绿芦笋的组织培养生产法

著录项
  • CN97115259.4
  • 19970827
  • CN1209266
  • 19990303
  • 刘宝林
  • 刘惠林
  • A01H4/00
  • A01H4/00

  • 北京市西城区护国寺西巷29号
  • 中国,CN,北京(11)
  • 航空航天工业部航空专利事务所
  • 李致宁
摘要
本发明公开了一种以幼芽、茎尖和花梗作为外植体的绿芦笋的组织培养生产方法,它具有时间短,增殖率高和可进行全年生产的优点,比大田生产快得多,使绿芦笋的生产可以实现大规模的工业生产,不受时间、季节、地理位置的限制,就是普通的蔬菜技术人员通过学习和培训,完全可以进行培育,使绿芦笋可以在北纬40°正常生长,在没有大棚的条件下,冬天可在冻土中过冬,来年春天照常可以收割采摘,在长江以北黄河中下游可以种植。
权利要求

1.绿芦笋的组织培养生产法,组织培养方法是在MS培养基上, 来实现植物大量地生产的方法,本发明特征在于,本发明的组织培养 法,是专门用于绿芦笋的组织培养法,其组织培养的步骤分为,外植 体的选择,外植体的消毒,接种、植株诱导、生根和移栽六步。

一.外植体的选择:

本发明的外植体,采用的带芽外植体,即用绿芦笋的幼芽、茎芽 和花梗作为外植体。

二.外植体的消毒:

本发明选择绿芦笋的嫩茎和茎尖作为外植体(接种材料),它自 身常常附有多种多样的微生物,一旦带进培养基,就会迅速滋生,使 组织培养前功尽弃。因此外植体在接种前,必须进行灭菌。灭菌前将 绿芦笋的幼芽、茎尖和花梗用洁净水冲洗干净,用吸水纸将水吸干; 再用70%的酒精漂洗一下。然后根据幼芽、茎尖和花梗的老嫩程度, 用2-10%的次氯酸钠溶液浸泡6-15分钟,用洁净水冲洗三次,用无菌 纸吸干,准备接种。

三.接种:

组织培养的接种是指,将灭过菌的外植体,在无菌的条件下,切 成大于5mm 2的小块,并放人培养基的过程。特别要说明的是,接种过 程必须在无菌或者在超净工作台上进行。

四.植株诱导:

在培养基中植物激素的作用下,外植体可以通过三种途经迅速增 殖,即侧芽增殖、诱导不定芽的形成和诱导胚状体的形成。本发明采 用诱导不定芽的形成方式。很多植物的器官可以产生不定芽,本发明 在自燃条件下,在培养基中,由于所需要的外植体很小,又加上激素 的作用,可以使绿芦笋产生不定芽的能力得到极好的发辉,并较快地 成长为嫩枝。

五.生根:

本发明采用浸泡的方法使嫩枝生根,即:将在培养基中生长的嫩 枝切下,浸泡在高浓度的生长素溶液中,生长素的浓度为100毫克/升 左右,浸泡时间为10-15小时。然后取出,接种于不加任何激素的MS 培养基上,10天左右即可生根。

六.移栽:

在上述生根过程中,当小苗的根原基突起或者形成几毫米长的短 根时,将其取出,洗去粘在根部的琼脂,栽入有少量营养的人工基正 中。本发明所选用的基质是泡沫塑料板材,将板材放入容器中,在板 材上钻孔以固定生根后的小苗,容器中充满营养液,进行水培育。即 使小苗根部与营养液体充分接触。经过5-10天,即可定植到土壤中。

说明书

绿芦笋的组织培养生产法

本发明所说的绿芦笋的组织培养生产法是绿芦笋的大量繁植、培 养和生产的方法。

绿芦笋学名叫石刁柏,是多年生草本植物。因其含有丰富的叶酸、 植物蛋白等人体所需要的稀有物质,具有显著地提高人体免役力的功 能。在我国,现有的绿芦笋繁育方式,多是用籽粒种植和插条。籽粒 种植须待秋天结籽后进行,生产受到时间和季节的限制;插条繁育则 浪费了大量的绿芦笋材料。不管是籽粒种植还是插条,都不能适应大 规模的生产。重要的是。一般人都认为,绿芦笋只能的长江以南种植, 由于无法过冬,它无法在北纬40°正常生长。

本发明的目的就是,提出绿芦笋组织培养技术和方法,使普通蔬 菜技术人员,通过培训,可以掌握本方法,在南方和北方都可以低成 本地大量培植和生产绿芦笋。服务于广大人民。

