一种鳞状细胞癌的中藏药

一种鳞状细胞癌的中藏药

一、技术领域

本发明属药品领域，具体涉及鳞状细胞癌的中藏药处方及制备方法。

二、背景技术

鳞状细胞癌亦称皮样癌，主要从有鳞状上皮复盖的皮肤开始。此类癌肿恶性程度较高，发展较快，破坏也较大。既可破坏眼部组织，侵入副鼻窦或颅内，又可以通过淋巴管转移至耳前或颌下淋巴结，甚至引起全身性转移。多发生于中老年人。放射X线检查：中央型SCC可发生肺叶或整个肺萎陷，伴有纵隔向患侧移位。鳞状细胞癌是形成空洞最常见的肺癌类型，在胸片上可见不规则的厚壁空洞。鳞状细胞癌通过直接扩散侵犯局部邻近组织，较少发生远处器官转移。分化差的肿瘤可在病变早期转移至脑、肝脏、肾上腺、下消化道和淋巴结。手术切除后局部复发比其它类型的肺癌更常见。随着人口老龄化，城市人口比例的逐渐增多，环境污染的日益严重，吸烟、嗜酒等不良生活习惯的普遍存在，生活压力所造成的心理因素是癌症的发生率、死亡率呈日益增加的趋势。因此，加强鳞状细胞癌药物的研究尤为重要。鳞状细胞癌治愈难、费用高。

三、发明内容

基于上述的问题，本发明提出一种鳞状细胞癌的中藏药,其特征在于每100ml注射水中加入狼毒提取物0.5～6g、斑蝥提取物0.1～4 g、水蛭提取物0.6～8 g、蚤休提取物0.5～7 g、藏红花提取物0.9～10 g、黄芪提取物0.8～9 g。所述狼毒提取物是通过下述方法得到的，将狼毒原料清洗干净，破碎至5～10mm的碎块，然后加入狼毒原料质量2～10倍的水浸泡1～6小时，在60～100℃煮1～6小时，过滤，收集滤液，重复提取3～5次，合并滤液，浓缩，加入浓缩液体积0.3～1倍量50～95%的乙醇，混合均匀，常温静置4～20小时，超微过滤，去除滤液，滤饼冷冻干燥得到狼毒提取物；所述斑蝥提取物是通过下述方法得到的，将斑蝥原料清洗干净后在20～90℃温度烘焙3～60分钟，然后粉碎过20～100目筛，在10～50 ℃温度下加入30～95%乙醇温浸20～80小时，斑蝥: 乙醇的质量体积比为1:0.8～3，中空纤维超滤，除去滤液，滤饼冷冻干燥得到；所述水蛭提取物是通过下述方法得到的，将水蛭原料清洗干净后，加入60～95%乙醇，水蛭: 乙醇的质量体积比为1:6～10倍量，加热提取3～5次，每次0.5～4小时，合并滤液，过滤，除去滤液，滤饼冷冻干燥得到；所述蚤休提取物、藏红花提取物、黄芪提取物是通过下述方法得到的，将蚤休、藏红花、黄芪分别加入6～10倍重量水浸泡6～10小时，在80～100℃提取4～6小时，重复提取3次，合并滤液，过滤，除去滤渣，滤液浓缩，浓缩液冷冻干燥得到。一种鳞状细胞癌的中藏药制备方法,将狼毒提取物、斑蝥提取物、水蛭提取物、蚤休提取物、藏红花提取物、黄芪提取物按配比称重、与注射水混合均匀后制成针剂。

狼毒具有逐水祛痰，破积杀虫的功效，治水肿腹胀，痰、食、虫积，心腹疼痛，慢性气管炎，咳嗽，气喘，淋巴结、皮肤、骨、副睾等结核，疥癣，痔瘘；斑蝥具有破血逐瘀，散结消癥，攻毒蚀疮的功效，其斑蝥素有抗癌作用，斑蝥素还有免疫增强作用、抗病毒、抗菌的作用；蚤休具有清热解毒、消肿止痛、凉肝定惊的功效；水蛭具有活血破瘀，通经消积的功效；黄芪具有补气固表，利尿托毒，排脓，敛疮生肌，提高免疫功能的功效。藏红花具有活血祛瘀更通络，对经络有很大的功效，逐瘀化痛还通经，对月经有调理功效，凉血解毒又养血。

