一种难溶于水的丝素蛋白膜及其制备与应用

一种难溶于水的丝素蛋白膜及其制备与应用

（一）技术领域

本发明涉及一种丝素蛋白膜及其制备方法，特别涉及一种难溶于水的 丝素蛋白膜及其制备和应用。

（二）背景技术

蚕丝是强度最好的天然纤维之一，由70~80%的丝素蛋白和20~30% 的丝胶蛋白组成。丝素蛋白的氨基酸序列主要由“甘氨酸‑丙氨酸‑甘氨酸 ‑丙氨酸‑‑甘氨酸‑丝氨酸”(GAGAGS)的重复单元构成，其中甘氨酸、丙 氨酸和丝氨酸占总氨基酸含量的85%以上。该重复序列绝大多数位于丝 素蛋白的结晶区，并自组装成反向平行折叠链构象（anti‑parallel β‑sheet） 结构。这些结构赋予丝素蛋白具有良好力学和缓慢降解速率的特性。

丝胶蛋白在体内会引起炎症反应，在使用前需要需进行脱胶处理 （degummed）。丝素蛋白由分子量为325KD和25KD两种蛋白组成，其 降解产物为氨基酸。大量的研究表明丝素蛋白具有良好的生物相容性，其 体内炎症反应（inflammatory responses）要远低于胶原和聚乳酸等常用生 物材料。丝素蛋白纤维作为外科缝线已有悠久的历史，经编织后作为人工 韧带和组织补片已在研究领域应用。但在目前的生物材料研究领域应用更 多的是再生型丝素蛋白。即丝素蛋白经过脱胶、溶解、提纯后，再通过物 理、化学的方法，形成海绵状、膜状、凝胶状、微球状等形态。

在丝素蛋白膜的制备方面，中国发明专利“一种可溶—高弹性丝素蛋 白膜的制备方法”（CN101234212A）中，将提纯后的丝素蛋白溶液在聚 苯乙烯培养皿在恒温恒湿箱内（温度40~70℃，相对湿度60~80%）直接 干燥形成厚度为30~50um可溶性膜。中国发明专利“再生丝素蛋白膜及 其制备方法”（公开号CN 101760027A）中，将提纯后的丝素蛋白溶液在 PS皿内直接干燥成膜（未对干燥条件提出要求），再用极性溶剂（C1‑C5 醇和水混合物、水或水蒸汽）结合力学拉伸，进行溶胀变性处理，以改善 丝素蛋白膜的脆性，即增加拉伸伸长率。中国发明专利“一种难溶于水的 透明丝素蛋白膜及其制备方法”（CN101967282A）中，在提纯后的丝素 蛋白溶液中加入多元醇作为交联剂，将两者混合物在模具中经鼓风干燥成 膜，再在相对湿度为30~98%的环境中处理1~48小时（未对处理温度提 出要求），获得所需要的膜。中国发明专利“柔韧丝素蛋白膜及其制备方 法”（CN1316465）中，通过加入环氧树脂来交联丝素蛋白制备不溶于水 的丝素蛋白膜。

现有丝素蛋白膜的制备方法，均是丝素蛋白溶液或其混合物灌注在模 具内，通过溶剂挥发干燥，溶质沉积于模具底部，进而形成厚度约 10~500um的可溶或难溶于水的膜。在该步骤的成膜过程中，模具底部上 表面的平整性和水平性，模具是否处于振动环境，吹在溶液表面的风速， 都将影响膜厚度的均一性和膜表面的微观结构；该步骤成膜过程中，干燥 的温湿度条件，也将影响膜的透明性和膜均一性（如温度过高，会在膜内 形成微气泡）；该步骤中膜的干燥程度，也影响膜的性能；该步骤膜的干 燥时间约几小时到几天，模具所处环境的洁净程度，将影响膜的微生物和 内毒素含量；该步骤形成的膜，再通过后续步骤的极性溶液或湿热条件等 处理，处理温湿度也会对膜的结晶程度造成影响。

