一种抑制破伤风梭菌的药物的制备方法

一种抑制破伤风梭菌的药物的制备方法

技术领域：

本发明涉及中药配制药物技术领域，尤其涉及一种抑制破伤风梭菌的药物的制备方法。

背景技术：

中医论破伤风，论曰，破伤风因卒暴伤损，风邪袭之，传播经络，使寒热更作，身体反强，口噤不开，甚者邪气入脏，则不可治。若疮久不瘥，荣卫虚弱，肌肉不生，疮眼不合者，风邪亦能外入。而致破伤风。

破伤风致病菌是破伤风梭菌，为专性厌氧，革兰染阳性。以芽胞状态分布于自然界，尤以土壤中为常见。此菌对环境有很强的抗力，能耐煮沸。发病主要因素就是缺氧环境。创伤时，破伤风梭菌可污染深部组织（如盲管外伤、深部刺伤等）。如果伤口外口较小，伤口内有坏死组织、血块充塞，或填塞过紧、局部缺血等，就形成了一个适合该菌生长繁殖的缺氧环境。如果同时存在需氧菌感染，后者将消耗伤口内残留的氧气，使本病更易于发生。破伤风症状是全身乏力、头晕、头痛、咀嚼无力、局部肌肉发紧、扯痛、反射亢进等。典型症状是在肌紧张性收缩（肌强直、发硬）的基础上，阵发性强烈痉挛，通常最先受影响的肌是咀嚼肌，随后顺序为面部表情肌、颈、背、腹、四肢肌，最后为膈肌。相应出现的征象为：张口困难（牙关紧闭）、蹙眉、口角下缩、咧嘴“苦笑”、颈部强直、头后仰；当背、腹肌同时收缩，因背部肌较为有力，躯干因而扭曲成弓、结合颈、四肢的屈膝、弯肘、半握拳等痉挛姿态，形成“角弓反张”或“侧弓反张”；膈肌受影响后，发作时面唇青紫，通气困难，可出现呼吸暂停。上述发作可因轻微的刺激，如光、声、接触、饮水等而诱发。

现有技术中，如2014106374963公开了一种破伤风的中药制剂，选择的中药原料及重量份分别是：天南星15份、乌梢蛇10份、威灵仙12份、蝉衣15份、白僵蚕20份、天麻15份、防风18份、草乌15份、白菊花30份、白附子9份、全蝎10份。再如2015104665494公开了破伤风的中药，关白附5-8份，入地金牛3-5份，土牛膝3-10份，白丁香2-5份，地菍2-5份，三叉苦3-8份，大血藤5-15份，重楼3-8份，蛇莓2-5份，玳瑁5-8份，九仙草3-5份，洋金花3-5份，罗勒2-4份，羊角参2-9份。现有技术中还有若干林林总总的破伤风的各种组合物，但是其仅是罗列例，而无任何动物实验或致病菌实验数据验证。本发明旨在提供一种配比简单，使用方便，针对破伤风效果好，抑制破伤风梭菌效果好的一种抑制破伤风梭菌的药物的制备方法。

发明内容：

本发明的目的在于以现有技术为基础，提供一种配比简单，使用方便，针对破伤风效果好，抑制破伤风梭菌效果好的一种抑制破伤风梭菌的药物的制备方法。

发明内容：

本发明的目的在于以现有技术为基础，提供一种配比简单，使用方便，针对破伤风效果好，抑制破伤风梭菌效果好的一种抑制破伤风梭菌的药物。

为了实现上述目的，本发明提供了一种抑制破伤风梭菌的药物，包括按照质量单位配制的杀菌组和组，其中：

杀菌组为：五味子、秦皮、青黛、儿茶、桑叶、黄连、竹茹、血竭、乌梅各60-80g；

组为：桔梗、薏苡仁、鱼腥草各40-60g，黄连、白鲜皮、白蔹、土牛膝、八角枫、徐长卿、侧柏叶、白茅根各30-50g，血余炭、花生衣、川芎、延胡索、乳香、没药、儿茶、血竭各20-40g，甘草10-30g。

