肽酰胺类化合物、其药学上可接受的盐、立体异构体及其应用的制作方法

1.本发明涉及药物化学技术领域，特别涉及肽酰胺类化合物、其药学上可接受的盐、立体异构体及其应用。

背景技术：

2.阿片受体主要可以分为经典受体μ、δ、к和非经典痛敏肽(nop)受体四种，μ、δ、к受体都有不同亚型，其中к阿片受体激动剂显示有镇痛作用外，还具有呼吸抑制弱，成瘾性较低的优点。此外，к阿片受体激动剂还具有抗炎活性，还可以应用于预防和心血管疾病，尿毒症等肾病引起的瘙痒，肠易激综合征，肠梗阻等胃肠疾病，开发选择性к阿片受体激动剂具有较好的应用前景。к阿片受体有多个亚型。除了经典的к1外，还存在к2和к3亚型，人脑和胎盘组织中有分布。к阿片受体参与镇痛，且与神经内分泌及免疫调节有关。内阿片肽能神经元
→
释放内阿片肽(脑啡肽)
→
激动阿片受体
→
通过g蛋白偶联机制
→
抑制ac
→
ca内流
↓
、к外流
↑→
前膜递质(p物质等)释放
↓→
突触后膜超极化
→
阻止痛觉冲动的传导、传递
→
镇痛。
3.在灵长类，阿片类药物有3种受体：μ(mor)、к(kor)、δ(dor)。阿片类药物(、、可待因)可以引发痒的发生。全身应用μ受体激动剂诱发挠抓动作，但是к受体激动剂和δ受体激动剂却抑制挠抓。这种现象不由组胺介导。与此相反，к受体激动剂与μ受体拮抗剂类似，可以通过预防或拮抗来抑制类阿片诱发的痒。这些激动剂开发应用的目的包括：和酒精依赖，对抗麻醉后抑郁、麻醉药过量和阿片类药物解毒。
4.生理性类阿片物质(脑啡汰、内啡肽、强啡肽)参与痒的病理生理机制，特别是特应性皮炎(ad)、尿毒症瘙痒和肝性瘙痒。主要的肽类物质是β内啡肽(mor激动剂)、强啡肽a(kor激动剂)。它们在中枢、脊髓和周围水平发挥作用。非组织胺依赖性阿片类物质依赖性瘙痒似乎产生于表皮无髓鞘c纤维。行为学实验解释kor和mor基因敲除型小鼠在皮肤干燥性皮炎模型中的搔抓行稳野生型显著减少。这些结果揭示：mor和kor对皮肤内稳态、表皮神经纤维调节和瘙痒病理生理非常重要。在ad患者中，只有к受体系统的下调，而不含μ受体系统。进一步研究发现，经补骨脂素和紫外线的患者其к受体系统有所恢复，同时伴有瘙痒视觉模拟评分的下降。这些结果提示，表皮内阿片类物质与ad患者的瘙痒调控密切相关。因此，急需研发一系列к阿片样受体激动剂，以有利于上述疾病的。

技术实现要素：

5.基于此，有必要提供一种具有к阿片样受体激动活性的肽酰胺类化合物、其药学上可接受的盐、立体异构体及其应用。
6.式(ii)所示结构的化合物、其药学上可接受的盐、或其立体异构体：
[0007][0008]
x1和x2中，有一个为ch2，一个为nr，其中，r为
[0009]
a为
[0010]
r1和r2各自独立地为：h、c
1-6
烷基、-(ch2)
n1-o-[(ch2)
n2-o]
n3-ra或-(ch2)
n4-nrbrc；
[0011]
n1、n2、n3、n4各自独立地为1、2、3、4或5；
[0012]
y1为单键、cr
11r12
、o、s、-(cr
11
＝cr
12
)-或nh-；
[0013]r11
和r
12
各自独立地选自：h、c
1-4
烷基、苯基、5-6元杂芳基或卤素；所述c
1-4
烷基、苯基、5-6元杂芳基任选进一步被以下基团取代；卤素、氰基、羟基、苯基、-nrbrc、-cord、-coord或-conrbrc；
[0014]
b选自：3-10元环烷基、3-10元杂环基、5-10元芳基或5-10元杂芳基；
[0015]
r0为b上取代基，m1为0、1、2、3、4、5或6；
[0016]
r0每次出现时，各组独立地选自：c
1-4
烷基、c
1-4
烷氧基、卤素、氰基、羟基、苯基、5-6元杂芳基、＝o、-nrbrc、-cord、-coord、-conrbrc或-nhcord；所述c
1-4
烷基、c
1-4
烷氧基、苯基、5-6元杂芳基任选进一步被以下取代基取代：卤素、氰基、羟基或苯基；
[0017]
ra为c
1-4
烷基；
[0018]
rb、rc各自独立地选自：h、c
1-4
烷基或c
1-4
烷氧基；
[0019]
rd选自：h或c
1-4
烷基。
[0020]
本发明提供了一种药物组合物，所述的药物组合物包含上述所示的化合物，或其立体异构体、药学上可接受的盐，以及一种或多种药学上可接受的载体和/或赋形剂。
[0021]
本发明提供了上述化合物或其立体异构体、药学上可接受的盐，或者上述药物组合物用于制造或预防哺乳动物的к阿片样物质受体相关的疾病或病况的药物的应用。
具体实施方式
[0022]
为了便于理解本发明，下面将对本发明进行更全面的描述，并给出了本发明的较佳实施例。但是，本发明可以以许多不同的形式来实现，并不限于本文所描述的实施例。相反地，提供这些实施例的目的是使对本发明的公开内容的理解更加透彻全面。
[0023]
除非另有定义，本文所使用的所有的技术和科学术语与属于本发明的技术领域的技术人员通常理解的含义相同。本文中在本发明的说明书中所使用的术语只是为了描述具
体的实施例的目的，不是旨在于限制本发明。本文所使用的术语“和/或”包括一个或多个相关的所列项目的任意的和所有的组合。
[0024]
术语解释
[0025]
除非另外说明或存在矛盾之处，本文中使用的术语或短语具有以下含义：
[0026]
本发明中，“任选进一步取代”表述可以被取代，也可以不被取代，例如：c
1-6
烷基任选进一步被r0取代，表示c
1-6
烷基可以被r0取代，也可以不被r0取代。
[0027]
本发明中，当未指出取代基数目时，表示任选可取代数目的取代基取代，例如卤素取代甲基，表示甲基上可以被1、2或3个卤素取代；当被选择取代基为取代基组时，表示可以从所述取代基组中选择任选数目的取代基取代，例如，r0取代苯基，r0选自：卤素、羟基、氰基或nh2，表示苯基上可以仅被一个基团(如卤素)取代，也可以同时被多个基团(如卤素、氨基)取代，取代位点无特别限定，仅需组成能够稳定存在的基团即可。
[0028]
本发明中，当未指明取代位点时，表示任选可取代位点被取代。
[0029]
术语“烷基”是指包含伯(正)碳原子、或仲碳原子、或叔碳原子、或季碳原子、或其组合的饱和烃。包含该术语的短语，例如，“c1～c6烷基”是指包含1～6个碳原子的烷基，每次出现时，可以互相独立地为c1烷基、c2烷基、c3烷基、c4烷基、c5烷基、c6烷基。进一步地，优选为c
1-4
烷基；更优选为c
1-3
烷基。烷基合适的实例包括但不限于：甲基(me、-ch3)、乙基(et、-ch2ch3)、1-丙基(n-pr、n-丙基、-ch2ch2ch3)、2-丙基(i-pr、i-丙基、-ch(ch3)2)、1-丁基(n-bu、n-丁基、-ch2ch2ch2ch3)、2-甲基-1-丙基(i-bu、i-丁基、-ch2ch(ch3)2)、2-丁基(s-bu、s-丁基、-ch(ch3)ch2ch3)、2-甲基-2-丙基(t-bu、t-丁基、-c(ch3)3)、1-戊基(n-戊基、-ch2ch2ch2ch2ch3)、2-戊基(-ch(ch3)ch2ch2ch3)、3-戊基(-ch(ch2ch3)2)、2-甲基-2-丁基(-c(ch3)2ch2ch3)、3-甲基-2-丁基(-ch(ch3)ch(ch3)2)、3-甲基-1-丁基(-ch2ch2ch(ch3)2)、2-甲基-1-丁基(-ch2ch(ch3)ch2ch3)、1-己基(-ch2ch2ch2ch2ch2ch3)、2-己基(-ch(ch3)ch2ch2ch2ch3)、3-己基(-ch(ch2ch3)(ch2ch2ch3))、2-甲基-2-戊基(-c(ch3)2ch2ch2ch3)、3-甲基-2-戊基(-ch(ch3)ch(ch3)ch2ch3)、4-甲基-2-戊基(-ch(ch3)ch2ch(ch3)2)、3-甲基-3-戊基(-c(ch3)(ch2ch3)2)、2-甲基-3-戊基(-ch(ch2ch3)ch(ch3)2)、2,3-二甲基-2-丁基(-c(ch3)2ch(ch3)2)、3,3-二甲基-2-丁基(-ch(ch3)c(ch3)3和辛基(-(ch2)7ch3)。
[0030]
术语“环烷基”是指包含环碳原子的非芳香族烃，可以为单环烷基、双环环烷基、螺环烷基、或桥环烷基。包含该术语的短语，例如，“3-10元环烷基”是指包含3～10个碳原子的环烷基；更优选为3-8元环烷基，更优选为3、4、5、6、7或8元环烷基。环烷基合适的实例包括但不限于：环丙基、环丁基、环戊基、环己基和环庚基。另外，“环烷基”还可含有一个或多个双键(即饱和或部分不饱和环烷基)，含有双键的环烷基的代表性实例包括环戊烯基、环己烯基、环己二烯基和环丁二烯基，在一些实施例中，环烷基包括：3-8元单环烷基、5-6元环烷基并5-6元环烷基、5-6元环烷基并苯基。