本发明的实验：

（1）体外实验

以人肺腺癌细胞株A549，进行体外实验。采用CCK-8法。分别取对数生长期的肿瘤细胞株，胰酶消化，1000r/min离心吹打成单细胞悬液，5x104个细胞/ml，接种于96孔培养板中。空白对照不加细胞，仅有100μl 无血清RPMI-1640培养基。药物组分别加入不同的浓度样品 10μl ，每组浓度设3个复孔，置37℃、5％CO2培养箱培养孔孵育48h后各孔加入CCK- 8试剂(5mg／m1)，继续培养1h，用酶标仪检测OD值(波长=450nm)。计算各浓度的抑制率：抑制率=(1-加药组OD值／阴性对照组OD值)x100％。

表1    人肺腺癌A549细胞株

  1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12

A 0.134 0.145 0.116 0.154 0.304 0.029 0.128 0.138 0.159 0.156 0.124 0.075

B 1.107 0.864 0.9 0.954 0.946 0.749 0.811 1.098 0.719 1.018 0.916 0.929

C       0.429 0.434 0.515 0.418 0.408 0.523      

D       0.531 0.625 0.605 0.531 0.379 0.473      

E       0.665 0.655 0.682 0.466 0.583 0.684      

F       0.893 0.802 0.781            

G       0.845 0.862 0.932            

H                        

实验结果显示，人肺腺癌细胞株A549的IC50：59.12μl/ml，本发明作用明显。

（2）体内实验

以小鼠肉瘤S180和小鼠肝癌移植瘤为模型，将H22、S180瘤株复苏，每只小鼠腹腔注射0.5ml体内传代，无菌条件下抽取传第三代后接种7天的H22、S180瘤源小鼠的腹水(黄清亮液体)，离心后弃去上清液，无菌生理盐水调至细胞浓度为1×107 · ml-1，每只小鼠右腋部皮下接种0.2ml，制作成小鼠移植瘤动物模型。每日观察肿瘤生长情况，按荷瘤小鼠造模评价标准判断造模是否成功。末次给药24小时后颈椎脱臼处死小鼠，剥取瘤块、胸腺和脾脏并称重，按下列公式计算抑瘤率、胸腺指数和脾指数。

表 2.    对S180小鼠肉瘤肿瘤生长的影响(±S，n=12)

注：与生理盐水组比较，*P＜0.05，**P＜0.01

实验结果显示，本发明对S180的生长有显著的抑制作用，能提高荷瘤小鼠的胸腺指数和脾指数，与生理盐水组比较，P＜0.05。各剂量组给药后动物体重均有不同程度的增加，与生理盐水组比较差异均无显著性。阳性对照DDP（1 mg · kg-1）明显抑制小鼠移植性肿瘤的生长，但动物体重、胸腺和脾指数明显降低。

表3.    对H22小鼠肝癌肿瘤生长的影响(±S，n=12)

注：与生理盐水组比较，*P＜0.05，**P＜0.01

实验结果显示，本发明对H22肿瘤的生长也有明显的抑制作用，并能提高荷瘤小鼠的胸腺指数和脾指数，与生理盐水组比较，P＜0.05。各剂量组给药后动物体重均有不同程度的增加，与生理盐水组比较差异均无显著性。阳性对照DDP（1 mg · kg-1）明显抑制小鼠移植性肿瘤的生长，但动物体重、胸腺和脾指数明显降低。