或者，抑制破伤风梭菌的药物，包括按照质量单位配制的杀菌组和组，其特征在于：

杀菌组为：五味子、秦皮、青黛、儿茶、桑叶、黄连、竹茹、血竭、乌梅各60-70；

组为：桔梗、薏苡仁、鱼腥草各40-50g，黄连、白鲜皮、白蔹、土牛膝、八角枫、徐长卿、侧柏叶、白茅根各30-40g，血余炭、花生衣、川芎、延胡索、乳香、没药、儿茶、血竭各20-30g，甘草10-20g。

或者，包括按照质量单位配制的杀菌组和组，其特征在于：

杀菌组为：五味子、秦皮、青黛、儿茶、桑叶、黄连、竹茹、血竭、乌梅各50-80g；

组为：桔梗、薏苡仁、鱼腥草各50-60g，黄连、白鲜皮、白蔹、土牛膝、八角枫、徐长卿、侧柏叶、白茅根各40-50g，血余炭、花生衣、川芎、延胡索、乳香、没药、儿茶、血竭各30-40g，甘草20-30g。

或者，包括按照质量单位配制的杀菌组和组，其特征在于：

杀菌组为：五味子、秦皮、青黛、儿茶、桑叶、黄连、竹茹、血竭、乌梅各55-75g；

组为：桔梗、薏苡仁、鱼腥草各45-55g，黄连、白鲜皮、白蔹、土牛膝、八角枫、徐长卿、侧柏叶、白茅根各35-45g，血余炭、花生衣、川芎、延胡索、乳香、没药、儿茶、血竭各35-35g，甘草15-25g。

将本发明杀菌组制备为粉剂：将杀菌组各组分粉碎后混合，获得混合物，浸泡24小时后，将混合物加入到6~8倍量的水中进行煎煮，每次煎煮2~4小时，煎煮3次，每次煎煮完后过滤，将滤液混合，进行减压浓缩获得浸膏，将浸膏加入到相对于混合物质量2~3倍量的醇浓度为90%~95%的乙醇溶液中，搅拌完全溶解，随后在4℃温度以下静置过夜，随后过滤，将滤液进行减压浓缩除去乙醇，获得的膏体粉碎为粉末，经紫外线照射消毒10秒，即得本发明的杀菌剂。单独使用杀菌组，兑水搅拌均匀，质量比为1：8。

将本发明组制备为粉剂：将组各组分粉碎后混合，获得混合物，浸泡24小时后，将混合物加入到6~8倍量的水中进行煎煮，每次煎煮2~4小时，煎煮3次，每次煎煮完后过滤，将滤液混合，进行减压浓缩获得浸膏，将浸膏加入到相对于混合物质量2~3倍量的醇浓度为90%~95%的乙醇溶液中，搅拌完全溶解，随后在4℃温度以下静置过夜，随后过滤，将滤液进行减压浓缩除去乙醇，获得的膏体粉碎为粉末，经紫外线照射消毒10秒，即得本发明的组，组使用在杀菌组之后，使用组兑水搅拌均匀，质量比为1：4。

封装时，杀菌组与组分别封装两个塑料软囊内，并将两个软囊并列粘接一起。

使用方法：外用，兑水冲洗，先用杀菌组冲洗，再用组冲洗。

本发明的优点：配比简单，使用方便，针对破伤风效果好，抑制破伤风梭菌效果好。

本发明以杀菌组抑制厌氧菌，冲洗的过程中，抑制、杀灭破伤风梭菌。

以组对杀菌操作后的创口进行冲洗给药，以排脓的桔梗、薏苡仁、鱼腥草为君药；组以退热的黄连、白鲜皮，解毒的白蔹、土牛膝，消肿定痛的八角枫、徐长卿，凉血止血的侧柏叶、白茅根，凉血止血的血余炭、花生衣，行气止血止痛的川芎，延胡索，生肌止痛的乳香、没药、儿茶、血竭为佐药，以甘草为使药。