针对上述问题，本发明专利期望通过最简单和最经济的方法，获得一 种难溶于水的丝素蛋白膜。

（三）发明内容

本发明目的是提供一种难溶于水的丝素蛋白膜及其制备方法和应用， 制备工艺中不接触有毒物质，未使用变性、促凝和交联等添加剂，制备工 艺简单，利于大量生产；模具底面采用表面极其平整的浮法玻璃，并将模 具存放于水平可精细调整的不锈钢平台；通过改变模具底部上表面的光滑 或粗糙程度，将获得两种不同表面结构的丝素蛋白膜：底部光滑模具制备 的双滑型膜，膜的两面均是光滑面，膜为半透明至近透明状，而底部毛糙 模具制备的贴滑型膜，一面光滑，另一面粗糙，粗糙面有利于膜在创面的 固定，利于止血、细胞粘附和增殖；通过控制该膜的厚度及其结晶程度， 产生不同理化性能（如力学、柔韧度）和生物学性能（体内降解速率）， 满足不同用途的需要；该膜在湿润条件会吸收30~40%水分，膜会变的柔 软（厚度10~100um），大于150um的柔韧性较差；膜降解产物为氨基酸， 膜及其降解产物具有良好的生物相容性；膜能阻止细胞、微生物及生物大 分子穿过，具有一定的水汽渗透性能；该膜在防粘连膜、护创膜或人工膜 （引导骨再生膜、牙周膜、胸膜、硬脑膜或硬脊膜、鼓膜、眼角膜）等领 域具有广阔的市场。

本发明采用的技术方案是：

一种难溶于水的丝素蛋白膜，所述丝素蛋白膜按如下方法制备：（1） 以桑蚕蚕丝为原料，经脱胶、溶解、透析，获得截留液a，将截留液a或 截留液a的浓缩液过滤或离心，取滤液或上层离心液得到丝素蛋白溶液； （2）取步骤（1）得到的丝素蛋白溶液，将丝素蛋白溶液的质量浓度用纯 化水调整至0.3~30%（优选0.5～15%）（取部分丝素蛋白溶液在60℃烘干 至恒重，计算丝素蛋白溶液的含水量，从而计算用纯化水调整丝素蛋白溶 液所需的水量）倒入模具内，所述模具内丝素蛋白溶液加入量以丝素蛋白 质量计为1~50mg/cm²模具（优选2~30mg/cm²，更有效3~20mg/cm²）， 在温度5~60℃（优选35~55℃，更优选45℃），相对湿度（RH）10~70% （优选20~50%，最优选40%）条件下干燥至无肉眼可见的水分，模具重 量增加了所加入丝素蛋白溶液中丝素蛋白质量的1.2~1.8倍，在模具内形 成丝素蛋白膜；（3）将模具在温度50~100℃（优选60~80℃，更优选65~70 ℃），RH为70~100%（优选85~95%，最优选90%）条件下放置20~200min （优选60~150min，最优选120min）进行湿热交联，然后置于体积浓度 50~90%（优选75%）的乙醇水溶液中浸洗10~60min（优选30min），去 除模具，丝素蛋白膜再用纯化水充分浸洗30~150min（优选60~120min） 至无醇，获得难溶于水的丝素蛋白膜，通常厚度为10~500μm，优选厚度 20~200μm。

进一步，步骤（1）所述截留液a的浓缩液的制备方法是将透析后的 透析袋放入质量浓度20~60%的聚乙二醇水溶液中，静置1~10h进行浓缩， 取截留液b即为截留液a的浓缩液；所述聚乙二醇平均分子量 1000~10000。

进一步，步骤（1）所述截留液a或截留液a的浓缩液过滤或离心方 法为下列之一：a）将截留液a或截留液a的浓缩液于4℃、3000~6000g 条件下离心5~20min，弃去沉淀，取上层溶液即为所述的丝素蛋白溶液； b）将截留液a或截留液a的浓缩液用孔径为2~20μm的滤器过滤，去除 不溶性颗粒，取滤液即为所述的丝素蛋白溶液。

进一步，步骤（2）所述模具为底部光滑平整且水平的模具。

进一步，本发明优选采用底部为浮法玻璃的正方形模具（优选边长 20cm），所述模具内质量浓度0.3~30%（优选0.5~15%）的丝素蛋白溶液 的加入量以丝素蛋白质量计为1~50mg/cm²模具（优选2~30mg/cm²，更优 选3~20mg/cm²），将模具在温度5~60℃，相对湿度（RH）10~70%条件 下干燥至无肉眼可见的水分，在模具内形成两面光滑的丝素蛋白膜；将模 具在温度50~100℃，RH为70~100%条件下放置20~200min进行湿热交 联，然后置于体积浓度50~90%的乙醇水溶液中浸洗10~60min，去除模具， 丝素蛋白膜再用纯化水充分浸洗30~150min，获得难溶于水的双滑型丝素 蛋白膜。

