支气管炎的复方制剂及其制备方法、质量控制方法

支气管炎的复方制剂及其制备方法、质量控制方法

技术领域

本发明涉及一种复方制剂，特别是涉及一种支气管炎的复方颗粒剂 及其制备方法、质量控制方法。

背景技术

支气管炎属于中医学“咳嗽”，“哮喘”病范畴，为临床常见病、多发病。 目前市场上销售的安嗽糖浆为中药与西药组成的复方制剂，该制剂以浙贝 母、百部，桔梗、前胡，姜半夏，陈皮、薄荷、甘草等中药润肺止咳，配合 以西药氯化铵化痰，止咳，中西药物有机组合，共呈润肺化痰、 止咳平喘之剂，对于痰热阻肺，喘息气短，咳嗽痰粘，口渴咽干等表现的支 气管炎，有较好疗效。但由于目前市场只有糖浆一种剂型，剂型单一，不能 满足不同患者的需要，因此开发一种新的剂型已显得迫为必要，而且原糖浆 的质量标准只对进行鉴别，只检测药品中氯化铵的含量，而对药 品中的其他中药成分如陈皮、前胡、甘草等没有建立质量控制标准，因此需 要进一步完善和提高。

发明内容

本发明目的在于提供一种支气管炎的复方颗粒剂；本发明目的还在 于提供一种支气管炎的复方颗粒剂的制备方法；本发明目的还在于提供 一种支气管炎的复方颗粒剂的质量控制方法。

本发明目的是通过如下技术方案实现的。

本发明复方颗粒剂是由如下重量体积比(按g/ml的比例)的原料药制 备而成：

浙贝母流浸膏20-25体积份、甘草流浸膏20-25体积份、百部20-25重 量份、桔梗流浸膏15-20体积份、前胡20-25重量份、姜半夏20-25重量份、 陈皮10-15重量份、氯化铵20-25重量份、0.3-0.4重量份、薄荷 脑0.1-0.2重量份；其中浙贝母流浸膏标准收载于《中国药典》1977年版一 部；甘草流浸膏收载于《中国药典》2000年版一部附录流浸膏剂通则项下； 桔梗流浸膏的制法收载于《药物制剂注解》。

上述原料药优先配比为：

浙贝母流浸膏25体积份、甘草流浸膏20体积份、百部25重量份、桔 梗流浸膏18体积份、前胡22重量份、姜半夏22重量份、陈皮12重量份、 氯化铵20重量份、0.365重量份、薄荷脑0.15重量份。

本发明复方颗粒剂是由如下方法制备的：

取上述十味本发明原料药，前胡加水于85～90℃温浸2-3次，每次2-3 小时，滤过，滤液合并，浓缩至适量，放冷，加乙醇使含醇量约达25％，备 用；百部、陈皮分别粉碎成粗粉，中国药典2000年版一部附录1 O照流浸 膏剂与浸膏剂项下的渗漉法，百部用55％乙醇作溶剂、陈皮用80％乙醇作 溶剂，分别进行渗漉，收集百部漉液，陈皮漉液，备用；半夏粉碎成粗粉， 用50％乙醇于70～80℃温浸2-3次，每次2-3小时，合并浸出液，备用；将 以上四种备用液合并，减压回收乙醇至无醇味，与浙贝母、甘草、桔梗三种 流浸膏混匀，静置，滤过，浓缩至22℃温度下相对密度为1.29～1.35的清膏， 加入，取上述混匀的清膏，加入氯化铵，适量糊精及蔗糖，混匀； 加40％乙醇适量，制成颗粒，干燥，喷加薄荷脑的90％乙醇溶液，混匀， 分装成袋，每袋5g，即得本发明复方颗粒剂。口服，一次5-7.5g，一日3次。

本发明复方颗粒剂的质量控制方法包括如下鉴别和/或含量测定方法中 地一种或几种。

鉴别：

A.取本发明复方颗粒剂5g，加甲醇30ml，超声处理15分钟，滤过， 滤液蒸干，残渣加甲醇3ml使溶解，滤过，滤液作为供试品溶液；另取盐酸 麻黄碱对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄 层谱法(中国药典2000年一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各4μl， 分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以比例为15～ 25∶4～6∶0.5的氯仿-甲醇-浓氨试液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以茚三 酮试液，在105℃加热至斑点显清晰；供试品谱中，在与对照品谱相 应的位置上，显相同颜的斑点。

B.取本发明复方颗粒剂20g，加甲醇50ml，超声处理15分钟，滤过， 滤液蒸干，残渣加水20ml使溶解，用水饱和的正丁醇提取2次，每次30ml， 合并正丁醇提取液，加水15ml洗涤，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶 解，加中性氧化铝1g拌匀，蒸干，装在中性氧化铝小柱(100～120目，3g， 内径1cm)上，以比例为1～2∶1～2的醋酸乙酯-甲醇30ml洗脱，收集洗脱液 蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取陈皮对照药材0.3g， 加甲醇30ml，超声处理15分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解， 作为对照药材溶液；照薄层谱法(中国药典2000年一部附录VIB)试验， 吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶 G薄层板上，以比例为1～3∶2～4的正己烷-醋酸乙酯为展开剂，展开，取 出，晾干，置波长365nm紫外光灯下检视；供试品谱中，在与对照药材 谱相应的位置上，显相同颜的荧光主斑点。

C.取前胡对照药材0.8g，加水煎煮30分钟，滤过，滤液浓缩至约20ml， 放冷，加醋酸乙酯30ml振摇提取，提取液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解， 作为对照药材溶液；照薄层谱法(中国药典2000年一部附录VIB)试验，吸 取鉴别B项下的供试品溶液与对照药材溶液各5μl，分别点于同一以羧甲 基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以比例为1～2∶1～2正己烷-醋酸 乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1％氢氧化钠乙醇溶液，置波长365nm 紫外光灯下检视；供试品谱中，在与对照药材谱相应的位置上，显相同 颜的荧光主斑点。

D.取鉴别B项下洗脱后的小柱，加40％甲醇30ml洗脱，收集洗脱液 蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取甘草对照药材0.3g， 加甲醇30ml，同法制成对照药材溶液；照薄层谱法(中国药典2000年一部 附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各2μl，分别点于同一用0.5％氢氧化钠 溶液制备的硅胶G薄层板上，以比例为10～20∶1∶1∶2的醋酸乙酯-甲酸-冰醋 酸-水为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，105℃加热至 斑点显清晰；供试品谱中，在与对照药材谱相应的位置上，显相同颜 的斑点。