现在来详细全面地叙述本发明提出的绿芦笋的组织培养生产法。 所谓组织培养繁育是指,在植物离体的条件下,将植物的一部分,如 一小段茎、一小块叶、甚至一个细胞,接种在培养基上,使它们重新 形成一个完整植株的方法。由于植物细胞具有完整植株的全部信息, 具有全能性和植物激素的调解作用,提供了繁育成功的可能。组织培 养是一项崭新的生物技术,具有节约材料,又可不受时间、季节地限 制,可全年在实验室里培养繁殖,并可按照一定的生产程序操作,实 现工业化生产。

进行植物组织培养,首先必须选择和配制培养基,MS培养基是目 前普遍使用的一种,其通用性强,易于普通技术人员配制,其次要选 择适当的外植体(即培养材料)。外植体分为带芽外植体和由分子组 织构成的外植体两种类型,

本发明采用的带芽外植体,即用绿芦笋的幼芽、茎尖和花梗作为 外植体。

组织培养的步骤分为培养基的配制、外植体(接种材料)的消毒、 接种、植株诱导、生根和移栽六步。

一.关于培养基的配制:其配方如下:(组成物在每升培养基中 的含量)(其组成物均为化学纯) (PH 5.8)(单位:毫升/升)

名称 KH 2PO 4 MgSO 4·7H 2O  CaCl 2·2H 2O  NH 4NO 3 KNO 3 成分 170  360  430  1600  1900 名称 CuSO 4·5H 2O  CoCl 2·6H 2O  Na 2MoO 4  KI  ZnSO 4·7H 2O 成分 0.025  0.025  0.25  0.83  8.6 名称 MnSO 4·4H 2O 盐酸硫胺素 菸酸 盐酸吡多素 甘氨酸 成分 22.3  0.4  0.5 0.5 2 名称 肌醇 琼脂 FeSO 4·7H 2O 蔗糖 Na 2-EDTA 成分 100  10000  5570 5毫升/升 30000  7450 5毫升/升

MS培养基有高效的无机盐浓度,对保证植物组织生长所需的矿物 质营养和加速愈伤组织的生长十分有利,它保证了绿芦笋幼芽、茎尖 和花梗切片悬浮培养的成功。

二.外植体的消毒:

本发明选择绿芦笋的幼芽、茎尖和花梗作为外植体(接种材料), 它自身常常附有多种多样的微生物,一旦带进培养基,就会迅速滋生, 使组织培养前功尽弃。因此外植体在接种前,必须进行灭菌。灭菌前 将绿芦笋的幼芽、茎尖和花梗用洁净水冲洗干净,用吸水纸将水吸干; 再用70%的酒精漂洗一下。然后根据幼芽、茎尖和花梗的老嫩程度, 用2-10%的次氯酸钠溶液浸泡6-15分钟,用洁净水冲洗三次,用无菌 纸吸干,准备接种。

三.接种:

组织培养的接种是指,将灭过菌的外植体,在无菌的条件下,切 成大于5mm2的小块,并放入培养基的过程。特别要说明的是,接种过 程必须在无菌或者在超净工作台上进行。

四.植株诱导:

在培养基中植物激素的作用下,外植体可以通过三种途经迅速增 殖,即侧芽增殖、诱导不定芽的形成和诱导胚状体的形成。本发明采 用诱导不定芽的形成方式。很多植物的器官可以产生不定芽,本发明 在自燃条件下,在培养基中,由于所需要的外植体很小,又加上激素 的作用,可以使绿芦笋产生不定芽的能力得到极好的发辉,并较快地 成长为嫩枝。

五.生根:

本发明采用浸泡的方法使嫩枝生根,即:将在培养基中生长的嫩 枝切下,浸泡在高浓度的生长素溶液中,生长素的浓度为100毫克/升 左右,浸泡时间为10-15小时。然后取出,接种于不加任何激素的MS 培养基上,10天左右即可生根。

六.移栽:

在上述生根过程中,当小苗的根原基突起或者形成几毫米长的短 根时,将其取出,洗去粘在根部的琼脂,栽入有50%浓度营养的人工 基质中。本发明所选用的基质是泡沫塑料板材,将板材放入容器中, 在板材上钻孔以固定生根后的小苗,容器中充满营养液,进行水培育。 即使小苗根部与营养液体充分接触。经过5-10天,即可定植到土壤中。

本发明的优点在于:利用组织培养法生产绿芦笋,具有时间段,短 增殖率高和可进行全年生产的优点,比大田生产快得多。加上培养材 料和试管苗的小型化,可以利用有限的空间培养出大量的个体,使绿 芦笋的生产可以变成大规模的工业生产。不受时间、季节、地理位置 的限制,就是普通的蔬菜技术人员通过学习和培训,完全可以进行培 育,进入规模化生产。试验表明,绿芦笋的组织培养,使绿芦笋可以 在北纬40°正常生长,在没有大棚的条件下,冬天可在冻土中过冬, 来年春天照常可以收割采摘,在长江以北黄河中下游可以种植。

本文发布于:2024-09-25 00:40:42,感谢您对本站的认可!

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