更进一步，步骤（2）所述模具为底部表面毛糙且水平的模具。

更进一步，本发明优选采用底部为浮法玻璃经磨砂获得粗糙面的正方 形模具（优选边长20cm），所述模具内质量浓度0.3~30%（优选0.5~15%） 的丝素蛋白溶液的加入量以丝素蛋白质量计为1~50mg/cm²模具（优选 2~30mg/cm²，更优选3~20mg/cm²），将模具在温度5~60℃，RH为10~70% 条件下干燥至无肉眼可见的水分，在模具内形成一面光滑、另一面粗糙的 丝素蛋白膜（厚度为10~500μm）；将模具在温度50~100℃，RH为70~100% 条件下放置20~200min进行湿热交联，然后置于体积浓度50~90%的乙醇 水溶液中浸洗10~60min，去除模具，丝素蛋白膜再用纯化水充分浸洗 30~150min，获得难溶于水的贴滑型丝素蛋白膜。

进一步，步骤（1）所述截留液a的浓缩液是指当所需丝素蛋白溶液 质量浓度小于5%时不需要浓缩，直接将截留液a过滤或离心，获得丝素 蛋白溶液；当所需丝素蛋白溶液质量浓度大于5%时，将所述截留液a进 行浓缩，所述浓缩方法为：将透析后的透析袋放入质量浓度20~60%的聚 乙二醇水溶液中，静置浓缩1~10h，取截留液b即为截留液a的浓缩液， 将截留液a的浓缩液过滤或离心后制成丝素蛋白溶液，再用去离子水将丝 素蛋白溶液调整为5~30%；所述聚乙二醇平均分子量1000~10000。

进一步，步骤（1）所述脱胶、溶解、透析方法为：a）脱胶：将100g 桑蚕蚕丝放入4~8L的2M碳酸钠水溶液中，90~100℃水浴20~60min， 纯水清洗，该过程重复3次，脱去丝胶蛋白，留下丝素蛋白，将丝素蛋白 在20~60℃烘干，获得干燥后的丝素蛋白，备用；b）溶解：将上述干燥 后的丝素蛋白以质量体积比0.10~0.20：1溶于9~11M的溴化锂水溶液中， 55~65℃水浴30~300min至丝素蛋白充分溶解，获得含丝素蛋白的混合 液；c）透析：将含丝素蛋白的混合液用截留分子量1000~20000道尔顿的 透析袋进行透析，用10倍混合液体积的无菌去离子水作为透析液在3天 透析10~12次，去除溶液中的溴化锂成分，获得截留液a。

本发明还提供所述的难溶于水的丝素蛋白膜在制备防粘连膜、护创膜 或人工膜中的应用。

进一步，所述的人工膜为牙周膜、骨引导再生膜、胸膜、硬脑膜、硬 脊膜、鼓膜或眼角膜。

本发明所模具可以使各种材质制作的平皿或盒体，优选浮法玻璃制作 的方形皿。

本发明所述难溶于水的丝素蛋白膜制备中，在固定面积模具内加入丝 素蛋白质量决定了最终丝素蛋白膜的厚度，即所述膜厚度与单位模具面积 的丝素蛋白加入量和浓度相关。当模具面积一定时，调整丝素蛋白溶液质 量浓度或加入体积来获得不同厚度的难溶于水的丝素蛋白膜。如果模具底 部表面光滑则获得双面光滑的难溶于水的双滑型丝素蛋白膜，如果模具底 部表面毛糙则获得一面光滑、另一面粗糙的难溶于水的贴滑型丝素蛋白 膜。本发明所制备的难溶于水的丝素蛋白膜厚度为10~500μm，在37℃生 理盐水中，24h丝素蛋白溶失率小于1%。