含量测定：

E.氯化铵

取装量差异项下的本发明复方颗粒剂，研匀，取2.5g，称定，置500ml 凯氏烧瓶中，加水250ml，振摇使溶解，加玻璃珠数粒，加40％氢氧化钠溶 液5ml，立即用氮气球将凯氏烧瓶与冷凝管连接，冷凝管的尖端浸入4％硼 酸溶液50ml的液面下(溶液内加0.1％甲基红-0.2％溴甲酚绿混合指示液10 滴)，加热蒸馏，至接收液的总体积约为200ml时，将冷凝管尖端提出液面， 使蒸气冲洗1分钟，用水淋洗尖端后停止蒸馏；馏出液用硫酸滴定液 (0.05mol/L)滴定至溶液由蓝绿变为灰紫，并将滴定的结果用空白试验校 正，即得；每1ml的硫酸滴定液(0.05mol/L)相当于5.349mg的氯化铵NH4Cl；

本发明复方颗粒剂每袋含氯化铵(NH4Cl)应为170～230mg。

F.

照高效液相谱法(中国药典2000年一部附录I II)测定；

谱条件与系统适用性试验，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以比 例为5～15∶95～85的用磷酸调节pH值为3.0的甲醇-0.05mol/L磷酸二氢钾 溶液为流动相；检测波长为209nm；理论板数按盐酸小檗碱峰计算应不低于 2800；

称取适量，加0.1％盐酸甲醇溶液制成每1ml含30μg的溶 液，即得对照品溶液；取装量差异项下的本发明复方制剂，研匀，取1g，称 定，置具塞锥形瓶中，加入0.1％盐酸甲醇溶液25ml，称定重量，超声处理 30分钟，放冷，再称定重量，用0.1％盐酸甲醇溶液补足减失的重量，摇匀， 用微孔滤膜(0.45μm)滤过，取续滤液，即得供试品溶液；分别吸取对照品 溶液与供试品溶液各10μl，注入液相谱仪，测定，即得；本发明复方颗 粒剂每袋含(C10H15NO·HCl)应为3.10～4.20mg。

本发明复方颗粒剂具有润肺化痰，止咳平喘的功效，用于痰热阻肺，喘 息气短，咳嗽痰粘，口喝咽干，支气管炎属上述证候者；口服，一次5～7.5g， 一日3次。

本发明复方颗粒剂的质量控制标准在原“安嗽糖浆”质量标准的基础上， 增加了陈皮、前胡、甘草的薄层谱鉴别；另外对的鉴别用原展 开剂展开后，斑点Rf值偏高，采用本发明展开剂氯仿-甲醇-浓 氨试液后斑点Rf值适中。

此外，本发明还增加的含量测定方法，本法采用高效液相 谱法，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-0.05mol/L磷酸二氢钾溶液 (用磷酸调节pH值为3.0)(10∶90)为流动相；检测波长为209nm。线性范围 0.09664～0.5134μg，r＝1.000，平均回收率99.59％，RSD％＝0.72。

本发明颗粒剂增加薄层谱鉴别和的含量测定后，在室温条 件下，进行了稳定性试验，结果所检查的内容(包括性状、鉴别、检查、微 生物限度检查、含量测定)均无明显改变，表明本发明颗粒剂稳定性良好。

下述实验例和实施例用于进一步说明但不限于本发明。

实验例1.本发明颗粒(安嗽颗粒)支气管炎30例疗效观察 病例全部来自门诊。

一、诊断标准及观察方法

诊断标准均参照《中药新药慢性支气管炎的临床指导原则》。

给药方法：口服安嗽颗粒，一次1袋，一日3次；20天为一疗程。

二、一般资料

1、性别：男19例，女11例。

2、年龄：15～30岁10例，31～50岁11例，51～65岁9例。最小年龄 16岁，最大年龄61岁，平均年龄44.1岁。

3、不同证型单纯型12例，喘息型18例。

4、病程：≤7天8例，＞7～15天12例，＞15天10例。

5、病情：轻度9例，中度12例，重度9例。

6、症状及体征，见表1。

           表1  临床症状及体征分布

症状  体征   例数   无   轻   中   重 咳嗽 咯痰 喘息 哮鸣音   30   30   30   30   0   0   9   10   10   9   9   6   11   12   7   8   9   9   5   6

7、舌象：苔薄黄18例，苔黄腻12例；滑脉21例，滑数9例。

8、白细胞、胸透、肺部体征，见表2。

      表2  白细胞、胸透、肺部体征情况

  项目   例数         组   正常   异常   白细胞   胸透   肺部体征   30   30   30   9   10   9   21   20   21

三、疗效判定标准：

1、临床症状疗效评定

临床治愈：咳嗽、咯痰、喘息等消失。

显效：咳嗽、咯痰、喘息等明显好转(+++→+)肺部哮鸣音明显减轻。

有效：咳嗽、咯痰有所好转(+++→++或++→+)肺部哮鸣音明显减轻。

无效：各症均无改善或加重。

2、综合疗效判定标准：

根据各项观察指标的评分标准，先计算出前后的积分值，然后算出 疗效指数加以确定疗效。

临床治愈：临床主要症状，体征消失，异常理化指标恢复正常，疗效指数≥ 90％。

显效：主要症状，体征明显改善，异常理化指标接近正常，疗效指数≥ 70％＜90％。

有效：主要症状、体征减轻，异常理化指标有所改善，疗产指数≥30％＜70％。

四、结果：

1、总疗效：临床治愈9例(30％)，显效12例(40％)，有效8例(26.67 ％)，无效1例(3.33％)。

2、症状、体征与疗效，见表3。

                  表3  临床症状及体征疗效

  症状、体征   例数   临床治愈   显效   有效   无效   咳嗽   咯痰   喘息   哮鸣音   30   30   30   30   11   10   12   18   10   11   10   10   8   9   7   1   1   0   1   1

3、病情与疗效，见表4。

                        表4  病情疗效

  病情   例数   临床治愈   显效   有效   无效   轻度   中度   重度   9   12   9   7   7   2   1   2   6   1   2   1   0   1   0

4、病程与疗效，见表5。

                        表5  病程疗效

  病程(天)   例数   临床治愈   显效   有效   无效   ≤7   ～15   ＞15   8   12   10   6   2   1   1   4   7   1   6   1   0   0   1

5、不同证型的疗效，见表6。

                         表6  不同证型的疗效

  证型   例数   临床治愈   显效   有效   无效   单纯型   喘息型   12   18   3   6   4   8   4   4   1   0

