步骤繁琐,通常需要专业的实验人员进行操作,获取实验结果过程比较man,不能满 足一些需要快速检出转基因成分的机构。
针对现有技术上的不足,本发明提供一种粮油中转基因成分的快速检测装置。
为了解决上述技术问题,本发明通过以下技术方案得以实现:
一种粮油中转基因成分的快速检测装置,包括加样装置、多根中空纤维素聚丙烯 膜和多孔板体,所述中空纤维聚丙烯膜上附着有与总蛋白中的转基因蛋白质特异性结合的 一抗,所述加样装置包括第2多孔板体,第2多孔板体上设置有与其形成一空腔的圆锥体,所 述圆锥体直径由下到上逐渐减小,所述多根中空纤维聚丙烯膜的一端固定在所述第2多孔 板体且与所述第2多孔板体上的孔洞连通,所述多根中空纤维聚丙烯膜的另一端固定在所 述第1多孔板体且与所述第1多孔板体上的孔洞连通,当总蛋白通过所述检测装置时,封闭 所述第1多孔板体上的孔洞,以使总蛋白的流动仅发生在所述多根中空纤维聚丙烯膜的一 端和所述中空纤维聚丙烯膜的膜孔之间,使该转基因蛋白质与所述一抗结合并附着到所述 中空纤维聚丙烯膜上。
相对于现有技术,本发明的有益效果:
1、本发明设计简单,使用方便,易于操作。
2、本发明创造性地将转基因表达蛋白的抗体固定在纤维聚丙烯膜,从而通过使待 检测原材料的总蛋白流过该检测装置来检测原材料中是否存在转基因蛋白质,能够有效快 速地检测是否存在转基因蛋白。
3、本发明同时设置两个加样孔,两组中空纤维聚丙烯膜,因而本发明的装置可以 同时进行两组样品检测。
4、本发明的装置检测转基因产品,准确度较高,达到96%左右,虽然还没有达到荧 光定量PCR的准确度,但是本发明的检测装置检测快速,检测步骤简便,耗时短,对于精度要 求不高的现场快速检测,本发明的装置完全可以满足。本发明的检测装置其10次检测的偏 差率在7%左右,表明使用本发明的装置检测结果稳定性较好,其检测结果更具有客观性。
此处的附图被并入说明书中并构成本说明书的一部分,示出了符合本发明的实施 例,并与说明书一起用于解释本发明的原理。
图1是本发明的结构示意图。
结合以下实施例对本发明作进一步描述。
图1是示例性实施例示出的一种粮油中转基因成分的快速检测装置的结构示意 图,如图1所示:
一种粮油中转基因成分的快速检测装置,包括加样装置、多根中空纤维素聚丙烯 膜和多孔板体,所述中空纤维聚丙烯膜上附着有与总蛋白中的转基因蛋白质特异性结合的 一抗,所述加样装置包括第2多孔板体,第2多孔板体上设置有与其形成一空腔的圆锥体,所 述圆锥体直径由下到上逐渐减小,所述多根中空纤维聚丙烯膜的一端固定在所述第2多孔 板体且与所述第2多孔板体上的孔洞连通,所述多根中空纤维聚丙烯膜的另一端固定在所 述第1多孔板体且与所述第1多孔板体上的孔洞连通,当总蛋白通过所述检测装置时,封闭 所述第1多孔板体上的孔洞,以使总蛋白的流动仅发生在所述多根中空纤维聚丙烯膜的一 端和所述中空纤维聚丙烯膜的膜孔之间,使该转基因蛋白质与所述一抗结合并附着到所述 中空纤维聚丙烯膜上。
优选地,所述圆锥体设置2个,每个圆锥体设置一组与其对应的中空纤维聚丙烯 膜,每一组中空纤维聚丙烯膜独立设置,一边同时检测多个待测样品。
优选地,每一组中空纤维聚丙烯膜设置5-15根,每根长10-20cm;每根中空纤维聚 丙烯膜自己形成有一个腔,每根中空纤维聚丙烯膜的直径为10~20mm。
更优选地,以上所述粮油中转基因成分的快速检测装置,可以用于玉米、水稻、高 粱、小麦和大豆的转基因成分快速检测,也可以用于玉米、水稻、高粱、小麦和大豆的加工品 转基因成分快速检测。