具体实施方式：

抑制破伤风梭菌的药物，包括按照质量单位配制的杀菌组和组，其中：

杀菌组为：五味子、秦皮、青黛、儿茶、桑叶、黄连、竹茹、血竭、乌梅各60-80g；

组为：桔梗、薏苡仁、鱼腥草各40-60g，黄连、白鲜皮、白蔹、土牛膝、八角枫、徐长卿、侧柏叶、白茅根各30-50g，血余炭、花生衣、川芎、延胡索、乳香、没药、儿茶、血竭各20-40g，甘草10-30g。

或者，抑制破伤风梭菌的药物，包括按照质量单位配制的杀菌组和组，其特征在于：

杀菌组为：五味子、秦皮、青黛、儿茶、桑叶、黄连、竹茹、血竭、乌梅各60-70；

组为：桔梗、薏苡仁、鱼腥草各40-50g，黄连、白鲜皮、白蔹、土牛膝、八角枫、徐长卿、侧柏叶、白茅根各30-40g，血余炭、花生衣、川芎、延胡索、乳香、没药、儿茶、血竭各20-30g，甘草10-20g。

或者，包括按照质量单位配制的杀菌组和组，其特征在于：

杀菌组为：五味子、秦皮、青黛、儿茶、桑叶、黄连、竹茹、血竭、乌梅各50-80g；

组为：桔梗、薏苡仁、鱼腥草各50-60g，黄连、白鲜皮、白蔹、土牛膝、八角枫、徐长卿、侧柏叶、白茅根各40-50g，血余炭、花生衣、川芎、延胡索、乳香、没药、儿茶、血竭各30-40g，甘草20-30g。

或者，包括按照质量单位配制的杀菌组和组，其特征在于：

杀菌组为：五味子、秦皮、青黛、儿茶、桑叶、黄连、竹茹、血竭、乌梅各55-75g；

组为：桔梗、薏苡仁、鱼腥草各45-55g，黄连、白鲜皮、白蔹、土牛膝、八角枫、徐长卿、侧柏叶、白茅根各35-45g，血余炭、花生衣、川芎、延胡索、乳香、没药、儿茶、血竭各35-35g，甘草15-25g。

将本发明杀菌组制备为粉剂：将杀菌组各组分粉碎后混合，获得混合物，浸泡24小时后，将混合物加入到6~8倍量的水中进行煎煮，每次煎煮2~4小时，煎煮3次，每次煎煮完后过滤，将滤液混合，进行减压浓缩获得浸膏，将浸膏加入到相对于混合物质量2~3倍量的醇浓度为90%~95%的乙醇溶液中，搅拌完全溶解，随后在4℃温度以下静置过夜，随后过滤，将滤液进行减压浓缩除去乙醇，获得的膏体粉碎为粉末，经紫外线照射消毒10秒，即得本发明的杀菌剂。单独使用杀菌组，兑水搅拌均匀，质量比为1：8。

将本发明组制备为粉剂：将组各组分粉碎后混合，获得混合物，浸泡24小时后，将混合物加入到6~8倍量的水中进行煎煮，每次煎煮2~4小时，煎煮3次，每次煎煮完后过滤，将滤液混合，进行减压浓缩获得浸膏，将浸膏加入到相对于混合物质量2~3倍量的醇浓度为90%~95%的乙醇溶液中，搅拌完全溶解，随后在4℃温度以下静置过夜，随后过滤，将滤液进行减压浓缩除去乙醇，获得的膏体粉碎为粉末，经紫外线照射消毒10秒，即得本发明的组，组使用在杀菌组之后，使用组兑水搅拌均匀，质量比为1：4。