6、白细胞、胸透、肺部体征变化情况，见表7。

            表7  白细胞、胸透、肺部体征变化

 项目   例数   转常   改善   改善率％  白细胞(总+分)  胸透  肺部体征   21   20   21   14   15   15   6   4   5   92.24   95.00   95.24

7、舌、脉象变化情况，见表8。

                     表8  舌脉象变化

  舌脉象   例数   转常   改善   改善率％   苔薄黄   苔黄腻   脉滑   脉骨数   18   12   21   9   7   3   3   4   5   3   13   1   66.67   50.00   76.19   55.56

实验例2：本发明颗粒剂的薄层鉴别方法

仪器与试药：KQ-100型超声波清洗器；101-1-BS电热恒温鼓风干燥箱； 对照品(0090-9801供含量测定用中国药品生物制品检定所)；薄层 板；手铺板(厚0.3mm)；薄层层析硅胶(批号：010503，青岛海洋化工有限公 司制造)甲醇等：均为分析纯。

1、供试品溶液的制备：取本品5g，加甲醇30ml，超声处理15分钟， 滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇3ml使溶解，滤过，滤液作为供试品溶液。

2、对照品溶液的制备：取对照品，加甲醉制成每1ml含1mg 的溶液，作为对照品溶液。

3、阴性对照溶液的制备：按技术方案所述处方的比例及制法，制成缺 的阴性对照样品。取5g，按供试品溶液的制备方法制成阴性对照 溶液。

4、薄层层析：照薄层谱法(中国药典2000年一部附录VIB)试验，吸 取上述三种溶液各4μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G 薄层板上，以氯仿-甲醇-浓氨试液(20∶5∶0.5)为展开剂，室温展开，展距约8cm， 取出，晾干，喷以茚三酮试液，在105℃加热至斑点显清晰。供试品谱 中，在与对照品谱相应的位置上，显相同颜的斑点。阴性对照谱在相 应位置上无干扰。

由于为原料药，所以按技术方案所述方法直接加甲醇即可溶 解，简化原质量标准的提取方法。另外原展开剂展开后，斑点 Rf值偏高，现更改展开剂为氯仿-甲醇-浓氨试液后斑点Rf值适中。

实验例3：本发明颗粒剂陈皮的薄层鉴别方法

仪器与试药：KQ-100型超声波清洗器；陈皮对照药材(0969-9803中国 药品生物制品检定所)；陈皮(投料用原药材)；层析用中性氧化铝(批号： 010412，上海五四化学试剂有限公司)；薄层板：手铺板(厚0.3mm)；薄层层 析硅胶(批号：010503，青岛海洋化工有限公司制造)甲醇等：均为分析纯。

1、供试品溶液的制备；取本品20g，加甲醇50ml，超声处理15分钟， 滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml使溶解，用水饱和的正丁醇提取2次，每 次30ml，合并正丁醇提取液，加水15ml洗涤，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇 1ml使溶解，加中性氧化铝1g拌匀，蒸干，装在中性氧化铝小柱(100～120 目，3g，内径1cm)上，以醋酸乙酯-甲醇(1∶1)30ml洗脱，收集洗脱液蒸干， 残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。

2、对照药材溶液的制备：取陈皮对照药材0.3g，加甲醇30ml，超声处 理15分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为对照药材溶液。

3、阴性对照溶液的制备：按技术方案所述处方的比例及制法，制成缺 陈皮的阴性对照样品。取20g，按供试品溶液的制备方法制成阴性对照溶液。

4、薄层层析：照薄层谱法(中国约典2000年一部附录VIU)试验，吸 取上述三种溶液各5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G 薄层板上，以正己烷-醋酸乙酯(2∶3)为展开剂，室温展开，展距约8cm，取出， 晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品谱中，在与对照药材谱相应 的位置上，显相同颜的荧光主斑点。阴性对照药材谱在与对照药材谱 相应的4个主斑点位置上，Rf值靠上的两个有干扰，靠下的两个无干扰， 可作为本品陈皮的鉴别。

实验例4：本发明颗粒剂前胡的薄层鉴别方法

仪器与试药：前胡对照药材(951-9201，中国药品生物制品检定所)；前 胡(投料用原药材)；其余同实验例3。

1、供试品溶液的制备：同实验例3。

2、对照药材溶液的制备：取前胡对照药材0.8g，加水煎煮30分钟，滤 过，滤液浓缩至约20ml，放冷，加醋酸乙酯30ml。振摇提取，提取液蒸干， 残渣加甲醇1ml使溶解，作为对照药材溶液。

3、阴性对照溶液的制备：按技术方案所述处方的比例及制法，制成缺 前胡的阴性对照样品。取20g，按供试品溶液的制备方法制成阴性对照溶液。

4、薄层层析：照薄层谱法(中国药典2000年一部附录VIB)试验，吸 取上述三种溶液各5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G 薄层板上，以正己烷-醋酸乙酯(1∶1)为展开剂，室温展开，展距约8cm， 取出，晾干，喷以1％氢氧化钠乙醇溶液，置紫外光灯(365nm)下检视。供试 品谱中，在与对照药材谱相应的位置上，显相同颜的荧光主斑点。阴 性对照谱无干扰。

实验例5：本发明颗粒剂甘草的薄层鉴别方法

仪器与试药：101-1-BS电热恒温鼓风干燥箱；甘草对照药材(904-8801 中国药品生物制品检定所)；甘草(投料用原药材)；其余同实验例3。

1、供试品溶液的制备：取技术方案所述鉴别B项下洗脱后的小柱，加 40％甲醇30ml洗脱，收集洗脱液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试 品溶液。

2、对照药材溶液的制备：取甘草对照药材0.3g，加甲醇30ml，同供试 品方法制成对照药材溶液。

3、阴性对照溶液的制备：按技术方案所述处方的比例及制法，制成缺 甘草的阴性对照样品。取20g，按供试品溶液的制备方法制成阴性对照溶液。

4、薄层层析：照薄层谱法(中国药典2000年一部附录VIB)试验，吸 取上述三种溶液各2μl，分别点于同一用0.5％氢氧化钠溶液制备的硅胶G 薄层板上，以醋酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水(15∶1∶1∶2)为展开剂，室温展 开，展距约8cm，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，105℃加热至斑点 显清晰。供试品谱中，在与对照药材谱相应的位置上，显相同颜的 斑点。阴性对照谱无干扰。