[0031]
术语“烷氧基”是指具有-o-烷基的基团，即如上所定义的烷基经由氧原子连接至母核结构。包含该术语的短语，例如，“c
1-6
烷氧基”是指烷基部分包含1～6个碳原子，每次出现时，可以互相独立地为c1烷氧基、c4烷氧基、c5烷氧基、c6烷氧基。烷氧基合适的实例包括但不限于：甲氧基(-o-ch3或-ome)、乙氧基(-o-ch2ch3或-oet)和叔丁氧基(-o-c(ch3)3或-otbu)。
[0032]“烯基”是指包含具有至少一个不饱和部位，即碳-碳sp2双键的正碳原子、仲碳原
子、叔碳原子或环碳原子的烃。包含该术语的短语，例如，“c
2～4
基”是指包含2～4个碳原子的烯基，每次出现时，可以互相独立地为c2烯基、c3烯基、c4烯基。合适的实例包括但不限于：乙烯基(-ch＝ch2)、烯丙基(-ch2ch＝ch2)、环戊烯基(-c5h7)和5-己烯基(-ch2ch2ch2ch2ch＝ch2)。
[0033]“芳基”是指在芳香环化合物的基础上除去一个氢原子衍生的芳族烃基，可以为单环芳基、或稠环芳基、或多环芳基，对于多环的环种，至少一个是芳族环系。例如，“c5～c
10
芳基”是指包含5～10个碳原子的芳基，每次出现时，可以互相独立地为c5芳基、c6芳基、c
10
芳基。合适的实例包括但不限于：苯、萘。
[0034]“杂芳基”是指在芳基的基础上至少一个碳原子被非碳原子所替代，非碳原子可以为n原子、o原子、s原子等。例如，“c5～c
10
杂芳基”是指包含5～10个碳原子的杂芳基，每次出现时，可以互相独立地为c5杂芳基、c6杂芳基、c7杂芳基或c8杂芳基。合适的实例包括但不限于：呋喃、苯并呋喃、噻吩、苯并噻吩、吡咯、吡唑、三唑(例如1,2,3-三唑、1,2,4-三唑、1,2,5-三唑、1,3,4-三唑)、咪唑、噁唑、噁二唑(例如1,2,3-噁二唑、1,2,4-噁二唑、1,2,5-噁二唑、1,3,4-噁二唑)、噻唑、四唑、吲哚、咔唑、吡咯并咪唑、吡咯并吡咯、噻吩并吡咯、噻吩并噻吩、呋喃并吡咯、呋喃并呋喃、噻吩并呋喃、苯并异噁唑、苯并异噻唑、苯并咪唑、吡啶、吡嗪、哒嗪、嘧啶、三嗪、喹啉、异喹啉、邻二氮萘、喹喔啉、菲啶、伯啶、喹唑啉和喹唑啉酮。可理解的，本发明中，杂芳基包括单环杂芳基、双环杂芳基(即稠合双环杂芳基)，形成稠合双环杂芳基的基团优选为5或6元单环杂芳基，包括但不限于：
[0035][0036]
其中代表的所连接的两个碳原子为与其他环稠合时共享的毗邻碳原子对。
[0037]“杂环基”是指在环烷基的基础上至少一个碳原子被非碳原子所替代，非碳原子可以为n原子、o原子、s原子等，可以为饱和环或部分不饱和环。杂环烷基环上可以含有酮基，例如：吡咯烷酮基、酮基，也可以不含有。包含该术语的短语，例如，“3-10元饱和或部分不饱和”是指包含4～9个碳原子的杂环基，每次出现时，可以互相独立地为c4杂烷基、c6杂烷基、c7杂烷基、c8杂烷基或c9杂烷基。合适的实例包括但不限于：氮丙环基、环氧乙烷基、氮杂环丁烷基、氧杂环丁烷基、恶唑烷基、1,3-二氧戊环基、二氧六环基、咪唑烷基、四氢呋喃基、四氢噻吩基、四氢吡咯基、基、哌嗪基、吗啉基、硫代吗啉基、硫代吗啉-1,1-二氧化物基、四氢吡喃基、1,3-恶嗪烷基、六氢嘧啶基、1,4-二恶烷基、1,4-氧氮杂环庚烷基、1,3-氧氮杂环庚烷基、1,2-二氢氮杂环丁二烯基、2,5-二氢-1h-吡咯基、2,3-二氢-1h-吡咯基、1,2,3,4-四氢吡啶基、1,2,3,6-四氢吡啶基、2-吡咯烷酮基或2-酮基、四氢异喹啉基、二氢吲哚基。
[0038]
本发明中“杂环基”包括但不限于单环的杂环基、双环的杂环基。在一些实施例中，单环的杂环基包括5-6元单杂环基；在一些实施例中，双环的杂环基包括5-6元杂环基并5-6元杂环基，5-6元环烷基并5-6元杂环基，5-6元杂环基并苯基，5-6元杂环基并5-6元杂芳基；
[0039]
其中，5-6元环烷基并5-6元杂环基包括但不限于：
[0040][0041]
5-6元杂环基并5-6元杂环基包括但不限于：
[0042][0043]
所述5-6元杂环基并苯基包括但不限于：
[0044][0045]“氨基”是指氨的衍生物，具有式-n(x)2的结构特征，其中每个“x”独立地是h、取代的或未被取代的烷基、取代的或未被取代的环烷基、取代的或未被取代的杂环基等。氨基的非限制性类型包括-nh2、-n(烷基)2、-nh(烷基)、-n(环烷基)2、-nh(环烷基)、-n(杂环基)2、-nh(杂环基)、-n(芳基)2、-nh(芳基)、-n(烷基)(芳基)、-n(烷基)(杂环基)、-n(环烷基)(杂环基)、-n(芳基)(杂芳基)、-n(烷基)(杂芳基)等。
[0046]“卤素”或“卤基”是指f、cl、br或i。
[0047]
详细解释
[0048]
本发明一实施方式提供了式(ii)所示结构的化合物或其药学上可接受的盐：
[0049][0050]
x1和x2中，有一个为ch2，一个为nr，其中，r为
6元杂环基并5-6元杂环基、5-6元环烷基并5-6元杂环基、5-6元杂环基并苯基、5-6元杂环基并5-6元杂芳基、6-10元芳基、或5-10元杂芳基。
[0072]
在一些实施例中，b选自以下任一基团：
[0073][0074]
在一些实施例中，r0每次出现时，各组独立地选自：c
1-4
烷基、卤素、-ocf3、-nh2、-coord或-conrbrc。
[0075]
在一些实施例中，上述化合物选自以下任一通式所示化合物：
[0076][0077]
b1选自：3-8元单环烷基、5-6元环烷基并苯基、5-6元单杂环基、5-6元杂环基并5-6元杂环基、5-6元环烷基并5-6元杂环基、5-6元杂环基并苯基、6-10元芳基、或5-10元杂芳
基；
[0078]
b2选自：6-10元芳基或5-10元杂芳基；
[0079]
b3选自：6-10元芳基或5-10元杂芳基；
[0080]
b4选自：6-10元芳基或5-10元杂芳基。
[0081]
在一些实施例中，b3选自：苯基或5-6元杂芳基。在一些实施例中，b4选自：苯基或5-6元杂芳基。
[0082]
在一些实施例中，3-8元单环烷基选自：环丙基、环丁基、环戊基、环戊烯基、环己基、环己烯基、环己二烯基、环庚基、环庚三烯基、或环辛基。
[0083]
在一些实施例中，5-6元单杂环基选自：氮丙环基、环氧乙烷基、氮杂环丁烷基、氧杂环丁烷基、恶唑烷基、1,3-二氧戊环基、二氧六环基、咪唑烷基、四氢呋喃基、四氢噻吩基、四氢吡咯基、基、哌嗪基、吗啉基、硫代吗啉基、硫代吗啉-1,1-二氧化物基、四氢吡喃基、1,3-恶嗪烷基、六氢嘧啶基、1,4-二恶烷基、1,4-氧氮杂环庚烷基、1,3-氧氮杂环庚烷基、1,2-二氢氮杂环丁二烯基、2,5-二氢-1h-吡咯基、2,3-二氢-1h-吡咯基、1,2,3,4-四氢吡啶基、1,2,3,6-四氢吡啶基、2-吡咯烷酮基或2-酮基；
[0084]
在一些实施例中，5-6元杂环基并5-6元杂环基选自以下任一基团：
[0085][0086]
在一些实施例中，5-6元环烷基并5-6元杂环基选自以下任一基团：
[0087][0088]
在一些实施例中，5-6元环烷基并苯基选自：环戊基并苯基、或环己基并苯基；
[0089]
在一些实施例中，5-6元杂环基并苯基选自以下任一基团：
[0090][0091]
在一些实施例中，6-10元芳基选自：苯或萘；
[0092]
在一些实施例中，5-10元杂芳基选自：噻吩、呋喃、噻唑、异噻唑、咪唑、噁唑、吡咯、吡唑、三唑、1,2,3-三唑、1,2,4-三唑、1,2,5-三唑、1,3,4-三唑、四唑、异噁唑、噁二唑、1,2,3-噁二唑、1,2,4-噁二唑、1,2,5-噁二唑、1,3,4-噁二唑、噻二唑、吡啶、哒嗪、嘧啶、吡嗪或以下任一基团：
[0093][0094]
在一些实施例中，选自以下任一基团：
[0095][0096]
z为nh、o、s、crhrj或c＝o；w为crh或n；v为crh或n；且相邻的两个z不同时为杂原子；
[0097]
rh和rj各自独立地选自：h、c
1-4
烷基、c
1-4
烷氧基、卤素、氰基、羟基、苯基、5-6元杂芳基、-nrbrc、-cord、-coord、-conrbrc或-nhcord；所述c
1-4
烷基、c
1-4
烷氧基、苯基、5-6元杂芳基任选进一步被以下取代基取代：卤素、氰基、羟基、苯基、-nrbrc或-coord。