封装时，杀菌组与组分别封装两个塑料软囊内，并将两个软囊并列粘接一起。

使用方法：外用，兑水冲洗，先用杀菌组冲洗，再用组冲洗。

抑菌实验

1、取破伤风梭菌，接种厌氧培基，厌氧条件下培养48h，生理盐水洗下，标准管比浊测定，调节厌氧菌5×10⁶CUF/ml

2、筛选采用平皿打孔法。标准：抑菌环>20mm为高敏感，抑菌环11-19mm为敏感，10mm以下为耐药。

3、组别的抑菌活性测定采用琼脂稀释法。

第一组为本实施例1中单独使用杀菌组的组方的效果。

第二组为本实施例1中单独使用组的组方的效果。

第三组为本实施例1使用了杀菌组与组之后的效果

第四组为背景技术2014106374963的组方的效果。

第五组为背景技术2015104665494的组方的效果。

第六组为甲硝唑的水溶液的抑菌的效果

上表可以发现，第一组和第三组的使用效果最好。但是第三组为第一组、第二组连续使用后的效果。在此，再测定第一组、第二组效果最好的质量比浓度。下表为细菌在不同浓度的琼脂板的生长情况

模型比较试验：

120只大鼠，从大鼠腿侧切割2cm长度创口，24小时内吹热风12次，2小时一次，每次吹风20分钟，24小时后以破伤风梭菌侵染，再24小时，收集创口渗出液，在普通琼脂平板上培养24～48小时后，可形成直径1mm以上不规则的菌落，中心紧密，周边疏松，似羽毛状菌落，易在培养基表面迁徙扩散。在血液琼脂平板上有明显溶血环。观察：创口处肌肉不生，创口不合，身体寒热更作，身体反强，口噤不开，咀嚼无力、局部肌肉发紧、扯痛、反射亢进。破伤风模型成。

取破伤风模型大鼠60只，随机分为三组，每组20只。

A组使用本发明。

杀菌组为：五味子、秦皮、青黛、儿茶、桑叶、黄连、竹茹、血竭、乌梅各80g；将杀菌组各组分粉碎后混合，获得混合物，浸泡24小时后，将混合物加入到6~8倍量的水中进行煎煮，每次煎煮2~4小时，煎煮3次，每次煎煮完后过滤，将滤液混合，进行减压浓缩获得浸膏，将浸膏加入到相对于混合物质量2~3倍量的醇浓度为90%~95%的乙醇溶液中，搅拌完全溶解，随后在4℃温度以下静置过夜，随后过滤，将滤液进行减压浓缩除去乙醇，获得的膏体粉碎为粉末，经紫外线照射消毒10秒，即得本发明的杀菌剂。单独使用杀菌组，兑水搅拌均匀，质量比为1：8。

组为：桔梗、薏苡仁、鱼腥草各60g，黄连、白鲜皮、白蔹、土牛膝、八角枫、徐长卿、侧柏叶、白茅根各50g，血余炭、花生衣、川芎、延胡索、乳香、没药、儿茶、血竭各40g，甘草30g将组各组分粉碎后混合，获得混合物，浸泡24小时后，将混合物加入到6~8倍量的水中进行煎煮，每次煎煮2~4小时，煎煮3次，每次煎煮完后过滤，将滤液混合，进行减压浓缩获得浸膏，将浸膏加入到相对于混合物质量2~3倍量的醇浓度为90%~95%的乙醇溶液中，搅拌完全溶解，随后在4℃温度以下静置过夜，随后过滤，将滤液进行减压浓缩除去乙醇，获得的膏体粉碎为粉末，经紫外线照射消毒10秒，即得本发明的组，组使用在杀菌组之后，使用组兑水搅拌均匀，质量比为1：4。