实验例6：本发明颗粒剂氯化铵的含量测定方法

参照原“安嗽糖浆”含量测定方法试验结果如下：

1、试验方法：取装量差异项下的本品，研匀，分别取2.5g，精密称定， 置500ml凯氏烧瓶中，加水250ml，振摇使溶解，加玻璃珠数粒，加40％氢 氧化钠溶液5ml，立即用氮气球将凯氏烧瓶与冷凝管连接，冷凝管的尖端浸 入4％硼酸溶液50ml的液面下(溶液内加0.1％甲基红-0.2％溴甲酚绿混合指 示液10滴)，加热蒸馏，至接收液的总体积约为200ml时，将冷凝管尖端提 出液面，使蒸气冲洗1分钟，用水淋洗尖端后停止蒸馏。馏出液用硫酸滴定 液(0.05mol/L)滴定至溶液由蓝绿变为灰紫，并将滴定的结果用空白试 验校正，即得[每1ml的硫酸滴定液(0.05mol/L)相当于5.35mg的氯化铵 NH₄Cl]。

结果用空白试验校正，即得[每1ml的硫酸滴定液(0.05mol/L)相当于 5.35mg的氯化铵NH4Cl]。

2、试验结果：取本品3批(批号：20030801、20030802、20030803)，按 处方比例及制法制成的缺氯化铵阴性对照按上述方法，测定氯化铵含量，平 均192.6mg/袋，相当于标示量的96.3％，结果见表9。

                             表9

  供试品   030801   030802   030803   阴性对照   含量(mg/袋)   192.2   193.3   192.3   0.68

3、氯化铵含量测定：取投料用的氯化铵0.1g，精密称定，按上述方法 测定，含量按干燥品计算，结果见表10。

检验3批，均符合(中国药典)2000年版二部“氯化铵”项下规定(按干燥 品计算，含量不得少于99.5g)。

                      表10

  批号   批1   批2   批3   含量(％)   99.7   99.8   99.7

上述试验结果表明，按原“安嗽糖浆”取样量折算，取本品2.5g进行试 验，方法可行。由于本品为制剂，按《中国药典》2000年版一部附录颗粒剂 制剂通则要求，水分不得过5.0％、装量差异限度为±7％、再加上制备过程 中称量误差等因素，确定本品含氯化铵为处方量的85～115％，即每袋含量 为170～230mg。

实验例7：本发明颗粒剂的含量测定方法

1、仪器与试药

SP-8810高效液相谱仪；Spectra紫外检测器；Sepu 3000P谱工作站； Unicam UV530紫外可见分光光度计；KQ-100型超声波清洗器。 对照品(0090-9801供含量测定用中国药品生物制品检定所)。安嗽颗粒(批 号：20030801、20030802、20030803)。甲醇：谱纯；水为超纯水；其他 试剂：均为分析纯。

2、高效液相谱条件与系统适用性试验

C₁₈不锈钢柱(Hypersil ODS2 4.6×200mm 5μm)；流动相：甲醇- 0.05mol/L磷酸二氢钾溶液(用磷酸调节pH值为3.0)(10∶90)；流速： 1.0ml/min、1.2ml/min；检测波长：209nm柱温：室温。理论板数按盐酸麻 黄碱峰计算，应不低于2800。

3、标准曲线

精密称取对照品适量，加甲醇制成每1ml中含9.664、20.536、 30.200，41.072、51.340μg的溶液。分别吸取10μl，注入高效液相谱仪， 按上述条件测定峰面积，结果见表11。

                                       表11

  C(μg/ml)   9.664   20.536   30.200   41.072   51.340   峰面积   175728   374744   520988   716887   889397

以对照品浓度作为横坐标，测得的峰面积作为纵坐标，进行线性回归， 得线性方程为Y＝17039X+14783，r＝1.000。线性范围为0.09664～0.5134μg。

4、供试品溶液的制备

取装量差异项下的本品，研匀，取1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精 密加入0.1％盐酸甲醇溶液25ml，称定重量，超声处理30分钟，放冷，再 称定重量，用0.1％盐酸甲醇溶液补足减失的重量，摇匀，用微孔滤膜(0.45 μm)滤过，取续滤液，即得。

①提取样品溶剂；选用甲醇、0.1％盐酸甲醇溶液进行试验，从HPLC 图谱观察，用0.1％盐酸甲醇溶液提取样品，峰形较甲醇好，因 而将其作为提取样品的溶剂。

②提取方法；以0.1％盐酸甲醇溶液作为提取溶剂，选择超声处理30分 钟、60分钟；加热回流1小时进行提取，提取液按含量测定方法测定盐酸麻 黄碱，结果见表12。

                               表12

  提取方法   超声处理30分钟   超声处理60分钟   加热回流1小时   含量(mg/袋)   3.756   3.739   3.798

盐酸小檗碱易溶于甲醇，试验结果表示上述的提取方法，测定盐酸麻黄 碱含量结果基本相同，均可作为含量测定的提取方法。本发 明结合回收试验，选用较为方便的超声处理30分钟作为技术方案所述方法。

5、对照品溶液的制备

精密称取对照品适量，加0.1％盐酸甲醇溶液制成每1ml含 30μg的溶液，作为对照品溶液。

6、测定法

(1)测定波长的选择：取对照品溶液在200～360nm波长范围 内扫描，结果在209nm波长处有最大吸收，故选择测定波长为λ＝209nm。

(2)流动相的选择：选择甲醇-水(1∶1)、乙腈-0.01％磷酸溶液(5∶95)、 甲醇-0.05mol/L磷酸二氢钾溶液(8∶92)及甲醇-0.05mol/L。磷酸二氢钾 溶液(用磷酸调节pH值为3.0)(10∶90)等进行试验，结果显示最后一种流动 相分离效果、峰形最好而作为技术方案所述方法的流动相。

测定方法如技术方案，分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl， 注入液相谱仪，按上述条件进行测定。

7、空白试验

取按处方比例及制法制备的缺阴性样品，按供试品溶液的制 备及测定方法进行处理和测定。结果未见空白试验有干扰。

8、精密度试验

①对照品；精密吸取对照品溶液(30μg/ml)10μl，按上述 条件重复进样5次。测定结果见表13。

                                         表13

  序号   1   2   3   4   5   平均值   RSD(％)   峰面积   520960   522046   525358   521795   520988   522229   0.34

②样品：精密吸取同一供试品(批号：20030801)溶液10μl，按上述条件 重复进样5次。结果见表14。

                                        表14

  序号   1   2   3   4   5   平均值   RSD(％)   峰面积   513596   502937   499503   508298   513062   507479   1.21