[0098]
在一些实施例中，(a-1)中，z均为-crhrj；在一些实施例中，(a-1)中有一个z为-nh，其余为-crhr
j0
；在一些实施例中，(a-1)中有一个z为-nh，一个为co，其余为-crhr
j0
；在一些实施例中，(a-2)中，z均为-crhrj；在一些实施例中，(a-2)中有一个z为-nh，其余为-crhrj；在一些实施例中，(a-2)中有一个z为-nh，一个为co，其余为-crhrj；在一些实施例中，(a-3)中，z均为-crhrj；在一些实施例中，(a-3)中有1、2或3个z为-nh，其余为-crhrj；在一些实施例中，(a-3)中，z均为-crhrj；在一些实施例中，(a-3)中有1个z为-nh，一个为co，其余为-crhrj；在一些实施例中，(a-4)中，z均为-crhrj；在一些实施例中，(a-4)中有1、2或3个z为-nh，其余为-crhrj；在一些实施例中，(a-4)中，有1个z为nh，一个z为co，其余为-crhrj。在一些实施例中，(a-5)中，z为-crhrj，w均为crh；在一些实施例中，(a-5)中，z为o，w均为crh；在一些实施例中，(a-5)中，z为nh，w均为crh；在一些实施例中，(a-6)中，w均crh；在一些实施例中，(a-6)中，有1、2或3个w为n，其余为crh；在一些实施例中，(a-7)中，z均为nh，w均为crh；在一些实施例中，(a-7)中，z均为o，w均为crh；在一些实施例中，(a-7)中，一个z为nh，一个z为o，w均为crh；在一些实施例中，(a-8)中，z均为nh，w均为crh；在一些实施例中，(a-8)中，z均
为o，w均为crh；在一些实施例中，(a-9)中，z均为-crhrj，w均为crh；在一些实施例中，(a-10)中，v均为crh，有一个z为n，一个z为o，其余z均为-crhrj；在一些实施例中，(a-10)中，v均为crh，有一个z为n，其余z均为-crhrj；在一些实施例中，(a-10)的五并五元环中为5元含氮杂环并环戊烷；在一些实施例中，(a-10)的五并五元环中为5元含氮杂环并5元含氮杂环；在一些实施例中，(a-10)的五并五元环中为5元含氮杂环并5元含氧杂环；在一些实施例中，(a-11)中，v均为crh，有一个z为n，其余z均为-crhrj；在一些实施例中，(a-11)得到五并六元环为5元含氮杂环并6元含氮杂环；在一些实施例中，(a-12)中，v均为crh，z均为-crhrj；在一些实施例中，(a-12)中，v均为crh，有1、2、3或4个z为n，其余z均为-crhrj；在一些实施例中，(a-12)的六并六元环为6元含氮杂环并环己烷；在一些实施例中，(a-12)的六并六元环为6元含氮杂环并6元含氮杂；在一些实施例中，(a-13)中，z均为-crhrj，w均为crh；在一些实施例中，(a-13)中，有1或2个z为nh，其余均为-crhrj，w均为crh；在一些实施例中，(a-13)中，有1或2个z为o，其余均为-crhrj，w均为crh；在一些实施例中，(a-14)中，z均为-crhrj，w均为crh；在一些实施例中，(a-14)中，有1或2个z为nh，其余均为-crhrj，w均为crh；在一些实施例中，(a-14)中，有1或2个z为o，其余均为-crhrj，w均为crh；在一些实施例中，(a-15)中，w均为crh；在一些实施例中，(a-15)中，有1、2或3个w为n，其余均为crh；在一些实施例中，(a-16)中，有1、2或3个w为n，其余均为crh。
[0099]
在一些实施例中，b选自以下任一结构：
[0100][0101]
上述基团任选进一步被r0取代；在一些实施例中，r0每次出现时，各组独立地选自：c
1-4
烷基、卤素、-ocf3、-nh2、-coord或-conrbrc。
[0102]
在一些实施例中，选自以下任一结构：
[0103][0104]
在一些实施例中，r0每次出现时，各自独立地选自：c
1-4
烷基、卤素、-ocf3、-nh2、-coord、-conrbrc或-nhcord。在一些实施例中，r0选自：f、cl、-nh2、-ocf3、-cooch3、-cooh或-nhcoch3。
[0105]
在一些实施例中，ra为甲基、乙基、1-丙基、2-丙基、1-丁基、2-甲基-1-丙基、2-丁基、或2-甲基-2-丙基；
[0106]
在一些实施例中，rb、rc各自独立地选自：h、甲基、乙基、1-丙基、2-丙基、1-丁基、2-甲基-1-丙基、2-丁基、2-甲基-2-丙基、甲氧基、乙氧基、1-丙氧基、2-丙氧基、1-丁氧基、2-甲基-1-丙氧基、2-丁氧基、或2-甲基-2-丙氧基。
[0107]
在一些实施例中，rd选自：h、甲基、乙基、1-丙基、2-丙基、1-丁基、2-甲基-1-丙基、2-丁基、或2-甲基-2-丙基。
[0108]
在一些实施例中，选自以下任一化合物：
[0109]
[0110]
[0111]
[0112][0113]
本发明另一实施方式提供了上述化合物或其药学上可接受的盐在制备或预防к阿片样受体相关的疾病的药物中的应用。
[0114]
本发明提供了一种药物组合物，所述的药物组合物包含上述所示的化合物，或其立体异构体、药学上可接受的盐，以及一种或多种药学上可接受的载体和/或赋形剂。
[0115]
另一方面，本发明提供了上述化合物或其立体异构体、药学上可接受的盐，或者上述药物组合物用于制造或预防哺乳动物的κ阿片样物质受体相关的疾病或病况的药物的应用。
[0116]
优选的，其中上述κ阿片样物质受体相关的疾病选自疼痛、炎症、瘙痒、水肿、低钠血症、低钾血症、肠梗阻、咳嗽和青光眼。
[0117]
进一步，优选的疼痛选自神经性疼痛、躯干痛、内脏痛、皮肤痛、关节炎疼痛、肾结石疼痛、子宫痉挛、痛经、子宫内膜异位症、消化不良、外科手术后疼痛、医疗处理后疼痛、眼部疼痛、耳炎疼痛、爆发性癌症疼痛和gi紊乱相关的疼痛。
[0118]
本发明涉及的κ阿片样物质受体(kor受体)相关的瘙痒可以是任何瘙痒疾病和病况，例如眼部瘙痒、与末期肾病有关的瘙痒(其中许多患者接受肾透析)和其他形式的胆汁淤积，皮肤病况，虫咬瘙痒和药物引起的瘙痒。
[0119]
其中，眼部瘙痒如结膜炎相关的眼部瘙痒；其他形式的胆汁淤积包括原发胆汁性肝硬化、妊娠肝内胆汁淤积症、慢性胆固醇肝病、尿毒症、恶性胆汁淤积、黄疸；皮肤病况如湿疹(皮炎)、皮肤癣、红细胞增多症、扁平苔藓、慢性单纯苔藓、虱病、甲状腺毒症、足癣、荨麻疹、疥疮、阴道炎、痔疮相关的肛门瘙痒；其中，湿疹(皮炎)包括特应性皮炎或接触性皮炎。
[0120]
本发明提供了一种к阿片样物质受体相关的疾病或病况的方法，包括以下步骤：向待施加对象实施上述化合物，或其立体异构体、药学上可接受的盐、或药物组合物。
[0121]
下面列举具体实施例来对本发明进行说明。
[0122]
中间体1-1的合成
leu-oh(0.71g,2mmol)，hatu(0.76g,2mmol),diea(0.26g,2mmol),氮气鼓动1h,抽干反应液，dmf(5ml
×
3)洗涤3次，抽干，直接用于下一步；向多肽合成管中加入5ml/dmf(v:v＝1:4),氮气鼓动30min,抽干液体，dmf(5ml
×
3)洗涤3次，抽干，直接用于下一步；向多肽合成管中加入5ml dmf,氮气鼓动，加入fmoc-d-phe-oh(0.77g,2mmol)，hatu(0.76g,2mmol),diea(0.26g,2mmol),氮气鼓动1h,抽干反应液，dmf(5ml
×
3)洗涤3次，抽干，直接用于下一步；向多肽合成管中加入5ml/dmf(v:v＝1:4),氮气鼓动30min,抽干液体，dmf(5ml
×
3)洗涤3次，抽干，直接用于下一步；向多肽合成管中加入5mldmf,氮气鼓动，加入(r)-2-((叔丁氧羰基)(2-苯基丙基)氨基)乙酸(0.58g,2mmol)，hatu(0.76g,2mmol),diea(0.26g,2mmol),氮气鼓动1h,抽干反应液，dmf(5ml
×
3)洗涤3次，抽干，加入meoh(5ml
×
3)洗涤3次，抽干，加入dcm(5ml
×
3)洗涤3次，抽干直接用于下一步；向多肽合成管中加入5ml六氟异丙醇/dcm(v:v＝1:4),氮气鼓动30min,抽干液体，重复3次，所得液体合并，旋干，得1-2为白固体(0.61g,产率：78.0％)，[m+h]
+
:782.4。
[0128]