使用方法：外用，兑水冲洗，先用杀菌组冲洗，再用组冲洗。

B组为背景技术2014106374963的组方的效果，水煎剂，内服。

C组为背景技术2015104665494的组方的效果，水煎剂，内服。

综上，本发明对创口可有效处理，抑制破伤风梭菌，避免感染，避免创口恶化，加快愈合速度。另外，本发明为外用，对人体副作用小。

例子1

钱某，足部被扎，伤口深，创口处理后，但未注射破伤风抗毒素，此后一周，颈项强直、面部抽搐、张口困难，有化脓，镜检出破伤风梭菌，创口不愈合，使用本发明：

杀菌组为：五味子、秦皮、青黛、儿茶、桑叶、黄连、竹茹、血竭、乌梅各80g；将杀菌组各组分粉碎后混合，获得混合物，浸泡24小时后，将混合物加入到6~8倍量的水中进行煎煮，每次煎煮2~4小时，煎煮3次，每次煎煮完后过滤，将滤液混合，进行减压浓缩获得浸膏，将浸膏加入到相对于混合物质量2~3倍量的醇浓度为90%~95%的乙醇溶液中，搅拌完全溶解，随后在4℃温度以下静置过夜，随后过滤，将滤液进行减压浓缩除去乙醇，获得的膏体粉碎为粉末，经紫外线照射消毒10秒，即得本发明的杀菌剂。单独使用杀菌组，兑水搅拌均匀，质量比为1：8。

组为：桔梗、薏苡仁、鱼腥草各60g，黄连、白鲜皮、白蔹、土牛膝、八角枫、徐长卿、侧柏叶、白茅根各50g，血余炭、花生衣、川芎、延胡索、乳香、没药、儿茶、血竭各40g，甘草30g将组各组分粉碎后混合，获得混合物，浸泡24小时后，将混合物加入到6~8倍量的水中进行煎煮，每次煎煮2~4小时，煎煮3次，每次煎煮完后过滤，将滤液混合，进行减压浓缩获得浸膏，将浸膏加入到相对于混合物质量2~3倍量的醇浓度为90%~95%的乙醇溶液中，搅拌完全溶解，随后在4℃温度以下静置过夜，随后过滤，将滤液进行减压浓缩除去乙醇，获得的膏体粉碎为粉末，经紫外线照射消毒10秒，即得本发明的组，组使用在杀菌组之后，使用组兑水搅拌均匀，质量比为1：4。

使用方法：外用，兑水冲洗，先用杀菌组冲洗，再用组冲洗。

效果：3天消肿，5天无脓，8天结痂，15天脱痂。

例子2

郭某，胳膊刮伤，创口长，缝合后未注射破伤风抗毒素，此后一周，颈项强直、面部抽搐、张口困难，有化脓，镜检出破伤风梭菌，创口不愈合，使用本发明：

杀菌组为：五味子、秦皮、青黛、儿茶、桑叶、黄连、竹茹、血竭、乌梅各70g；将杀菌组各组分粉碎后混合，获得混合物，浸泡24小时后，将混合物加入到6~8倍量的水中进行煎煮，每次煎煮2~4小时，煎煮3次，每次煎煮完后过滤，将滤液混合，进行减压浓缩获得浸膏，将浸膏加入到相对于混合物质量2~3倍量的醇浓度为90%~95%的乙醇溶液中，搅拌完全溶解，随后在4℃温度以下静置过夜，随后过滤，将滤液进行减压浓缩除去乙醇，获得的膏体粉碎为粉末，经紫外线照射消毒10秒，即得本发明的杀菌剂。单独使用杀菌组，兑水搅拌均匀，质量比为1：8。

组为：桔梗、薏苡仁、鱼腥草各50g，黄连、白鲜皮、白蔹、土牛膝、八角枫、徐长卿、侧柏叶、白茅根各40g，血余炭、花生衣、川芎、延胡索、乳香、没药、儿茶、血竭各30g，甘草20g将组各组分粉碎后混合，获得混合物，浸泡24小时后，将混合物加入到6~8倍量的水中进行煎煮，每次煎煮2~4小时，煎煮3次，每次煎煮完后过滤，将滤液混合，进行减压浓缩获得浸膏，将浸膏加入到相对于混合物质量2~3倍量的醇浓度为90%~95%的乙醇溶液中，搅拌完全溶解，随后在4℃温度以下静置过夜，随后过滤，将滤液进行减压浓缩除去乙醇，获得的膏体粉碎为粉末，经紫外线照射消毒10秒，即得本发明的组，组使用在杀菌组之后，使用组兑水搅拌均匀，质量比为1：4。