9、重复性试验

取同一供试品(批号：20030802)研匀，精密称取5份，按含量测定方法 进行处理和测定，结果见表15。

                                                 表15

  序号   1   2   3   4   5   平均值   RSD(％)   含量(mg/袋)   3.611   3.584   3.400   3.614   3.437   3.529   2.92

10、稳定性试验

精密吸取同一供试品溶液(批号：20030801)和对照品溶液(30.2μg/ml) 各10μl，在开机1小时待稳定后，每隔2小时注入高效液相谱仪，测定 结果见表16。

                                         表16

  测定时间(h)   1   3   5   7   9   平均值   RSD(％)   对照品峰面积   531961   530265   515572   513751   534252   525160   1.83   样品峰面积   523674   539642   541145   520989   537944   532679   1.79

11、加样回收试验

取同一供试品(批号：20030801，含量为0.7278mg/g)5份各约1g，精 密称定，分别精密加入盐酸小檗碱对照品溶液(0.630mg/ml)1ml，水浴加热 挥去甲醇，分别按含量测定方法进样测定，计算回收率。结果见表17。

                                      表17

  序号   供试品   (g)   盐酸小檗碱   含量(mg)   加对照品   量(mg)   测得量   (mg)   回收率   (％)   平均回收   率(％)   RSD   (％)   1   2   3   4   5   0.9463   0.9502   0.9509   0.9506   0.9519   0.6887   0.6916   0.6921   0.6918   0.6928   0.630   0.630   0.630   0.630   0.630   1.2994   1.3132   1.3192   1.3186   1.3293   98.54   99.36   99.78   99.76   100.49   99.59   0.72

12、含量测定：取本品3批，按拟定的含量测定方法测定含 量，结果见表18。

                            表18

  批号   20030801   20030802   20030803   含量(mg/袋)   3.71   3.74   3.71

13、原料含量测定：取投料用的，按拟定的含量 测定方法进行测定，结果见表19。

                   表19

  批号   批1   批2   批3   含量(％)   99.6   99.9   99.7

检验3批，均符合《中国药典》2000年版二部“”项下规定 (按干燥品计算，含量不得少于99.0％)。

由于本品为制剂，按《中国药典》2000年版一部附录颗粒剂制剂通则要 求，水分不得过5.0％、装量差异限度为±7％、再加上制备过程中称量误差 等因素，确定本品含为处方量的85～115％，即每袋含量为3.10～ 4.20mg。

本发明下述实施例均能达到上述实验例的效果。

实施例1.本发明颗粒剂

浙贝母流浸膏25ml、甘草流浸膏20ml、百部25g、桔梗流浸膏18ml、 前胡22g、姜半夏22g、陈皮12g、氯化铵20g、0.365g、薄荷脑 0.15g；

以上十味，前胡加水于85～90℃温浸三次，第一、二次各3小时，第三 次2小时，滤过，滤液合并，浓缩至适量，放冷，加乙醇使含醇量约达25 ％，备用；百部、陈皮分别粉碎成粗粉，照流浸膏剂与浸膏剂项下的渗漉法 (中国药典2000年一部附录1 O)，百部用55％乙醇作溶剂、陈皮用80％乙 醇作溶剂，分别进行渗漉，收集百部漉液25ml，陈皮漉液5ml，备用。姜半 夏粉碎成粗粉，用50％乙醇于70～80℃温浸三次，每次3小时，合并浸出 液，备用。将以上四种备用液合并，减压回收乙醇至无醇味，与浙贝母、甘 草、桔梗三种流浸膏混匀，静置，滤过，浓缩至相对密度为1.29～1.35(22 ℃)的清膏，加入，取上述混匀的清膏1份，加氯化铵20g及糊 精34g、蔗糖425g，混匀；加40％乙醇适量，制成颗粒，干燥，制成500g， 喷加薄荷脑的90％乙醇溶液，混匀，分装100袋，每袋5g，即得。口服， 一次5-7.5g，一日3次。

实施例2.本发明颗粒剂的质量控制方法

A.取本发明复方颗粒剂5g，加甲醇30ml，超声处理15分钟，滤过， 滤液蒸干，残渣加甲醇3ml使溶解，滤过，滤液作为供试品溶液；另取盐酸 麻黄碱对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄 层谱法(中国药典2000年一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各4μl， 分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇- 浓氨试液(20∶5∶0.5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以茚三酮试液，在105℃ 加热至斑点显清晰；供试品谱中，在与对照品谱相应的位置上，显相 同颜的斑点。

B.取本发明复方颗粒剂20g，加甲醇50ml，超声处理15分钟，滤过， 滤液蒸干，残渣加水20ml使溶解，用水饱和的正丁醇提取2次，每次30ml， 合并正丁醇提取液，加水15ml洗涤，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶 解，加中性氧化铝1g拌匀，蒸干，装在中性氧化铝小柱(100～120目，3g， 内径1cm)上，以醋酸乙酯-甲醇(1∶1)30ml洗脱，收集洗脱液蒸干，残渣加甲 醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取陈皮对照药材0.3g，加甲醇30ml， 超声处理15分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为对照药 材溶液；照薄层谱法(中国药典2000年一部附录VIB)试验，吸取上述两 种溶液各5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板 上，以正己烷-醋酸乙酯(2∶3)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm) 下检视；供试品谱中，在与对照药材谱相应的位置上，显相同颜的荧 光主斑点。

C.取前胡对照药材0.8g，加水煎煮30分钟，滤过，滤液浓缩至约20ml， 放冷，加醋酸乙酯30ml振摇提取，提取液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解， 作为对照药材溶液；照薄层谱法(中国药典2000年一部附录VIB)试验，吸 取鉴别B项下的供试品溶液与对照药材溶液各5μl，分别点于同一以羧甲 基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以正己烷-醋酸乙酯(1∶1)为展开剂， 展开，取出，晾干，喷以1％氢氧化钠乙醇溶液，置紫外光灯(365nm)下检视； 供试品谱中，在与对照药材谱相应的位置上，显相同颜的荧光主斑点。

D.取鉴别B项下洗脱后的小柱，加40％甲醇30ml洗脱，收集洗脱液 蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取甘草对照药材0.3g， 加甲醇30ml，同法制成对照药材溶液；照薄层谱法(中国药典2000年一部 附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各2μl，分别点于同一用0.5％氢氧化钠 溶液制备的硅胶G薄层板上，以醋酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水(15∶1∶1∶2)为展开 剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，105℃加热至斑点显清 晰；供试品谱中，在与对照药材谱相应的位置上，显相同颜的斑点。