本发明所述聚乙二醇的平均分子量为1000~10000。

与现有技术相比，本发明的有益效果主要体现在：（1）本发明所述的 难溶于水的丝素蛋白膜制备工艺过程中不接触有毒物质，制备工艺简单， 利于大量生产；（2）本发明难溶于水的丝素蛋白膜以丝素蛋白为原料，模 具采用表面极其平整的浮法玻璃，并将模具存放于水平可精细调整的不锈 钢平台，底部光滑模具制备的双滑型丝素蛋白膜的两面均是光滑面，底部 粗糙模具制备的贴滑型丝素蛋白膜一面光滑，一面粗糙，所述膜为半透明 至近透明状，现有研究已经证明丝素蛋白及其降解产物（氨基酸）拥有良 好的生物相容性；（3）本发明难溶于水的丝素蛋白膜易于控制不同的厚度 及其结晶程度，进而产生不同的物理（如力学、透光度、水汽渗透性）和 生物学性能（如降解时间），满足不同用途的需求；（4）本发明难溶于水 的双滑型丝素蛋白膜在湿润条件下柔软、光滑、致密，具有阻止细胞、微 生物和生物大分子穿过的功能，并拥有高透光率，尤其适用于防粘连膜、 眼角膜、护创膜领域；（5）本发明难溶于水的贴滑型丝素蛋白膜一面光滑， 另一面粗糙，粗糙面有利于膜的固定，减少缝合针数或无需缝合固定，利 于创面止血、细胞粘附和增殖，进而具有诱导组织再生作用，尤其适用于， 在防粘连膜、人工膜（引导骨再生膜、牙周膜、胸膜、硬脑膜、硬脊膜、 眼角膜或鼓膜）等领域具有广阔的市场。

（四）附图说明

图1丝素蛋白膜的红外吸收光谱（FTIR‑ATR）。

图2丝素蛋白膜（100μm）光滑面的扫描电镜图。

图3丝素蛋白膜（100μm）粗糙面的扫描电镜图。

（五）具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明进行进一步描述，但本发明的保护范围 并不仅限于此：

实施例1（500μm）

（1）丝素蛋白溶液的制备：a）脱胶：将100g桑蚕蚕丝（浙江华芝 丝绸有限责任公司，5A级）放入5L的2M碳酸钠水溶液中，96℃水浴 30min，纯化水清洗，该过程重复3次，脱去丝胶蛋白，留下丝素蛋白， 将丝素蛋白在50℃烘干，获得70g干燥后的丝素蛋白，备用；b）溶解： 将上述干燥后的丝素蛋白以质量体积比0.2：1溶于9.3M的溴化锂（LiBr） 水溶液中，60℃水浴90min至丝素蛋白充分溶解，获得含丝素蛋白和少 量不溶性颗粒组成的混合液；c）透析：将混合液用再生纤维素透析袋（截 留分子量4000道尔顿）透析，用10倍混合液体积的无菌纯化水在3d透 析12次，去除溶液中的LiBr离子，获得截留液a；d）浓缩：将透析后 的透析袋放入4倍体积的质量浓度50%聚乙二醇（PEG，分子量7000） 水溶液，室温静置浓缩5h，取截留液b，即获得截留液a的浓缩液；e） 将截留液b在水平转子5000g，4℃，离心10min，除去底部的未溶解丝 素蛋白和溴化锂中可能存在不溶性颗粒，取上清液，即获得提纯后的丝素 蛋白溶液300ml；f）浓度测定：取提纯后的丝素蛋白溶液10ml，在平皿 内烘干，质量差法测得丝素蛋白溶液质量浓度为20%。丝素蛋白溶液4 ℃保存备用。

（2）将模具（底部为浮法玻璃，边长20cm的正方形皿，其它实施 例模具材质相同）调整水平，加入质量浓度20%的丝素蛋白溶液100ml （20000mg丝素蛋白），在温度40℃，RH40%环境静置晾干至肉眼无可见 液体，比空模具重量增加30g，在模具底部形成丝素蛋白膜。

（3）将模具置于温度70℃，RH92%的恒温恒湿箱内进行湿热交联 120min，然后用体积浓度75%乙醇水溶液浸泡20min，去除模具，膜用纯 化水洗涤3次，每次20min，切去丝素蛋白膜边缘因模具拐角处引起的不 均一边缘膜，获得厚度为500μm难溶于水的双滑型丝素蛋白膜。红外吸 收光谱采用傅立叶变换红外光谱仪（型号Nicolet 6700），检测方法：全 反射光谱，见图1所示。扫描电镜型号为Hitachi S‑3000N。力学检测设 备为（model15543，instron，canton，MA），拉伸速度为100mm/min。

