一种鉴别地理标志农产品安吉白茶的方法

1.本发明属于农产品鉴别技术领域，具体涉及一种鉴别地理标志农产品安吉白茶的方法。

背景技术：

2.我国是茶叶发源地，茶叶种类众多，主要有六大类茶叶，其中绿茶类是我国最主要也是最有优势的茶类之一。
3.安吉白茶是一种比较特殊的绿茶，它的制作工艺是由鲜叶摊青、高温杀青、理条与烘干组成，符合绿茶加工工艺。安吉白茶因采摘一种突变性白化品种
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白叶1号”茶树品种的白化叶片而得名。“白叶1号”是一种珍稀罕见的白化变异茶树品种，白化期通常仅一个月左右，属于温度敏感型茶树品种，其叶变化阈值约在23℃。清明前萌发的嫩芽呈玉白。谷雨后逐渐转为白绿相间的花叶。夏至后，芽叶恢复为全绿，因“白叶1号”是在清明前后特定的白化期内采摘、加工制作而成，干茶外形泽金黄，芽锋挺直，香气芬芳，汤鹅黄，滋味鲜爽，浓醇甘甜，回味悠长。
[0004]“白叶1号”是浙江省名优绿茶之一，安吉白茶的茶树品种，现主要种植于浙江省湖州市安吉县。安吉白茶产于浙江省安吉县现辖行政区域，根据国家《地理标志产品保护规定》，位于北纬30度23分～30度52分，东径119度14分～119度53分，为国家地理标志保护产品。采用“白叶1号”茶树鲜叶，经传统加工工艺而成的绿茶类茶叶。安吉县属亚热带海洋性季风气候，具有光照充足、气候温和、雨量充沛、四季分明的气候特征，适宜茶树的生长。全县年降雨量2003.4毫米，年日照时数1762.5小时，年平均气温17.0℃。安吉县境内天目山脉自西南入境，分东西两支环抱县境两侧，呈三面环山，中间凹陷，东北开口的“畚箕形”的辐聚状盆地地形。地势西南高、东北低，适宜种植茶树。
[0005]
安吉白茶香气高扬持久，滋味鲜爽，由于安吉白茶的口感醇爽、效益较好，因此，不仅选择喝安吉白茶的消费者是越来越多，生产与经营安吉白茶销售的茶企与茶农也日益增加，但因有些不良商家为了获取更多的利益，销售假茶给消费者，部分茶企、茶农及外地承包种植的经营者未经“安吉白茶”商标权益人许可擅自制作、销售、使用标有“安吉白茶”、“安吉特产白茶”等文字的茶叶包装，甚至冒用qs生产许可证编号，鱼目混珠，严重影响了“安吉白茶”品牌形象。近年来，随着“安吉白茶”品牌知名度的提升，市场上假冒伪劣产品时有发生，对安吉白茶原产地保护受到冲击。安吉县内的“白叶1号”茶树品种种植面积在20万亩左右，但随着该茶树品种的外流，安吉县外的“白叶1号”茶树品种种植面积超过200万亩。安吉县外大面积的“白叶1号”茶树品种产出的茶叶采制了大批干茶，但茶叶的品质跟产地、产地的微生态、制法有很大的关系，这些外来的安吉白茶，对安吉县本地的安吉白茶市场形成较大的冲击。
[0006]
影响茶叶品质的因素众多，这些因素包括遗传背景、生长环境(气候、土壤、纬度)、园艺实践、采摘期、加工方式。其中产地环境是十分重要的影响因子。即使是相同茶树品种制成的茶，也会受环境因子的影响存在品质差异。不同产地生产的同类产品往往会在品质
上有较大的差异，随着经济的发展及人们生活水平的提高，人们对于所饮用的茶叶产品质量要求也日益提高，地理标志产品也应运而生。安吉白茶作为第一批入围中欧互认地标产品，安吉本地产的安吉白茶质量得到了消费者的肯定，然后随着生产安吉白茶的“白叶1号”茶树品种在全国各产茶区的推广，市场上安吉白茶出现了不同的产地来源。如何鉴别茶叶产品的产地来源也成了当前研究热点。
[0007]
由于茶叶品质与其化学成分含量及组成密切相关，因此当前最为常见的茶叶真伪鉴别及茶叶品质优劣主要由审评专家进行专业评估，通过叶、汤、滋味和香气这些特征，判断茶叶品质的好坏。但这种茶叶品质评价方法很大程度上受主观因素影响，容易出现人为误差。因此这种方法不仅需要有长期饮用不同产地安吉白茶的品饮经历，还需要能排除人为干扰，而且准确率也不高。
[0008]
为此，如何通过仪器检来判定茶叶的产地从而提高判定准确性的呼声也日益提高。因此当前已有报道的一些产地溯源方法，如茶叶品质成分、代谢组份鉴定法、矿质元素、稳定同位素等产地溯源法等，然而这些方法通常都需要利用昂贵的仪器设备、众多的检测指标、复杂的样品分析方法、专业的分析测试技术人员。因此，往往导致分析检测费用高昂、具备分析能力的场所少。同时由于需要众多的参数指标来维持溯源的准确性，也同样对各个参数指标的检测准确性带来了较高的要求，若其中少量的指标特别是香气成分等可能会因样品前处理等因素而产生差异，容易导致溯源结果失真。因此这些方法均存在需要检测大量的参数指标，导致检测费高昂，而高昂的检测费容易让维权者陷入两难境地，从而影响了消费者维权的积极性，也导致这些方法的可推广性受影响；因此如何利用简单的判别方法为消费者提供技术保障就显得十分重要。
[0009]
高效液相谱技术作为一种高效快速且较为普及的有效检测设备，已在食品质量检测、药物分析、环境质量检测等领域有诸多应用。目前也已较多地应到茶叶品质成分的分析及产地溯源中。如范方媛等针对茶叶中儿茶素、生物碱、黄酮苷类物质建立hplc指纹图谱，出了龙井茶三大产区28个特征谱峰，结合化学计量方法成功对龙井茶样本进行产区预测。fang s等利用hplc技术对祁门县、非祁门县红茶进行产地判别，并筛选出、总儿茶素、茶黄素-3，3
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二没食子酸酯和茶黄素-3
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没食子酸酯主要非挥发性化合物。ning j等也利用hplc方法测定不同产地六大茶类的主要成分，主要基于ga、egc、c、ec、egcg、ecg、总儿茶素(tc)、和茶氨酸九种成分成功判别各大茶类。但这些报道中的方法仍是需要检测至少六个以前的指标，判别的方法相对较为繁琐。