实施例3.本发明颗粒剂的质量控制方法

B.取本发明复方颗粒剂20g，加甲醇50ml，超声处理15分钟，滤过， 滤液蒸干，残渣加水20ml使溶解，用水饱和的正丁醇提取2次，每次30ml， 合并正丁醇提取液，加水15ml洗涤，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶 解，加中性氧化铝1g拌匀，蒸干，装在中性氧化铝小柱(100～120目，3g， 内径1cm)上，以醋酸乙酯-甲醇(1∶1)30ml洗脱，收集洗脱液蒸干，残渣加甲 醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取陈皮对照药材0.3g，加甲醇30ml， 超声处理15分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为对照药 材溶液；照薄层谱法(中国药典2000年一部附录VIB)试验，吸取上述两 种溶液各5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板 上，以正己烷-醋酸乙酯(2∶3)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm) 下检视；供试品谱中，在与对照药材谱相应的位置上，显相同颜的荧 光主斑点。

C.取前胡对照药材0.8g，加水煎煮30分钟，滤过，滤液浓缩至约20ml， 放冷，加醋酸乙酯30ml振摇提取，提取液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解， 作为对照药材溶液；照薄层谱法(中国药典2000年一部附录VIB)试验，吸 取鉴别B项下的供试品溶液与对照药材溶液各5μl，分别点于同一以羧甲 基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以正己烷-醋酸乙酯(1∶1)为展开剂， 展开，取出，晾干，喷以1％氢氧化钠乙醇溶液，置紫外光灯(365nm)下检视； 供试品谱中，在与对照药材谱相应的位置上，显相同颜的荧光主斑点。

D.取鉴别B项下洗脱后的小柱，加40％甲醇30ml洗脱，收集洗脱液 蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取甘草对照药材0.3g， 加甲醇30ml，同法制成对照药材溶液；照薄层谱法(中国药典2000年一部 附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各2μl，分别点于同一用0.5％氢氧化钠 溶液制备的硅胶G薄层板上，以醋酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水(15∶1∶1∶2)为展开 剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，105℃加热至斑点显清 晰；供试品谱中，在与对照药材谱相应的位置上，显相同颜的斑点。

实施例4.本发明颗粒剂的质量控制方法

E.氯化铵

取装量差异项下的本发明复方颗粒剂，研匀，取2.5g，称定，置500ml 凯氏烧瓶中，加水250ml，振摇使溶解，加玻璃珠数粒，加40％氢氧化钠溶 液5ml，立即用氮气球将凯氏烧瓶与冷凝管连接，冷凝管的尖端浸入4％硼 酸溶液50ml的液面下(溶液内加0.1％甲基红-0.2％溴甲酚绿混合指示液10 滴)，加热蒸馏，至接收液的总体积约为200ml时，将冷凝管尖端提出液面， 使蒸气冲洗1分钟，用水淋洗尖端后停止蒸馏；馏出液用硫酸滴定液 (0.05mol/L)滴定至溶液由蓝绿变为灰紫，并将滴定的结果用空白试验校 正，即得；每1ml的硫酸滴定液(0.05mol/L)相当于5.349mg的氯化铵NH4Cl；

本发明复方颗粒剂每袋含氯化铵(NH4Cl)应为170～230mg。

F.

照高效液相谱法(中国药典2000年一部附录I II)测定；

谱条件与系统适用性试验，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇 -0.05mol/L磷酸二氢钾溶液(用磷酸调节pH值为3.0)(10∶90)为流动相；检测 波长为209nm；理论板数按盐酸小檗碱峰计算应不低于2800；

称取适量，加0.1％盐酸甲醇溶液制成每1ml含30μg的溶 液，即得对照品溶液；

取装量差异项下的本发明复方制剂，研匀，取1g，称定，置具塞锥形瓶 中，精密加入0.1％盐酸甲醇溶液25ml，称定重量，超声处理30分钟，放 冷，再称定重量，用0.1％盐酸甲醇溶液补足减失的重量，摇匀，用微孔滤 膜(0.45μm)滤过，取续滤液，即得供试品溶液；分别吸取对照品溶液与供 试品溶液各10μl，注入液相谱仪，测定，即得；本发明复方颗粒剂每袋 含(C10H15NO·HCl)应为3.10～4.20mg。

实施例5.本发明颗粒剂的质量控制方法

：

照高效液相谱法(中国药典2000年一部附录I II)测定；

谱条件与系统适用性试验，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇 -0.05mol/L磷酸二氢钾溶液(用磷酸调节pH值为3.0)(10∶90)为流动相；检测 波长为209nm；理论板数按盐酸小檗碱峰计算应不低于2800；

称取适量，加0.1％盐酸甲醇溶液制成每1ml含30μg的溶 液，即得对照品溶液；

取装量差异项下的本发明复方制剂，研匀，取1g，称定，置具塞锥形瓶 中，精密加入0.1％盐酸甲醇溶液25ml，称定重量，超声处理30分钟，放 冷，再称定重量，用0.1％盐酸甲醇溶液补足减失的重量，摇匀，用微孔滤 膜(0.45μm)滤过，取续滤液，即得供试品溶液；分别吸取对照品溶液与供 试品溶液各10μl，注入液相谱仪，测定，即得；本发明复方颗粒剂每袋 含(C10H15NO·HCl)应为3.10～4.20mg。

实施例6.本发明颗粒剂的质量控制方法

鉴别：

A.取本发明复方颗粒剂5g，加甲醇30ml，超声处理15分钟，滤过， 滤液蒸干，残渣加甲醇3ml使溶解，滤过，滤液作为供试品溶液；另取盐酸 麻黄碱对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄 层谱法(中国药典2000年一部附录VIF)试验，吸取上述两种溶液各4μl， 分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇- 浓氨试液(20∶5∶0.5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以茚三酮试液，在105℃ 加热至斑点显清晰；供试品谱中，在与对照品谱相应的位置上，显相 同颜的斑点。

B.取本发明复方颗粒剂20g，加甲醇50ml，超声处理15分钟，滤过， 滤液蒸干，残渣加水20ml使溶解，用水饱和的正丁醇提取2次，每次30ml， 合并正丁醇提取液，加水15ml洗涤，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶 解，加中性氧化铝1g拌匀，蒸干，装在中性氧化铝小柱(100～120目，3g， 内径1cm)上，以醋酸乙酯-甲醇(1∶1)30ml洗脱，收集洗脱液蒸干，残渣加甲 醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取陈皮对照药材0.3g，加甲醇30ml， 超声处理15分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为对照药 材溶液；照薄层谱法(中国药典2000年一部附录VIB)试验，吸取上述两 种溶液各5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板 上，以正己烷-醋酸乙酯(2∶3)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm) 下检视；供试品谱中，在与对照药材谱相应的位置上，显相同颜的荧 光主斑点。