实施例1：(r)-n-((r)-6-氨基-1-(2-(2-(3，4-二氯苯基)乙酰基)-2，7-二氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)-1-氧代己-2-基)-2-((r)-2-((r)-2-氨基-3-苯基丙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)-4-甲基戊酰胺(176)的合成
[0129][0130]
(1)2-(2-(3，4-二氯苯基)乙酰基)-2，7-二氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁酯(176-2)的合成
[0131]
将176-1(188.6mg,0.92mmol),1(250mg,1.105mmol),hobt(149mg,1.105mmol),edc
·
hcl(264.7mg,1.38mmol)用5ml二氯甲烷溶解，室温搅拌5分钟后，加入三乙胺(93mg,0.92mmol)，室温搅拌反应过夜。加饱和碳酸氢钠水溶液(5ml)淬灭反应，分出有机相，水相用二氯甲烷(5ml
×
3)提取，合并有机相，用1n稀盐酸(5ml)洗后，浓缩，得粗品176-2(312mg，产率：81.9％)，esi-ms(m/z)：413.1[m+h]
+
。
[0132]
(2)2-(3，4-二氯苯基)-1-(2，7-二氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)乙酮盐酸盐(176-3)的
合成
[0133]
将上述粗品176-2(312mg，0.76mmol)用5ml乙酸乙酯溶解后，加入2.5ml盐酸二氧六环溶液，室温搅拌反应2小时，过滤，得白固体176-3(221mg，产率：83.5％)，esi-ms(m/z)：313.1[m+h]
+
。
[0134]
(3)(r)-n-((r)-6-叔丁氧基羰基氨基-1-(2-(2-(3，4-二氯苯基)乙酰基)-2，7-二氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)-1-氧代己-2-基)-2-((r)-2-((r)-2-叔丁氧基羰基氨基-3-苯丙酰氨基)-3-苯丙酰氨基)-4-甲基戊酰胺(176-4)的合成
[0135]
将1-1(300mg,0.398mmol),hatu(90.8mg,0.239mmol)用thf(5ml)溶解后，加入diea(102.8mg,0.797mmol)，室温搅拌反应0.5小时后，加入176-3(83.4mg.0.239mmol)，室温搅拌反应过夜。加入饱和碳酸氢钠水溶液(5ml)淬灭反应，分出有机相，水相用v
dcm
：v
meoh
＝10:1(5ml
×
3)萃取，合并有机相，用1n稀盐酸(5ml)洗后，浓缩，柱层析(v
dcm
:v
meoh
＝20:1)，得产物176-4(211mg，产率：50.6％)，esi-ms(m/z)：1048.5[m+h]
+
。
[0136]
(4)(r)-n-((r)-6-氨基-1-(2-(2-(3，4-二氯苯基)乙酰基)-2，7-二氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)-1-氧代己-2-基)-2-((r)-2-((r)-2-氨基-3-苯基丙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)-4-甲基戊酰胺(176)的合成
[0137]
将上述产物176-4(211mg,0.20mmol)用5ml乙酸乙酯溶解后，加入2.5ml盐酸二氧六环溶液，室温搅拌反应2小时，抽滤，得褐固体176(121mg，产率：65.3％)，esi-ms(m/z)：848.4[m+h]
+
。
[0138]1hnmr(400mhz,cd3od),δ7.48-7.21(m,13h),4.91-4.87(m,1h),4.75-4.72(m,1h),4.44-4.38(m,1h),4.15-4.11(m,1h),3.79-3.75(m,3h),3.56-3.51(m,4h),3.26-3.23(m,2h),2.99-2.81(m,7h),1.89-1.4(m,13h),0.99(dd,6h)。
[0139]
实施例2：(r)-n-((r)-6-氨基-1-(2-(苯并呋喃-5-羰基)-2，7-二氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)-1-氧代己-2-基)-2-((r)-2-((r)-2-氨基-3-苯基丙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)-4-甲基戊酰胺(167)的合成
[0140][0141]
(1)2-(苯并呋喃-6-羰基)-2，7-二氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁酯(167-2)的合
成
[0142]
将167-1(149mg,0.92mmol),1(250mg,1.105mmol),hobt(149mg,1.105mmol),edc
·
hcl(264.7mg,1.38mmol)用5ml二氯甲烷溶解，室温搅拌5分钟后，加入三乙胺(93mg,0.92mmol)，室温搅拌反应过夜。加饱和碳酸氢钠水溶液(5ml)淬灭反应，分出有机相，水相用二氯甲烷(5ml
×
3)提取，合并有机相，用1n稀盐酸(5ml)洗后，浓缩，得粗品167-2(317mg，产率：93.2％)，esi-ms(m/z)：371[m+h]
+
。
[0143]
(2)苯并呋喃-6-基(2，7-二氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)甲酮盐酸盐(167-3)的合成
[0144]
将上述粗品167-2(317mg,0.86mmol)用5ml乙酸乙酯溶解后，加入2.5ml盐酸二氧六环溶液，室温搅拌反应2小时，过滤，得白固体167-3(241mg，产率：83.6％)，esi-ms(m/z)：271[m+h]
+
。
[0145]
(3)(r)-n-((r)-6-叔丁氧基羰基氨基-1-(2-(苯并呋喃-5-羰基)-2，7-二氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)-1-氧代己-2-基)-2-((r)-2-((r)-2-叔丁氧基羰基氨基-3-苯基丙酰氨基)-3-苯基丙酰氨基)-4-甲基戊酰胺(167-4)的合成将1-1(300mg,0.398mmol),hatu(90.8mg,0.239mmol)用thf(5ml)溶解后，加入diea(102.8mg,0.797mmol)，室温搅拌反应0.5小时后，加入167-3(73mg,0.239mmol)，室温搅拌反应过夜。加入饱和碳酸氢钠水溶液(5ml)淬灭反应，分出有机相，水相用v
dcm
：v
meoh
＝10:1(5ml
×
3)萃取，合并有机相，用1n稀盐酸(5ml)洗后，浓缩，柱层析(v
dcm
:v
meoh
＝20:1)，得产物167-4(181mg，产率：45.2％)，esi-ms(m/z)：1006.5[m+h]
+
。
[0146]
(4)(r)-n-((r)-6-氨基-1-(2-(苯并呋喃-5-羰基)-2，7-二氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)-1-氧代己-2-基)-2-((r)-2-((r)-2-氨基-3-苯基丙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)-4-甲基戊酰胺(167)的合成
[0147]
将上述产物167-4(181mg,0.18mmol)用5ml乙酸乙酯溶解后，加入2.5ml盐酸二氧六环溶液，室温搅拌反应2小时，抽滤，得褐固体化合物167(101mg，产率：63.9％)，esi-ms(m/z)：806.5[m+h]
+
。
[0148]1hnmr(400mhz,cd3od),δ8.01-7.98(m,1h),7.89-7.86(m,1h),7.68-7.66(m,2h),7.42-7.21(m,10h),7.01-6.91(m,1h),4.91-4.87(m,1h),4.75-4.72(m,1h),4.44-4.38(m,1h),3.99-3.91(m,1h),3.81-3.62(m,4h),3.26-3.23(m,2h),2.99-2.81(m,8h),1.89-1.4(m,13h),0.99(dd,6h).