技术实现要素：

[0010]
针对现有技术中存在的问题，本发明设计的目的在于提供一种鉴别地理标志农产品安吉白茶的方法。该方法针对“白叶1号”茶树品种生产的白叶茶肉眼及感官评审很难准确判断是不是原产地产品，在基于产地环境差异下形成的品质存在差异的原理，提取出了三个关键性特征指标，并建立了能区分安吉白茶与非安吉产白叶茶的数据模型。
[0011]
具体通过以下技术方案加以实现:
[0012]
一种鉴别地理标志农产品安吉白茶的方法，包括以下步骤：
[0013]
1)采集安吉白茶和非安吉产白叶茶作为代表性样品；
[0014]
2)采用hplc法分析安吉白茶和非安吉产白叶茶茶样中儿茶素组分、组分及
氨基酸组分，在simca-p 13.0r软件中运用pls-da、opls-da分析建立安吉白茶的判别模型：
[0015]
y＝-1.591*ga2+7.501*gcg+0.713*asp，当y《0时，该茶叶为原产地安吉白茶，当y》0时，该茶叶为非原产地安吉白茶。
[0016]
进一步地，非安吉白茶选自浙江南部的松阳县、贵州正安县及湖北咸丰县三个非安吉白茶原产地，且白叶1号茶树品种种植面积至少在5万亩以上。
[0017]
进一步地，儿茶素组分、组分检测方法为：分别取茶样置于离心管中，加甲醇溶液后于70℃水浴浸提20min，每隔5min摇动一次，冷却至室温，转入离心机在3500r/min转速下离心10min；吸取提取液至5ml刻度管内，加2ml稳定液混匀，过0.22μm有机微孔滤膜，取续滤液到进样瓶中，上机待测，每个样品进样量10μl，运行45min。
[0018]
进一步地，氨基酸组分检测方法为：分别取茶样置于10ml离心管中加超纯水，100℃水浴浸提后冷却至室温，转入离心机在3500r/min转速下离心，使用waters accq.tag化学试剂包进行柱前衍生，室温下放置1min后转移至进样瓶中，上机待测，每个样品进样量为0.6μl，运行10min。
[0019]
本发明通过三个关键性品质成分指标，并建立了产地鉴别模型来鉴别安吉白茶的产地真伪，该方法可在绿环保无污染的情况下实现安吉白茶的产地来源快速、有效鉴别，其正判率达95％以上，且分析结果为量化数值，排除了人为干扰因素，在目前日益重视的茶叶原产地保护、国家地理标志产品领域有着广阔的应用前景。
附图说明
[0020]
图1为偏最小二乘判别分析(plsda)的数据模型二维图；
[0021]
图2为正交偏最小二乘判别分析(oplsda)的数据模型二维图；
[0022]
图3为pls-da模型的排列检验图。
具体实施方式
[0023]
以下结合具体实施例对本发明做进一步详细描述，以便更好地理解本技术方案。
[0024]
实施例
[0025]
一、样品采集区域选择
[0026]
为了能以较为简便且有效区分安吉白茶与非安吉产白叶茶，本方法除了选择安吉白茶原产地安吉县开展代表性样品采集外，还选择了浙江南部的松阳县、贵州正安县及湖北咸丰县三个非安吉白茶原产地但白叶1号茶树品种种植面积至少在5万亩以上的白叶茶主产区开展代表性采样。样品连续采集两年，其中安吉每年采集45份典型安吉白茶样品，松阳县与贵州正安县每年均各采集30份典型白叶茶样品，湖北咸丰县每年采集54份典型白叶茶样品。
[0027]
二、样品检测方法
[0028]