C.取前胡对照药材0.8g，加水煎煮30分钟，滤过，滤液浓缩至约20ml， 放冷，加醋酸乙酯30ml振摇提取，提取液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解， 作为对照药材溶液；照薄层谱法(中国药典2000年一部附录VIB)试验，吸 取鉴别B项下的供试品溶液与对照药材溶液各5μl，分别点于同一以羧甲 基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以正己烷-醋酸乙酯(1∶1)为展开剂， 展开，取出，晾干，喷以1％氢氧化钠乙醇溶液，置紫外光灯(365nm)下检视； 供试品谱中，在与对照药材谱相应的位置上，显相同颜的荧光主斑点。

D.取鉴别B项下洗脱后的小柱，加40％甲醇30ml洗脱，收集洗脱液 蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取甘草对照药材0.3g， 加甲醇30ml，同法制成对照药材溶液；照薄层谱法(中国药典2000年一部 附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各2μl，分别点于同一用0.5％氢氧化钠 溶液制备的硅胶G薄层板上，以醋酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水(15∶1∶1∶2)为展开 剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，105℃加热至斑点显清 晰；供试品谱中，在与对照药材谱相应的位置上，显相同颜的斑点。

含量测定：

E.氯化铵

取装量差异项下的本发明复方颗粒剂，研匀，取2.5g，称定，置500ml 凯氏烧瓶中，加水250ml，振摇使溶解，加玻璃珠数粒，加40％氢氧化钠溶 液5ml，立即用氮气球将凯氏烧瓶与冷凝管连接，冷凝管的尖端浸入4％硼 酸溶液50ml的液面下(溶液内加0.1％甲基红-0.2％溴甲酚绿混合指示液10 滴)，加热蒸馏，至接收液的总体积约为200ml时，将冷凝管尖端提出液面， 使蒸气冲洗1分钟，用水淋洗尖端后停止蒸馏；馏出液用硫酸滴定液 (0.05mol/L)滴定至溶液由蓝绿变为灰紫，并将滴定的结果用空白试验校 正，即得；每1ml的硫酸滴定液(0.05mol/L)相当于5.349mg的氯化铵NH4Cl；

本发明复方颗粒剂每袋含氯化铵(NH4Cl)应为170～230mg。

F.

照高效液相谱法(中国药典2000年一部附录I II)测定；

谱条件与系统适用性试验，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇 -0.05mol/L磷酸二氢钾溶液(用磷酸调节pH值为3.0)(10∶90)为流动相；检测 波长为209nm；理论板数按盐酸小檗碱峰计算应不低于2800；

称取适量，加0.1％盐酸甲醇溶液制成每1ml含30μg的溶 液，即得对照品溶液；

取装量差异项下的本发明复方制剂，研匀，取1g，称定，置具塞锥形瓶 中，精密加入0.1％盐酸甲醇溶液25ml，称定重量，超声处理30分钟，放 冷，再称定重量，用0.1％盐酸甲醇溶液补足减失的重量，摇匀，用微孔滤 膜(0.45μm)滤过，取续滤液，即得供试品溶液；分别吸取对照品溶液与供 试品溶液各10μl，注入液相谱仪，测定，即得；本发明复方颗粒剂每袋 含(C10H15NO·HCl)应为3.10～4.20mg。

实施例7.本发明颗粒剂的质量控制方法

鉴别：

A.取本发明复方颗粒剂5g，加甲醇30ml，超声处理15分钟，滤过， 滤液蒸干，残渣加甲醇3ml使溶解，滤过，滤液作为供试品溶液；另取盐酸 麻黄碱对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄 层谱法(中国药典2000年一部附录VIF)试验，吸取上述两种溶液各4μl， 分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇- 浓氨试液(20∶5∶0.5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以茚三酮试液，在105℃ 加热至斑点显清晰；供试品谱中，在与对照品谱相应的位置上，显相 同颜的斑点。

B.取本发明复方颗粒剂20g，加甲醇50ml，超声处理15分钟，滤过， 滤液蒸干，残渣加水20ml使溶解，用水饱和的正丁醇提取2次，每次30ml， 合并正丁醇提取液，加水15ml洗涤，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶 解，加中性氧化铝1g拌匀，蒸干，装在中性氧化铝小柱(100～120目，3g， 内径1cm)上，以醋酸乙酯-甲醇(1∶1)30ml洗脱，收集洗脱液蒸干，残渣加甲 醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取陈皮对照药材0.3g，加甲醇30ml， 超声处理15分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为对照药 材溶液；照薄层谱法(中国药典2000年一部附录VIB)试验，吸取上述两 种溶液各5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板 上，以正己烷-醋酸乙酯(2∶3)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm) 下检视；供试品谱中，在与对照药材谱相应的位置上，显相同颜的荧 光主斑点。

C.取前胡对照药材0.8g，加水煎煮30分钟，滤过，滤液浓缩至约20ml， 放冷，加醋酸乙酯30ml振摇提取，提取液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解， 作为对照药材溶液；照薄层谱法(中国药典2000年一部附录VIB)试验，吸 取鉴别B项下的供试品溶液与对照药材溶液各5μl，分别点于同一以羧甲 基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以正己烷-醋酸乙酯(1∶1)为展开剂， 展开，取出，晾干，喷以1％氢氧化钠乙醇溶液，置紫外光灯(365nm)下检视； 供试品谱中，在与对照药材谱相应的位置上，显相同颜的荧光主斑点。

含量测定：

F.