实施例2（200μm）

（1）丝素蛋白溶液的制备：a）脱胶：将100g桑蚕蚕丝（浙江华芝 丝绸有限责任公司，5A级）放入5L的2M碳酸钠水溶液中，95℃水浴 30min，去离子水清洗，该过程重复3次，脱去丝胶蛋白，留下丝素蛋白， 将丝素蛋白在50℃烘干，获得70g干燥后的丝素蛋白，备用；b）溶解： 将上述干燥后的丝素蛋白以质量体积比0.2：1溶于9.3M的溴化锂（LiBr） 水溶液中，60℃水浴90min至丝素蛋白充分溶解，获得含丝素蛋白和少 量不溶性颗粒组成的混合液；c）透析：将上述混合液用再生纤维素透析 袋（截留分子量8000道尔顿）透析，用10倍混合液体积的无菌去离子水 在3d透析12次，去除溶液中的LiBr离子，获得截留液a；d）将截留液 a在水平转子5000g，4℃，离心10min，除去底部的未溶解丝素蛋白和溴 化锂中可能存在不溶性颗粒，取上清液即获得提纯后的丝素蛋白溶液 1000ml；e）浓度测定：取提纯后的丝素蛋白溶液10ml，在平皿内烘干， 质量差法测得丝素蛋白溶液的质量浓度为5%。丝素蛋白液4℃保存备用。

（2）将模具（同实施例1）调整水平，加入上述制备的质量浓度5% 丝素蛋白液160ml（8000mg丝素蛋白），去除内部产生的气泡。在温度 45℃，RH40%环境静置晾干至肉眼无可见液体，比空模具重量增加12g， 在模具底部形成丝素蛋白膜。

（3）将模具置于温度68℃，RH90%的湿热交联箱内放置120min， 然后用体积浓度75%乙醇水溶液浸泡20min，去除模具，膜用纯化水洗涤 3次，每次20min，切去丝素蛋白膜边缘因模具拐角处引起的不均一边缘 膜，获得厚度为200μm难溶于水的双滑型丝素蛋白膜。

实施例3（100μm）

（1）丝素蛋白溶液的制备：a）脱胶：将100g桑蚕蚕丝（浙江华芝 丝绸有限责任公司，5A级）放入5L的2M碳酸钠水溶液中，98℃水浴 30min，去离子水清洗，该过程重复3次，脱去丝胶蛋白，留下丝素蛋白， 将丝素蛋白在50℃烘干，获得70g干燥后的丝素蛋白，备用；b）溶解： 将丝素蛋白以质量体积比0.20：1溶于9.3M的溴化锂（LiBr）水溶液中， 60℃水浴90min至丝素蛋白充分溶解，获得含丝素蛋白和少量不溶性颗 粒组成的混合液；c）透析：将混合液用再生纤维素透析袋（截留分子量 2000道尔顿）透析，用10倍混合液体积的无菌去离子水在3d透析12次， 去除溶液中的LiBr离子，获得截留液a；d）将截留液a用孔径10μm的 滤器，除去底部的不溶性颗粒，取滤液即获得提纯后的丝素蛋白溶液 1200ml；e）浓度测定：取提纯后的丝素蛋白溶液10ml，在平皿内烘干， 质量差法测得丝素蛋白溶液的质量浓度为4%。丝素蛋白液4℃保存备用。

（2）将模具（同实施例1）调整水平，加入质量浓度4%丝素蛋白液 100ml（2000mg丝素蛋白），去除内部产生的气泡。在温度50℃，RH50% 环境静置晾干至肉眼无可见液体，比空模具重量增加6g，在模具底部形 成丝素蛋白膜。

（3）将模具置于温度65℃，RH90%的湿热交联箱内放置100min， 然后用体积浓度75%乙醇水溶液浸泡20min，去除模具，膜用纯化水洗涤 3次，每次20min，切去丝素蛋白膜边缘因模具拐角处引起的不均一边缘 膜，获得厚度为100μm难溶于水的双滑型丝素蛋白膜，光滑面电镜扫描 图见图2所示。