使用方法：外用，兑水冲洗，先用杀菌组冲洗，再用组冲洗。

效果：2天消肿，4天无脓，8天结痂，15天脱痂。

例子3

蔡某，大腿刀伤，创口深，缝合后未注射破伤风抗毒素，此后一周，颈项强直、面部抽搐、张口困难，有化脓，镜检出破伤风梭菌，创口不愈合，使用本发明：

杀菌组为：五味子、秦皮、青黛、儿茶、桑叶、黄连、竹茹、血竭、乌梅各75g；将杀菌组各组分粉碎后混合，获得混合物，浸泡24小时后，将混合物加入到6~8倍量的水中进行煎煮，每次煎煮2~4小时，煎煮3次，每次煎煮完后过滤，将滤液混合，进行减压浓缩获得浸膏，将浸膏加入到相对于混合物质量2~3倍量的醇浓度为90%~95%的乙醇溶液中，搅拌完全溶解，随后在4℃温度以下静置过夜，随后过滤，将滤液进行减压浓缩除去乙醇，获得的膏体粉碎为粉末，经紫外线照射消毒10秒，即得本发明的杀菌剂。单独使用杀菌组，兑水搅拌均匀，质量比为1：8。

组为：桔梗、薏苡仁、鱼腥草各55g，黄连、白鲜皮、白蔹、土牛膝、八角枫、徐长卿、侧柏叶、白茅根各45g，血余炭、花生衣、川芎、延胡索、乳香、没药、儿茶、血竭各35g，甘草25g将组各组分粉碎后混合，获得混合物，浸泡24小时后，将混合物加入到6~8倍量的水中进行煎煮，每次煎煮2~4小时，煎煮3次，每次煎煮完后过滤，将滤液混合，进行减压浓缩获得浸膏，将浸膏加入到相对于混合物质量2~3倍量的醇浓度为90%~95%的乙醇溶液中，搅拌完全溶解，随后在4℃温度以下静置过夜，随后过滤，将滤液进行减压浓缩除去乙醇，获得的膏体粉碎为粉末，经紫外线照射消毒10秒，即得本发明的组，组使用在杀菌组之后，使用组兑水搅拌均匀，质量比为1：4。

使用方法：外用，兑水冲洗，先用杀菌组冲洗，再用组冲洗。

效果：3天消肿，6天无脓，8天结痂，16天脱痂。

效果比较：

在4所医院筛选180例患者，试验之前1周，对该人进行连续观察，记录症状及变化，随机分为3组，每组60人。

第一组使用本发明例子1的组方，按其使用方法操作。

第二组为背景技术2014106374963的组方的效果，水煎剂，内服。

第三组为背景技术2015104665494的组方的效果，水煎剂，内服。

疗效情况判定标准:治愈:使用本品后，各项指标回复正常；有效：服用和使用本品后，不适症状有所改善；无效：使用本品后，不适症状无变化。结果如表1所示。

表1：

组别 病例数 有效人数 治愈人数 无效人数 复发人数 治愈率 总有效率

第一组 60 52 49 8 3 81.6% 86.6%

第二组 60 36 32 24 4 53.3 60%

第三组 60 32 30 28 2 50% 53.3%

本发明配比简单，使用方便，针对破伤风效果好，抑制破伤风梭菌效果好。本发明以杀菌组抑制厌氧菌，冲洗的过程中，抑制、杀灭破伤风梭菌。

以组对杀菌操作后的创口进行冲洗给药，以排脓的桔梗、薏苡仁、鱼腥草为君药；组以退热的黄连、白鲜皮，解毒的白蔹、土牛膝，消肿定痛的八角枫、徐长卿，凉血止血的侧柏叶、白茅根，凉血止血的血余炭、花生衣，行气止血止痛的川芎，延胡索，生肌止痛的乳香、没药、儿茶、血竭为佐药，以甘草为使药。