儿茶素类、检测：
[0029]
分别取茶样0.1000g置于10ml离心管中，准确加70％甲醇溶液5ml，70℃水浴浸提20min(每隔5min摇动一次)，冷却至室温，转入离心机在3500r/min转速下离心10min。吸取0.2ml提取液至5ml刻度管内，加2ml稳定液混匀，过0.22μm有机微孔滤膜，取续滤液到进样瓶中，上机待测。每个样品进样量10μl，运行45min。
[0030]
氨基酸组分检测：
[0031]
分别取茶样0.1g置于10ml离心管中，准确加超纯水5ml，100℃水浴浸提30min(每隔10min摇动一次)，冷却至室温，转入离心机在3500r/min转速下离心10min。使用waters accq.tag化学试剂包进行柱前衍生，室温下放置1min后转移至进样瓶中，上机待测。每个样品进样量为0.6μl，运行10min。
[0032]
三、数据处理
[0033]
四个产地的气象数据均从https://power.larc.nasa.gov上获取后进行分析。所有的统计分析均采用spss软件进行。plsda、opls-da分析在simca-p 13.0软件中进行。
[0034]
四、试验结果
[0035]
通过对四个产区白叶茶中9种儿茶素组分及21种氨基酸组分的含量分析发现，安吉白茶中的2种儿茶素组分及1种氨基酸组分与其他三个产区白叶茶间存在着显著性差异水平(表1)。
[0036]
表1.安吉白茶与非原产地白叶茶间显著性差异的儿茶素组分、氨基酸组分
[0037][0038][0039]
将安吉县原产地生产的安吉白茶设为安吉白茶组，将其他非安吉产白叶茶原产地设为非安吉白茶组，由此，我们通过wilks’lambda方法得出安吉白茶与非安吉产白叶茶的产地判别方程：y＝-1.591*ga2+7.501*gcg+0.713*asp，当y《0时，该茶叶为原产地安吉白茶，当y》0时，该茶叶为非原产地白叶茶。通过spss软件进行模型验证，发现该模型的回代检验准确率：95.6％；交叉检验准确率：95.6％；外部验证准确率：100％，表明该模型准确可靠(表2)。
[0040]
表2.判别方程的产地检验结果
[0041][0042]
验证例
[0043]
为进一步验证该模型的准确性及可靠性，我们又用simca 13.0软件进行了偏最小二乘判别分析(plsda)的数据模型验证(图1，图2、图3)，进一步表明该模型是可靠准确的。
其中，图1为偏最小二乘判别分析(plsda)的数据模型二维图；图2为正交偏最小二乘判别分析(oplsda)的数据模型二维图；图3为pls-da模型的排列检验图。
[0044]
pls-da可以实现多因变量与多自变量的回归建模，为保证实验数据的有效性，本技术对建立的各pls-da模型是否过拟合进行了验证。模型的r2x、r2y、q2参数用来检验本次模型是否过拟合，r2x和r2y分别表示多元统计分析建模时模型对x、y变量的解释度，参数越接近1表示所建模型可靠性越高，q2表征模型的预测率，一般r2y和q2的值都大于0.5说明组间差异显著。本模型比较理想，具有很好的解释率和预测率，具有统计学意义。由图3可知，r2与q2最右侧的点均明显高于其他点，且r2趋势不仅高于q2且能很好地分开，表明本次模型验证参数的解释及预测能力强，模型验证成立。