实施例4（50μm）

（1）丝素蛋白溶液的制备：a）脱胶：将100g桑蚕蚕丝（浙江华芝 丝绸有限责任公司，5A级）放入5L的2M碳酸钠水溶液中，98℃水浴 30min，去离子水清洗，该过程重复3次，脱去丝胶蛋白，留下丝素蛋白， 丝素蛋白50℃烘干，获得70g丝素蛋白，备用；b）溶解：将丝素蛋白以 质量体积比0.2：1%溶于9.3M的溴化锂（LiBr）水溶液中，60℃水浴90min 至丝素蛋白充分溶解，获得含丝素蛋白和少量不溶性颗粒组成的混合液； c）透析：将混合液用再生纤维素透析袋（截留分子量8000道尔顿）透析， 用10倍混合液体积的无菌去离子水在3d透析12次，去除溶液中的LiBr 离子，获得截留液a；d）将截留液a用孔径10μm的滤器，除去底部的不 溶性颗粒，获得提纯后的丝素蛋白溶液1200ml；e）浓度测定：取提纯后 的丝素蛋白溶液10ml，在平皿内烘干，质量差法测得丝素蛋白溶液浓度 的质量浓度为4%。丝素蛋白液4℃保存备用。

（2）将丝素蛋白溶液用无菌去离子水稀释成质量浓度2%，将模具 （同实施例1）调整水平，加入质量浓度2%丝素蛋白溶液100ml（800mg 丝素蛋白），去除内部产生的气泡。在温度55℃，RH50%环境静置晾干至 肉眼无可见液体，比空模具重量增加3g，在模具底部形成丝素蛋白膜。

（3）将模具置于温度65℃，RH88%的湿热交联箱内放置100min， 然后用体积浓度75%乙醇水溶液浸泡20min，去除模具，膜用纯化水洗涤 3次，每次20min，切去丝素蛋白膜边缘因模具拐角处引起的不均一边缘 膜，获得厚度为50μm难溶于水的双滑型丝素蛋白膜。

实施例5（500μm）

（1）丝素蛋白溶液的制备：a）脱胶和b）溶解操作同实施例1，c） 透析：将混合液用再生纤维素透析袋（截留分子量3000道尔顿）透析， 用10倍混合液体积的无菌纯水在3d透析12次，去除溶液中的LiBr离子， 获得截留液a；d）浓缩：将透析后的透析袋放入5倍积质量浓度30%聚 乙二醇（PEG，分子量5000）水溶液，室温静置浓缩5h，取截留液b， 即获得截留液a的浓缩液；e）将截留液b在水平转子5100g，4℃，离心 10min，除去底部的未溶解丝素蛋白和溴化锂中可能存在不溶性颗粒，取 上清液，即获得提纯后的丝素蛋白溶液300ml；f）浓度测定：同实施例1。

（2）将模具改为：边长20cm的正方形皿，底部为浮法玻璃一面经磨 砂处理形成粗糙面，粗糙面朝向丝素蛋白膜面。其它操作同实施例1，获 得厚度为500μm难溶于水的贴滑型丝素蛋白膜。

实施例6（200μm）

（1）丝素蛋白溶液的制备：将步骤d）水平转子改为5100g，4℃， 离心10min，其它操作同实施例2，质量差法测得丝素蛋白溶液的质量浓 度为5%。丝素蛋白液4℃保存备用。

（2）将模具改为：边长20cm的正方形皿，底部为浮法玻璃一面经磨 砂处理形成粗糙面，粗糙面朝向丝素蛋白膜面。其它操作同实施例2，获 得厚度为200μm的难溶于水的贴滑型丝素蛋白膜，粗糙面电镜扫描见图 3所示。

实施例7（100μm）

（1）丝素蛋白溶液的制备：将再生纤维素透析袋改为截留分子量 8000道尔顿进行透析，其它操作同实施例3，质量差法测得丝素蛋白溶液 的质量浓度为4%。丝素蛋白液4℃保存备用。

（2）将模具改为：边长20cm的正方形皿，底部为浮法玻璃一面经磨 砂处理形成粗糙面，粗糙面朝向丝素蛋白膜面。其它操作同实施例3，获 得厚度为100μm难溶于水的贴滑型丝素蛋白膜。

实施例8（50μm）

（1）丝素蛋白溶液的制备：操作同实施例4，质量差法测得丝素蛋 白溶液浓度的质量浓度为4%。丝素蛋白液4℃保存备用。

（2）将模具改为：边长20cm的正方形皿，底部为浮法玻璃一面经磨 砂处理形成粗糙面，粗糙面朝向丝素蛋白膜面。其它操作同实施例4，获 得厚度为50μm难溶于水的贴滑型丝素蛋白膜。

表1双滑型丝素蛋白膜的主要性能参数