实验结果显示，本发明对小鼠肉瘤S180和小鼠肝癌H22显示了显著的抑制作用，并能提高胸腺和脾指数，呈现出明显的剂量依赖关系。表明具有显著的体内抗肿瘤活性。

本发明综合中藏药的不同功能，科学配伍，用狼毒、蚤休、斑蝥、水蛭以毒攻毒，软坚散结，祛瘀止痛，化瘀通经，清热解毒，再配以黄芪、藏红花，补血活血，标本兼治，既能达到抑制、杀死癌细胞的作用，也能增强机体免疫力、促进机体代谢功能。本发明制备工艺成熟，生产简单，使用方便，不手术，用药量少，周期短。

四、具体实施方式

实施例1：一种鳞状细胞癌的中藏药，每100ml注射水中加入狼毒提取物0.5g、斑蝥提取物0.1 g、水蛭提取物0.6 g、蚤休提取物7 g、藏红花提取物10 g、黄芪提取物9 g。所述狼毒提取物是通过下述方法得到的，将狼毒原料清洗干净，破碎至5～10mm的碎块，然后加入狼毒原料质量2～10倍的水浸泡1～6小时，在60～100℃煮1～6小时，过滤，收集滤液，重复提取3～5次，合并滤液，浓缩，加入浓缩液体积0.3～1倍量50～95%的乙醇，混合均匀，常温静置4～20小时，超微过滤，去除滤液，滤饼冷冻干燥得到狼毒提取物；所述斑蝥提取物是通过下述方法得到的，将斑蝥原料清洗干净后在20～90℃温度烘焙3～60分钟，然后粉碎过20～100目筛，在10～50 ℃温度下加入30～95%乙醇温浸20～80小时，斑蝥: 乙醇的质量体积比为1:0.8～3，中空纤维超滤，除去滤液，滤饼冷冻干燥得到；所述水蛭提取物是通过下述方法得到的，将水蛭原料清洗干净后，加入60～95%乙醇，水蛭: 乙醇的质量体积比为1:6～10倍量，加热提取3～5次，每次0.5～4小时，合并滤液，过滤，除去滤液，滤饼冷冻干燥得到；所述蚤休提取物、藏红花提取物、黄芪提取物是通过下述方法得到的，将蚤休、藏红花、黄芪分别加入6～10倍重量水浸泡6～10小时，在80～100℃提取4～6小时，重复提取3次，合并滤液，过滤，除去滤渣，滤液浓缩，浓缩液冷冻干燥得到。将狼毒提取物、斑蝥提取物、水蛭提取物、蚤休提取物、藏红花提取物、黄芪提取物按配比称重、与注射水混合均匀后制成针剂，时，抽取该针剂2ml，直接注射于病灶区，或与200ml盐水或葡萄糖水混合，静脉注射，一天一次，15日为一疗程。

实施例2：一种鳞状细胞癌的中藏药，每100ml注射水中加入狼毒提取物6g、斑蝥提取物4 g、水蛭提取物8 g、蚤休提取物0.5 g、藏红花提取物10 g、黄芪提取物9 g。制备方法与方法同实施例1。

实施例3一种鳞状细胞癌的中藏药，每100ml注射水中加入狼毒提取物2g、斑蝥提取物3 g、水蛭提取物5 g、蚤休提取物4 g、藏红花提取物8 g、黄芪提取物7 g。制备方法与方法同实施例1。

实施例4：一种鳞状细胞癌的中藏药，每100ml注射水中加入狼毒提取物3g、斑蝥提取物2.5 g、水蛭提取物4 g、蚤休提取物3.5 g、藏红花提取物5 g、黄芪提取物4.5 g。制备方法与方法同实施例1。

实施例5：一种鳞状细胞癌的中藏药，于每100ml注射水中加入狼毒提取物2g、斑蝥提取物2 g、水蛭提取物8 g、蚤休提取物0.5 g、藏红花提取物0.9g、黄芪提取物9 g。制备方法与方法同实施例1。

实施例6：一种鳞状细胞癌的中藏药，每100ml注射水中加入狼毒提取物6g、斑蝥提取物3g、水蛭提取物2 g、蚤休提取物6 g、藏红花提取物9 g、黄芪提取物1 g。制备方法与方法同实施例1。

以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。