本发明创造性地将转基因表达蛋白的抗体固定在纤维聚丙烯膜,从而通过使待检 测原材料的总蛋白流过该检测装置来检测原材料中是否存在转基因蛋白质,能够有效快速 地检测是否存在转基因蛋白。本发明同时设置两个加样孔,两组中空纤维聚丙烯膜,因而本 发明的装置可以同时进行两组样品检测。
以下示例性地介绍一种使用本发明的检测装置的粮油中转基因成分的快速检测 方法,包括以下步骤:
S1.提取待测样品的总蛋白质;
S2.将S1得到的总蛋白质注射加样孔,封闭所述第一多孔板体上的孔洞,以使总蛋 白的流动仅发生在所述多根中空纤维聚丙烯膜的一端和所述中空纤维聚丙烯膜的膜孔之 间,使该转基因蛋白质与所述一抗结合进而附着到所述中空纤维聚丙烯膜上;
S3打开所述第一多孔板体上的孔洞,洗涤所述中空纤维聚丙烯膜的腔中的残渣;
S4再次封闭所述第一多孔板体上的孔洞,将与所述转基因蛋白质特异性结合的且 带有标记的二抗注射到所述检测装置的加样孔,使二抗通过所述检测装置;
S5.再次打开所述第一多孔板体上的孔洞,洗涤所述中空纤维聚丙烯膜的腔中的 残渣;
S6.利用DAB辣根过氧化物酶显试剂盒检测所述中空纤维聚丙烯膜上是否存在 所述二抗的标记,若存在所述标记,则认为该总蛋白中存在该转基因蛋白,并判断该原材料 中存在转基因成分。
本发明粮油中转基因成分的快速检测装置,将转基因蛋白质的第一抗体附着在中 空纤维聚丙烯膜上,从而通过使待检测原材料的总蛋白流过该检测装置来检测原材料中是 否存在转基因蛋白质,并且通过注射器将蛋白质液体加入到本发明的检测装置中,易于操 作,本发明的装置能够有效快速地检测是否存在转基因蛋白,依照本发明的方法能快速检 测转基因蛋白,本发明的方法对于转基因蛋白的检测快速、准确,效率高。
实验例
由于本发明的原理是使用转基因产物蛋白质与其抗体结合,进而检测是否存在外 源基因。为了验证本发明的可行性和准确性及稳定性,本实验例同时使用灵敏度较高的荧 光定量PCR进行验证。取同样的待测样品,分别使用本发明的装置和荧光定量PCR进行检测, 本发明装置为实验组,荧光定量PCR为对照组,每个处理重复3次,结果取平均值计算,结果 如表1所示:
表1
样品 实验组准确度 对照组准确度 10次偏差率
面粉 95.7% 99.3% 5.9%
稻米 96.5% 99.1% 7.1%
玉米 97.2% 98.9% 6.5%
综合表1可以知,使用本发明的装置检测转基因产品,准确度较高,达到96%左右, 虽然还没有达到荧光定量PCR的准确度,但是本发明的检测装置检测快速,检测步骤简便, 耗时短,对于精度要求不高的现场快速检测,本发明的装置完全可以满足。本发明的检测装 置其10次检测的偏差率在7%左右,表明使用本发明的装置检测结果稳定性较好,其检测结 果更具有客观性。
最后应当说明的是,以上实施例仅用以说明本发明的技术方案,而非对本发明保 护范围的限制,尽管参照较佳实施例对本发明作了详细地说明,本领域的普通技术人员应 当理解,可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换,而不脱离本发明技术方案的实 质和范围。
本文发布于:2024-09-25 17:18:54,感谢您对本站的认可!
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