[0149]
实施例3：
[0150]
(r)-n-((r)-6-氨基-1-(2-(咪唑并[1，2-a]吡啶-2-羰基)-2，7-二氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)-1-氧代己-2-基)-2-((r)-2-((r)-2-氨基-3-苯基丙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)-4-甲基戊酰胺(168)的合成
[0151][0152]
(1)2-(咪唑并[1，2-a]吡啶-2-羰基)-2，7-二氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁酯(168-2)的合成
[0153]
将168-1(0.32g,1.95mmol)，hatu(0.80g,2.12mmol)和diea(0.38g,3.72mmol)用dmf(6ml)溶解后，反应液室温搅拌30分钟后，往反应液中加入1(0.40g,1.77mmol)后，反应液在室温搅拌过夜，tlc监测反应完成后，之后反应液加水稀释后，用dcm(10ml
×
3)萃取，合并有机相再用1n na2co3(10ml)和饱和食盐水(10ml)分别洗涤一遍，有机相干燥后，旋干得到粗品。粗品用柱层析纯化，洗脱剂极性v
dcm
:v
meoh
＝100：1到30：1得到棕固体168-2(0.61g,产率：93.1％)，esi-ms(m/z)：371.1[m+h]
+
。
[0154]
(2)咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基(2，7-二氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)甲酮盐酸盐(168-3)的合成
[0155]
将168-2(0.61g,1.65mmol)用乙酸乙酯(12ml)溶解后，往溶液中加入盐酸二氧六环溶液(4m，8ml)，之后反应液在室温搅拌6个小时。tlc监测原料大部分消耗完，停止反应，反应液直接旋干得到产品。目标化合物168-3为白固体(0.55g,产率：97.3％)，esi-ms(m/z)：271.0[m+h]
+
。
[0156]
(3)(r)-n-((r)-6-叔丁氧基羰基氨基-1-(2-(苯并呋喃-5-羰基)-2，7-二氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)-1-氧代己-2-基)-2-((r)-2-((r)-2-叔丁氧基羰基氨基-3-苯基丙酰氨基)-3-苯基丙酰氨基)-4-甲基戊酰胺(168-5)的合成
[0157]
将1-1(250mg,0.33mmol)，hatu(152mg,0.40mmol)和diea(150mg,1.16mmol)用四氢呋喃(8ml)溶解后，反应液室温搅拌30分钟后，往反应液中加入168-3(123mg,0.36mmol)后，反应液在室温搅拌过夜，tlc监测反应完成后，之后反应液用1nna2co3(4ml)和饱和食盐水(4ml)分别洗涤一遍，有机相干燥后，旋干得到粗品。粗品用柱层析纯化，洗脱剂极性v
dcm
:v
meoh
＝100：1到25：1得到棕固体168-5(95mg,产率：28.5％)，esi-ms(m/z)：1006.5[m+h]
+
。
[0158]
(4)(r)-n-((r)-6-氨基-1-(2-(苯并呋喃-5-羰基)-2，7-二氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)-1-氧代己-2-基)-2-((r)-2-((r)-2-氨基-3-苯基丙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)-4-甲基戊酰胺(168)的合成
[0159]
将168-5(95mg,0.09mmol)用乙酸乙酯(5ml)溶解后，往溶液中加入盐酸二氧六环溶液(4m，2.5ml)，之后反应液在室温搅拌1个小时。tlc监测原料大部分消耗完，停止反应，反应液直接过滤，固体干燥后得到产品。目标化合物168为白固体(76mg,产率：87.9％)，esi-ms(m/z)：806.4[m+h]
+
。
[0160]1hnmr(400mhz,cd3od,δ8.88-8.73(m,2h),8.07(m,1h),7.94(m,1h),7.57(m,1h),7.34-7.19(m,10h),4.70(m,1h),4.44-4.39(m,3h),4.14-3.98(m,3h),3.85-3.21(m,6h),3.03-2.93(m,4h),1.95-1.28(m,17h),0.99(d,3h),0.94(d,3h).
[0161]
实施例4：(r)-n-((r)-6-氨基-1-(1-(咪唑并[1，2-a]吡啶-2-羰基)-1，7-二氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)-1-氧代己-2-基)-2-((r)-2-((r)-2-氨基-3-苯基丙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)-4-甲基戊酰胺三盐酸盐(198)的合成
[0162][0163]
(1)1-(咪唑并[1，2-a]吡啶-2-羰基)-1，7-二氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁酯(198-2)的合成
[0164]
将168-1(0.19g,1.2mmol)，hatu(0.53g,1.4mmol)和tea(0.24g,2.4mmol)用dmf(5ml)溶解后，反应液室温搅拌30分钟后，往反应液中加入2(0.23g,1.0mmol)后，反应液在室温搅拌过夜，tlc监测反应完成后，之后反应液加水(30ml)稀释后，用dcm(10ml
×
3)萃取，合并有机相再用1nna2co3(10ml)和饱和食盐水(10ml)分别洗涤一遍，有机相干燥旋干得到粗品。粗品用柱层析纯化，洗脱剂极性v
dcm
:v
meoh
＝100：1到30：1得到棕固体198-2(0.31g,产率：82.3％)，esi-ms(m/z)：371.1[m+h]
+
。(2)咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基(1，7-二氮杂螺[3.5]壬烷-1-基)甲酮(198-3)的合成
[0165]
将198-2(0.31g,1.65mmol)用thf(8ml)溶解后，往溶液中加入盐酸二氧六环溶液(4m，4ml)，之后反应液在室温搅拌6个小时。tlc监测原料大部分消耗完，停止反应，反应液直接旋干得到产品。目标化合物198-3为白固体(0.27g,产率：94.0％)，esi-ms(m/z)：271.0[m+h]
+
。
[0166]
(3)(r)-n-((r)-6-叔丁氧基羰基氨基-1-(1-(咪唑并[1，2-a]吡啶-2-羰基)-1，7-二氮杂螺[3.5]壬-7-基)-1-氧代己-2-基)-2-((r)-2-((r)-2-叔丁氧基羰基氨基-3-苯基丙酰氨基)-3-苯基丙酰氨基)-4-甲基戊酰胺(198-5)的合成
[0167]
将1-1(250mg,0.33mmol)，hatu(152mg,0.40mmol)和diea(150mg,1.16mmol)用四氢呋喃(8ml)溶解后，反应液室温搅拌30分钟后，往反应液中加入198-3(123mg,0.36mmol)后，反应液在室温搅拌过夜，tlc监测反应完全后，之后反应液用1nna2co3(3ml)和饱和食盐水(3ml)分别洗涤一遍，有机相干燥旋干得到粗品。粗品用柱层析纯化，洗脱剂极性v
dcm
:v
meoh
＝100：1到25：1得到目标化合物198-5为棕固体(75mg,产率：22.5％)，esi-ms(m/z)：1006.5[m+h]
+
。
[0168]
(4)(r)-n-((r)-6-氨基-1-(1-(咪唑并[1，2-a]吡啶-2-羰基)-1，7-二氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)-1-氧代己-2-基)-2-((r)-2-((r)-2-氨基-3-苯基丙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)-4-甲基戊酰胺三盐酸盐(198)的合成
[0169]