技术特征：

1.一种鉴别地理标志农产品安吉白茶的方法，其特征在于，包括以下步骤：1)采集典型安吉白茶和非安吉白茶作为代表性样品；2)采用hplc法分析安吉白茶和非安吉产白叶茶茶样中儿茶素组分、组分及氨基酸组分，在simca-p 13.0r软件中运用pls-da、opls-da分析建立安吉白茶的判别模型：y＝-1.591*ga2+7.501*gcg+0.713*asp，当y<0时，该茶叶为原产地安吉白茶，当y>0时，该茶叶为非原产地白叶茶。2.如权利要求1所述的一种鉴别地理标志农产品安吉白茶的方法，其特征在于非安吉白茶选自“白叶1号”茶树品种种植面积至少在5万亩以上的浙江南部的松阳县、贵州正安县及湖北咸丰县三个非安吉白茶原产地。3.如权利要求1所述的一种鉴别地理标志农产品安吉白茶的方法，其特征在于儿茶素组分、组分检测方法为：分别取茶样置于离心管中，加甲醇溶液后于70℃水浴浸提20min，每隔5min摇动一次，冷却至室温，转入离心机在3500r/min转速下离心10min；吸取提取液至5ml刻度管内，加2ml稳定液混匀，过0.22μm有机微孔滤膜，取续滤液到进样瓶中，上机待测，每个样品进样量10μl，运行45min。4.如权利要求1所述的一种鉴别地理标志农产品安吉白茶的方法，其特征在于氨基酸组分检测方法为：分别取茶样置于10ml离心管中加超纯水，100℃水浴浸提后冷却至室温，转入离心机在3500r/min转速下离心，使用waters accq.tag化学试剂包进行柱前衍生，室温下放置1min后转移至进样瓶中，上机待测，每个样品进样量为0.6μl，运行10min。

技术总结

本发明公开了一种鉴别地理标志农产品安吉白茶的方法，包括以下步骤：1）采集安吉白茶和非安吉产白叶茶作为代表性样品；2）采用HPLC法分析安吉白茶和非安吉产白叶茶样品中儿茶素组分、组分及氨基酸组分，运用PLS-DA、OPLS-DA建立安吉白茶的判别模型：Y=-1.591*GA2+7.501*GCG+0.713*Asp，当Y<0时，该茶叶为原产地安吉白茶，当Y>0时，为非原产地白叶茶。采用本发明方法可在绿环保无污染的情况下实现安吉白茶的产地来源快速、有效鉴别，其正判率达95%以上，且分析结果为量化数值，排除了人为干扰因素，在目前日益重视的茶叶原产地保护、国家地理标志产品领域有着广阔的应用前景。景。景。