照高效液相谱法(中国药典2000年一部附录I II)测定；

谱条件与系统适用性试验，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇 -0.05mol/L磷酸二氢钾溶液(用磷酸调节pH值为3.0)(10∶90)为流动相；检测 波长为209nm；理论板数按盐酸小檗碱峰计算应不低于2800；

称取适量，加0.1％盐酸甲醇溶液制成每1ml含30μg的溶 液，即得对照品溶液；

取装量差异项下的本发明复方制剂，研匀，取1g，称定，置具塞锥形瓶 中，精密加入0.1％盐酸甲醇溶液25ml，称定重量，超声处理30分钟，放 冷，再称定重量，用0.1％盐酸甲醇溶液补足减失的重量，摇匀，用微孔滤 膜(0.45μm)滤过，取续滤液，即得供试品溶液；分别吸取对照品溶液与供 试品溶液各10μl，注入液相谱仪，测定，即得；本发明复方颗粒剂每袋 含(C10H15NO·HCl)应为3.10～4.20mg。

实施例8.本发明颗粒剂的制备及其质量控制标准

浙贝母流浸膏25ml、甘草流浸膏20ml、百部25g、桔梗流浸膏18ml、 前胡22g、姜半夏22g、陈皮12g、氯化铵20g、0.365g、薄荷脑 0.15g；

以上十味，前胡加水于85～90℃温浸三次，第一、二次各3小时，第三 次2小时，滤过，滤液合并，浓缩至适量，放冷，加乙醇使含醇量约达25 ％，备用。百部、陈皮分别粉碎成粗粉，照流浸膏剂与浸膏剂项下的渗漉法 (中国药典2000年一部附录1 O)，百部用55％乙醇作溶剂、陈皮用80％乙 醇作溶剂，分别进行渗漉，收集百部漉液25ml，陈皮漉液5ml，备用。姜半 夏粉碎成粗粉，用50％乙醇于70～80℃温浸三次，每次3小时，合并浸出 液，备用。将以上四种备用液合并，减压回收乙醇至无醇味，与浙贝母、甘 草、桔梗三种流浸膏混匀，静置，滤过，浓缩至相对密度为1.29～1.35(22 ℃)的清膏，加入，取上述混匀的清膏1份，加糊精1份，氯化 铵20g，蔗糖适量，混匀；加40％乙醇适量，制成颗粒，干燥，制成500g， 喷加薄荷脑的90％乙醇溶液，混匀，分装100袋，即得。

按上述制备方法制备的本发明颗粒剂的质量控制标准为：

鉴别：

A.取本发明复方颗粒剂5g，加甲醇30ml，超声处理15分钟，滤过， 滤液蒸干，残渣加甲醇3ml使溶解，滤过，滤液作为供试品溶液；另取盐酸 麻黄碱对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄 层谱法(中国药典2000年一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各4μl， 分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇- 浓氨试液(20∶5∶0.5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以茚三酮试液，在105℃ 加热至斑点显清晰；供试品谱中，在与对照品谱相应的位置上，显相 同颜的斑点。

B.取本发明复方颗粒剂20g，加甲醇50ml，超声处理15分钟，滤过， 滤液蒸干，残渣加水20ml使溶解，用水饱和的正丁醇提取2次，每次30ml， 合并正丁醇提取液，加水15ml洗涤，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶 解，加中性氧化铝1g拌匀，蒸干，装在中性氧化铝小柱(100～120目，3g， 内径1cm)上，以醋酸乙酯-甲醇(1∶1)30ml洗脱，收集洗脱液蒸干，残渣加甲 醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取陈皮对照药材0.3g，加甲醇30ml， 超声处理15分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为对照药 材溶液；照薄层谱法(中国药典2000年一部附录VIB)试验，吸取上述两 种溶液各5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板 上，以正己烷-醋酸乙酯(2∶3)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm) 下检视；供试品谱中，在与对照药材谱相应的位置上，显相同颜的荧 光主斑点。

C.取前胡对照药材0.8g，加水煎煮30分钟，滤过，滤液浓缩至约20ml， 放冷，加醋酸乙酯30ml振摇提取，提取液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解， 作为对照药材溶液；照薄层谱法(中国药典2000年一部附录VIB)试验，吸 取鉴别B项下的供试品溶液与对照药材溶液各5μl，分别点于同一以羧甲 基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以正己烷-醋酸乙酯(1∶1)为展开剂， 展开，取出，晾干，喷以1％氢氧化钠乙醇溶液，置紫外光灯(365nm)下检视； 供试品谱中，在与对照药材谱相应的位置上，显相同颜的荧光主斑点。

D.取鉴别B项下洗脱后的小柱，加40％甲醇30ml洗脱，收集洗脱液 蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取甘草对照药材0.3g， 加甲醇30ml，同法制成对照药材溶液；照薄层谱法(中国药典2000年一部 附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各2μl，分别点于同一用0.5％氢氧化钠 溶液制备的硅胶G薄层板上，以醋酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水(15∶1∶1∶2)为展开 剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，105℃加热至斑点显清 晰；供试品谱中，在与对照药材谱相应的位置上，显相同颜的斑点。

含量测定：

E.氯化铵

取装量差异项下的本发明复方颗粒剂，研匀，取2.5g，称定，置500ml 凯氏烧瓶中，加水250ml，振摇使溶解，加玻璃珠数粒，加40％氢氧化钠溶 液5ml，立即用氮气球将凯氏烧瓶与冷凝管连接，冷凝管的尖端浸入4％硼 酸溶液50ml的液面下(溶液内加0.1％甲基红-0.2％溴甲酚绿混合指示液10 滴)，加热蒸馏，至接收液的总体积约为200ml时，将冷凝管尖端提出液面， 使蒸气冲洗1分钟，用水淋洗尖端后停止蒸馏；馏出液用硫酸滴定液 (0.05mol/L)滴定至溶液由蓝绿变为灰紫，并将滴定的结果用空白试验校 正，即得；每1ml的硫酸滴定液(0.05mol/L)相当于5.349mg的氯化铵NH4Cl；

本发明复方颗粒剂每袋含氯化铵(NH4Cl)应为170～230mg。

F.

照高效液相谱法(中国药典2000年一部附录I II)测定；

谱条件与系统适用性试验，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇 -0.05mol/L磷酸二氢钾溶液(用磷酸调节pH值为3.0)(10∶90)为流动相；检测 波长为209nm；理论板数按盐酸小檗碱峰计算应不低于2800；

称取适量，加0.1％盐酸甲醇溶液制成每1ml含30μg的溶 液，即得对照品溶液；

取装量差异项下的本发明复方制剂，研匀，取1g，称定，置具塞锥形瓶 中，精密加入0.1％盐酸甲醇溶液25ml，称定重量，超声处理30分钟，放 冷，再称定重量，用0.1％盐酸甲醇溶液补足减失的重量，摇匀，用微孔滤 膜(0.45μm)滤过，取续滤液，即得供试品溶液；分别吸取对照品溶液与供 试品溶液各10μl，注入液相谱仪，测定，即得；本发明复方颗粒剂每袋 含(C10H15NO·HCl)应为3.10～4.20mg。