将198-5(75mg,0.07mmol)用乙酸乙酯(5ml)溶解后，往溶液中加入盐酸二氧六环溶液(4m，2.5ml)，之后反应液在室温搅拌1个小时。tlc监测原料大部分消耗完，停止反应，反应液直接过滤，固体干燥后得到产品。目标化合物198为白固体(52mg,产率：63.1％)，esi-ms(m/z)：806.3[m+h]
+
。
[0170]1hnmr(400mhz,cd3od),δ8.89-8.70(m,2h),8.04(m,1h),7.92(m,1h),7.53(m,1h),7.32-7.17(m,10h),4.70(m,1h),4.39(m,1h),4.15-4.73(m,5h),3.55(m,3h),3.36-3.13(m,2h),3.00-2.93(m,4h),2.37-2.19(m,4h),1.79-1.25(m,11h),0.96(d,3h),0.93(d,3h)。
[0171]
实施例5：(r)-n-((r)-6-氨基-1-(1-(2，2-二苯基乙酰基)-1，7-二氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)-1-氧代己-2-基)-2-((r)-2-((r)-2-氨基-3-苯基丙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)-4-甲基戊酰胺(215)的合成
ms(m/z)：272.1[m+h]
+
。
[0189]
(4)(r)-n-((r)-6-叔丁氧基羰基氨基-1-(2-(异吲哚啉-2-羰基)-2，7-二氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)-1-氧代己-2-基)-2-((r)-2-((r)-2-叔丁氧基羰基氨基-3-苯基丙酰氨基)-3-苯基丙酰氨基)-4-甲基戊酰胺(220-6)的合成
[0190]
将1-1(140mg,0.19mmol)，hatu(87mg,0.23mmol)和diea(62mg,0.48mmol)用四氢呋喃(6ml)溶解后，反应液室温搅拌30分钟后，往反应液中加入220-5(77mg,0.20mmol)后，反应液在室温搅拌过夜，tlc监测反应完全后，之后反应液加入dcm(20ml)后用1nna2co3(8ml)和1n hcl(8ml)分别洗涤一遍，有机相干燥后，旋干得到粗品。粗品用柱层析纯化，洗脱剂极性v
dcm
:v
meoh
＝80：1到25：1得到目标化合物220-6为白固体(121mg,产率：64.6％)，esi-ms(m/z)：1007.5[m+h]
+
。
[0191]
(5)(r)-n-((r)-6-氨基-1-(2-(异吲哚啉-2-羰基)-2，7-二氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)-1-氧代己-2-基)-2-((r)-2-((r)-2-氨基-3-苯基丙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)-4-甲基戊酰胺二三氟乙酸盐(220)的合成
[0192]
将220-6(121mg,0.17mmol)用二氯甲烷(4.5ml)溶解后，往溶液中加入三氟乙酸(1.5ml)，之后反应液在室温搅拌2个小时。tlc监测原料大部分消耗完，停止反应，反应液旋干后用乙醚打浆，固体过滤干燥得到产品。目标化合物220为白固体(113mg,产率：90.9％)，esi-ms(m/z)：807.4[m+h]
+
。
[0193]1hnmr(400mhz,cd3od),δ7.36-7.21(m,14h),4.73-4.70(m,6h),4.39(m,1h),4.09(m,1h),3.92-3.84(m,4h),3.72-3.63(m,2h),3.51-3.43(m,2h),3.27-3.19(m,2h),3.01-2.90(m,4h),1.86-1.29(m,13h),0.98(d,3h),0.94(d,3h).
[0194]
实施例7：(r)-n-((r)-6-氨基-1-氧代-1-(2-(e)-3-(噻吩-2-基)丙烯酰基)-2，7-二氮杂螺[3.5]壬-7-基)己-2-基)-2-((r)-2-((r)-2-氨基-3-苯基丙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)-4-甲基戊酰胺(229)的合成
[0195]
[0196]
(1)(e)-2-(3-(噻吩-2-基)丙烯酰基)-2，7-二氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁酯(229-3)的合成
[0197]
将1(150mg,0.663mmol)，229-2(102mg,0.663mmol)，hatu(378mg,0.994mmol)和三乙胺(257mg,1.99mmol)用四氢呋喃(10ml)溶解后，反应液在室温搅拌过夜，tlc监测反应完全后，之后反应液用1nna2co3(3ml)和1n hcl(3ml)分别洗涤一遍，有机相干燥后，旋干得到粗品。粗品用柱层析纯化，洗脱剂极性v
乙酸乙酯
：v
正己烷
＝20：1到4：1得到淡黄油状物229-3(200mg,产率：83.2％)，esi-ms(m/z)：608.3[m+h]
+
。
[0198]
(2)(e)-1-(2，7-二氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)-3-(噻吩-2-基)丙-2-烯-1-酮盐酸盐(229-4)的合成
[0199]
将229-3(200mg,0.552mmol)用dcm(6ml)溶解后，往溶液中加入盐酸二氧六环溶液(4m，3ml)，之后反应液在室温搅拌2个小时。tlc监测反应完全后，反应液直接旋干得到产品。目标化合物229-4为淡黄油状物(158mg,产率：96.0％)，esi-ms(m/z)：363.2[m+h]
+
。
[0200]
(3)(r)-n-((r)-6-叔丁氧基羰基氨基-1-氧代-1-(2-((e)-3-(噻吩-2-基)丙烯酰基)-2，7-二氮杂螺[3.5]壬-7-基)己-2-基)-2-((r)-2-((r)-2-叔丁氧基羰基氨基-3-苯基丙酰氨基)-3-苯基丙酰氨基)-4-甲基戊酰胺(229-6)的合成
[0201]
将1-1(266mg,0.353mmol)，hatu(202mg,0.530mmol)和diea(182mg,1.41mmol)用四氢呋喃(10ml)溶解后，反应液室温搅拌30分钟后，往反应液中加入229-4(158mg,0.530mmol)后，反应液在室温搅拌过夜，tlc监测反应完全后，之后反应液用1nna2co3(3ml)和1n hcl(3ml)分别洗涤一遍，有机相干燥后，旋干得到粗品。粗品用柱层析纯化，洗脱剂极性v
dcm
：v
meoh
＝100：1到40：1得到目标化合物229-6为白固体(195mg,产率：55.3％)，esi-ms(m/z)：998.5[m+h]
+
。
[0202]
(4)(r)-n-((r)-6-氨基-1-氧代-1-(2-(e)-3-(噻吩-2-基)丙烯酰基)-2，7-二氮杂螺[3.5]壬-7-基)己-2-基)-2-((r)-2-((r)-2-氨基-3-苯基丙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)-4-甲基戊酰胺(229)的合成
[0203]
将229-6(195mg,1.95
×
10-5
mol)用dcm(6ml)溶解后，往溶液中加入盐酸二氧六环溶液(4m，3ml)，之后反应液在室温搅拌2个小时。tlc监测反应完全后，停止反应，反应液直接过滤，固体干燥后得到产品。目标化合物229为白固体(120mg,产率：70.7％)，esi-ms(m/z)：798.4[m+h]
+
。
[0204]1h nmr(400mhz,cd3od)δ8.00(s,1h),7.84
–
7.65(m,1h),7.55(t,j＝6.7hz,1h),7.44
–
7.18(m,10h),7.16
–
7.00(m,1h),6.44(dd,j＝15.4,4.7hz,1h),4.92
–
4.83(m,2h),4.74(dd,j＝9.8,4.8hz,1h),4.42(d,j＝4.6hz,1h),4.21
–
4.02(m,3h),3.94
–
3.59(m,7h),3.58
–
3.39(m,2h),3.25(dd,j＝13.9,5.3hz,2h),3.08
–
2.79(m,8h),2.00
–
1.27(m,15h),0.99(dd,j＝15.2,6.2hz,6h).
[0205]
实施例8：(r)-n-((r)-6-氨基-1-(2-肉桂酰基-2，7-二氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)-1-氧代己-2-基)-2-((r)-2-((r)-2-氨基-3-苯基丙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)-4-甲基戊酰胺(230)的合成
[0206][0207]
(1)2-肉桂酰基-2，7-二氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁酯(230-2)的合成
[0208]
将1(250mg,1.105mmol),230-1(136.3mg,0.921mmol),hobt(149mg,1.105mmol),edc
·
hcl(264.7mg,1.38mmol)用二氯甲烷溶解(5ml)，室温搅拌5分钟后，加入三乙胺(93mg,0.92mmol)，室温搅拌反应过夜。加饱和碳酸氢钠水溶液(5ml)淬灭反应，分出有机相，水相用二氯甲烷(5ml
×
3)提取，合并有机相，用1n稀盐酸(5ml)洗后，浓缩，得粗品230-2(251mg，产率：76.7％)，esi-ms(m/z)：357.2[m+h]
+
。
[0209]
(2)(e)-3-苯基-1-(2，7-二氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)丙-2-烯-1-酮盐酸盐(230-3)的合成
[0210]
将上述粗品230-2(251mg,0.71mmol)用5ml乙酸乙酯溶解后，加入2.5ml盐酸二氧六环溶液，室温搅拌反应2小时，过滤，得白固体230-3(184mg,产率：89.2％)，esi-ms(m/z)：257.2[m+h]
+
。
[0211]
(3)(r)-n-((r)-6-叔丁氧基羰基氨基-1-(2-肉桂基-2，7-二氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)-1-氧代己-2-基)-2-((r)-2-((r)-2-叔丁氧基羰基氨基-3-苯基丙酰氨基)-3-苯基丙酰氨基)-4-甲基戊酰胺(230-4)的合成
[0212]
将1-1(300mg,0.398mmol),hatu(90.8mg,0.239mmol)用thf(5ml)溶解后，加入diea(102.8mg,0.797mmol)，室温搅拌反应0.5小时后，加入230-3(70mg.0.239mmol)，室温搅拌反应过夜。加入饱和碳酸氢钠水溶液(5ml)淬灭反应，分出有机相，水相用v
dcm
：v
meoh
＝10:1(5ml
×
3)萃取，合并有机相，用1n稀盐酸(5ml)洗后，浓缩，柱层析(v
dcm
:v
meoh
＝20:1)，得产物230-4(192mg,产率：48.6％)，esi-ms(m/z)：992.5[m+h]
+
。
[0213]
(4)(r)-n-((r)-6-氨基-1-(2-肉桂酰基-2，7-二氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)-1-氧代己-2-基)-2-((r)-2-((r)-2-氨基-3-苯基丙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)-4-甲基戊酰胺(230)的合成
[0214]
将230-4(192mg,0.19mmol)用5ml乙酸乙酯溶解后，加入2.5ml盐酸二氧六环溶液，室温搅拌反应2小时，抽滤，得褐固体化合物230(128mg，产率：76.5％)，esi-ms(m/z)：792.4[m+h]
+
。
[0215]1hnmr(400mhz,cd3od)δ7.65-7.52(m,3h),7.44-7.24(m,13h),6.77-6.67(m,1h),4.75-4.72(m,1h),4.46-4.41(m,1h),4.20-4.11(m,2h),3.90-3.80(m,2h),3.26-3.23(m,4h),3.04-2.89(m,8h),1.89-1.47(m,13h),0.99(dd,6h).
[0216]
实施例9：(r)-n-((r)-6-氨基-1-(2-((e)-3-(呋喃-3-基)丙烯酰基)-2，7-二氮杂螺[3.5]壬-7-基)-1-氧代己-2-基)-2-((r)-2-((r)-2-氨基-3-苯基丙酰氨基)-3-苯基丙酰氨基)-4-甲基戊酰胺(239)的合成
[0217][0218]
(1)(e)-叔丁基2-(3-(呋喃-3-基)丙烯酸酯)-2，7-二氮杂卓[3.5]壬-7-羧酸盐(239-2)的合成
[0219]
将1(250mg,1.105mmol),239-1(127mg,0.921mmol),hobt(149mg,1.105mmol),edc
·
hcl(264.7mg,1.38mmol)用5ml二氯甲烷溶解，室温搅拌5分钟后，加入三乙胺(93mg,0.92mmol)，室温搅拌反应过夜。加饱和碳酸氢钠水溶液(5ml)淬灭反应，分出有机相，水相用二氯甲烷(5ml
×
3)萃取，合并有机相，用1n稀盐酸(5ml)洗后，浓缩，得粗品239-2(274mg，产率：43.7％)，esi-ms(m/z)：347.2[m+h]
+
。
[0220]
(2)(e)-3-(呋喃-3-基)-1-(2，7-二氮杂卓[3.5]壬-2-基)丙-2-烯-1-酮盐酸盐(239-3)的合成
[0221]
将上述粗品239-2(274mg,0.79mmol)用5ml乙酸乙酯溶解后，加入2.5ml盐酸二氧六环溶液，室温搅拌反应2小时，过滤，得白固体239-3(186mg，产率：83.1％)，esi-ms(m/z):247.2[m+h]
+
。
[0222]
(3)(r)-n-((r)-6-叔丁氧基羰基氨基-1-(2-((e)-3-(呋喃-3-基)丙烯酰基)-2，7-二氮杂螺[3.5]壬-7-基)-1-氧代己-2-基)-2-((r)-2-((r)-2-叔丁氧基羰基氨基-3-苯基丙酰氨基)-3-苯基丙酰氨基)-4-甲基戊酰胺(239-4)的合成
[0223]
将1-1(300mg,0.398mmol),hatu(90.8mg,0.239mmol)用thf(5ml)溶解后，加入diea(102.8mg,0.797mmol)，室温搅拌反应0.5小时后，加入239-3(67mg.0.239mmol)，室温搅拌反应过夜。加入饱和碳酸氢钠水溶液(5ml)淬灭反应，分出有机相，水相用v
dcm
：v
meoh
＝
10:1(5ml
×
3)萃取，合并有机相，用1n稀盐酸(5ml)洗后，浓缩，柱层析(v
dcm
:v
meoh
＝20:1)，得产物239-4(207mg，产率：53.0％)，esi-ms(m/z)：982.5[m+h]
+
。
[0224]
(4)(r)-n-((r)-6-氨基-1-(2-((e)-3-(呋喃-3-基)丙烯酰基)-2，7-二氮杂螺[3.5]壬-7-基)-1-氧代己-2-基)-2-((r)-2-((r)-2-氨基-3-苯基丙酰氨基)-3-苯基丙酰氨基)-4-甲基戊酰胺(239)的合成
[0225]
将239-4(207mg,0.21mmol)用5ml乙酸乙酯溶解后，加入2.5ml盐酸二氧六环溶液，室温搅拌反应2小时，抽滤，得褐固体化合物239(121mg，产率：67.1％)，esi-ms(m/z)：782.4[m+h]
+
。
[0226]1h nmr(400mhz,cd3od)δ7.81(s,1h),7.58(s,1h),7.55-7.52(m,1h),7.39-7.22(m,10h),6.83(s,1h),6.47-6.43(m,1h),4.75-4.72(m,1h),4.46-4.41(m,1h),4.20-4.11(m,2h),3.90-3.80(m,1h),3.26-3.23(m,4h),3.04-2.89(m,9h),1.89-1.47(m,13h),0.99(dd,6h).
[0227]
实施例10：(r)-n-((r)-6-氨基-1-(2-(咪唑并[1，2-a]吡啶-2-羰基)-2，7-二氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)-1-氧代己-2-基)-4-甲基-2-((r)-3-苯基-2-(2-((r)-2-苯基丙基)氨基)乙酰胺基)戊酰胺三盐酸盐(240)的合成
[0228][0229]
(1)叔丁基((10r，13r，16r)-16-苄基-10-(2-(咪唑并[1，2-a]吡啶-2-羰基)-2，7-二氮杂螺[3.5]壬烷-7-羰基)-13-异丁基-2，2-二甲基-4，12，15，18-四氧代-3-氧杂-5，11，14，17-十四氮杂壬烷-19-基)((r)-2-苯基丙基)氨基甲酸酯(240-1)的合成
[0230]
将1-2(60mg,0.077mmol)，hatu(35mg,0.092mmol)和diea(30mg,0.231mmol)用dmf(3ml)溶解后，反应液室温搅拌30分钟后，往反应液中加入168-3(22mg,0.081mmol)后，反应液在室温搅拌过夜，tlc监测反应完全后，之后反应液直接用反相柱纯化，得到棕固体240-5(42mg，产率：52.9％)，esi-ms(m/z)：1034.4[m+h]
+
。
[0231]
(2)(r)-n-((r)-6-氨基-1-(2-(咪唑并[1，2-a]吡啶-2-羰基)-2，7-二氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)-1-氧代己-2-基)-4-甲基-2-((r)-3-苯基-2-(2-((r)-2-苯基丙基)氨基)乙酰胺基)戊酰胺三盐酸盐(240)的合成
[0232]
将240-1(42mg,0.041mmol)用乙酸乙酯(3ml)溶解后，往溶液中加入盐酸二氧六环溶液(4m，1.5ml)，之后反应液在室温搅拌1个小时。tlc监测原料大部分消耗完，停止反应，反应液直接过滤，固体干燥后得到产品。目标化合物240为白固体(29mg，产率：76.4％)，esi-ms(m/z)：834.3[m+h]
+
。
[0233]1hnmr(400mhz,cd3od),δ8.87-8.73(m,2h),8.07(m,1h),7.93(m,1h),7.57(m,1h),7.37-7.14(m,10h),4.70(m,1h),4.55(m,1h),4.47-4.39(m,3h),4.12-4.00(m,4h),3.88-3.72(m,2h),3.59-3.46(m,2h),3.23-2.83(m,7h),2.01-1.31(m,16h),0.97(d,3h),0.91(d,3h).
[0234]
实施例11：(r)-n-((r)-6-氨基-1-(2-(3，3-二氟氮杂环丁烷-1-羰基)-2，7-二氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)-1-氧代己-2-基)-2-((r)-2-((r)-2-氨基-3-苯基丙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)-4-甲基戊酰胺二三氟乙酸盐(201)的合成
[0235][0236]
(1)2-(3，3-二氟氮杂环丁烷-1-羰基)-2，7-二氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁酯(201-2)的合成
[0237]
将1(100mg,0.442mmol),三光气(52.5mg,0.177mmol)用3ml二氯甲烷溶解后，加入三乙胺(89mg,0.884mmol)，室温搅拌反应3小时。加水(20ml)淬灭反应，分出有机相，水相用二氯甲烷(5ml
×
3)萃取，合并有机相，浓缩。
[0238]
将201-1(57.4mg,0.442mmol)用3ml二氯甲烷溶解后，加入三乙胺(89mg,0.884mmol)和上一步产物dcm溶液，室温搅拌反应过夜。加水淬灭反应，分出有机相，水相用二氯甲烷(10ml
×
3)萃取，合并有机相，浓缩，柱层析(v
dcm
:v
meoh
＝20:1)，得白固体201-2(130mg，产率：85.2％)，esi-ms(m/z)：346.2[m+h]
+
。
[0239]
(2)(3，3-二氟氮杂环丁烷-1-基)(2，7-二氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)甲酮三氟乙酸盐(201-3)的合成
[0240]
将201-2(130mg,0.38mmol),用5ml二氯甲烷溶解后，加入2.5ml三氟乙酸，室温搅拌反应2小时，浓缩，得产物201-3(115mg，产率：85.0％)，esi-ms(m/z)：246.2[m+h]
+
。
[0241]
(3)(r)-n-((r)-6-叔丁氧基羰基氨基-1-(2-(3，3-二氟氮杂环丁烷-1-羰基)-2，7-二氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)-1-氧代己-2-基)-2-((r)-2-((r)-2-叔丁氧基羰基氨基-3-苯基丙酰氨基)-3-苯基丙酰氨基)-4-甲基戊酰胺(201-4)的合成
[0242]
将1-1(150mg,0.199mmol),hatu(90.8mg,0.239mmol)用thf(5ml)溶解后，加入
diea(102.8mg,0.797mmol)，室温搅拌反应0.5小时后，加入201-3(85.8mg.0.239mmol)，室温搅拌反应过夜。加入饱和碳酸氢钠水溶液(5ml)淬灭反应，分出有机相，水相用v
dcm
：v
meoh
＝10:1(5ml
×
3)萃取，合并有机相，用1n稀盐酸(5ml)洗后，浓缩，柱层析(v
dcm
:v
meoh
＝20:1)，得产物201-4(106mg，产率：54.4％)，esi-ms(m/z)：981.5[m+h]
+
。
[0243]
(4)(r)-n-((r)-6-氨基-1-(2-(3，3-二氟氮杂环丁烷-1-羰基)-2，7-二氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)-1-氧代己-2-基)-2-((r)-2-((r)-2-氨基-3-苯基丙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)-4-甲基戊酰胺二三氟乙酸盐(201)的合成
[0244]
将201-4(106mg,0.11mmol)用5ml二氯甲烷溶解后，加入2.5ml三氟乙酸，室温搅拌反应2小时，浓缩，加乙醚析出固体，抽滤，得白固体201(91mg，产率：83.5％)，esi-ms(m/z)：781.4[m+h]
+
。
[0245]1hnmr(400mhz,cd3od),δ7.40-7.24(m,10h),4.78-4.72(m,1h),4.47-4.27(m,5h),4.13-4.07(m,1h),3.81-3.63(m,8h),3.04-2.89(m,7h),1.89-1.34(m,13h),0.99(dd,6h).
[0246]
实施例12：(r)-n-((r)-6-氨基-1-氧代-1-(2-(r)-5-氧代吡咯烷-2-羰基)-2，7-二氮杂螺[3.5]壬-7-基)己-2-基)-2-((r)-2-((r)-2-氨基-3-苯基丙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)-4-甲基戊酰胺二三氟乙酸盐(337)的合成
[0247][0248]
(1)(r)-2-(5-氧代吡咯烷-2-羰基)-2，7-二氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁酯(337-2)的合成
[0249]
将1(210mg,0.9mmol),337-1(100mg,0.775mmol),hobt(125mg,0.93mmol),edc
·
hcl(223mg,1.163mmol)用5ml二氯甲烷溶解，室温搅拌5分钟后，加入三乙胺(78mg,0.775mmol)，室温搅拌反应过夜。加饱和碳酸氢钠水溶液(5ml)淬灭反应，分出有机相，水相用二氯甲烷提取3次，合并有机相，用1n稀盐酸洗后，浓缩，得粗品337-2(214mg，产率：81.9％)，esi-ms(m/z)：338.1[m+h]
+
。
[0250]
(2)(r)-5-(2，7-二氮杂螺[3.5]壬烷-2-羰基)吡咯烷-2-酮(337-3)的合成
[0251]
将上述粗品337-2(214mg,0.63mmol)用5ml二氯甲烷溶解后，加入2.5ml三氟乙酸，室温搅拌反应2小时，过滤，得白固体337-3(205mg，产率：92.0％)，esi-ms(m/z)：238.1[m
+h]
+
。
[0252]
(3)(r)-n-((r)-6-叔丁氧基羰基氨基-1-氧代-1-(2-((r)-5-氧代吡咯烷-2-羰基)-2，7-二氮杂螺[3.5]壬-7-基)己-2-基)-2-((r)-2-((r)-2-叔丁氧基羰基氨基-3-苯基丙酰氨基)-3-苯基丙酰氨基)-4-甲基戊酰胺(337-4)的合成
[0253]
将1-1(200mg,0.265mmol),hatu(121mg,0.319mmol)用thf(5ml)溶解后，加入diea(137mg,1.062mmol)，室温搅拌反应0.5小时后，加入337-3(112mg.0.319mmol)，室温搅拌反应过夜。加入饱和碳酸氢钠水溶液(5ml)淬灭反应，分出有机相，水相用v
dcm
：v
meoh
＝10:1(5ml
×
3)萃取，合并有机相，用1n稀盐酸(5ml)洗后，浓缩，柱层析(v
dcm
:v
meoh
＝20:1)，得产物337-4(134mg，产率：51.9％)，esi-ms(m/z)：973.5[m+h]
+
。
[0254]
(4)(r)-n-((r)-6-氨基-1-氧代-1-(2-(r)-5-氧代吡咯烷-2-羰基)-2，7-二氮杂螺[3.5]壬-7-基)己-2-基)-2-((r)-2-((r)-2-氨基-3-苯基丙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)-4-甲基戊酰胺二三氟乙酸盐(337)的合成
[0255]
将337-4(134mg,0.14mmol)用5ml二氯甲烷溶解后，加入1ml三氟乙酸，室温搅拌反应2小时，抽滤，得白固体337(90mg，产率：65.3％)，esi-ms(m/z)：773.5[m+h]
+
。
[0256]1hnmr(400mhz,cd3od),δ7.36-7.22(m,10h),4.76-4.67(m,1h),4.44-4.29(m,2h),4.15-4.05(m,3h),3.80-3.64(m,4h),3.49-3.42(m,2h),3.19-2.84(m,5h),2.47-2.29(m,3h),2.13-2.04(m,2h),1.88-1.40(m,14h),0.99(dd,6h).
[0257]
实施例13：(r)-n-((r)-6-氨基-1-氧代-1-(2-(r)-1，2，3，4-四氢异喹啉-3-羰基)-2，7-二氮杂螺[3.5]壬-7-基)己-2-基)-2-((r)-2-((r)-2-氨基-3-苯丙酰胺基)-3-苯丙酰胺基)-4-甲基戊酰胺三盐酸盐(264)的合成
[0258][0259]
(1)(r)-(9h-芴-9-基)甲基3-(7-(叔丁氧基羰基)-2，7-二氮杂螺[3.5]壬烷-2-羰基)-3，4-二氢异喹啉-2(1h)-羧酸酯(264-3)的合成
[0260]
将1(200mg,0.884mmol)，264-2(353mg,0.884mmol)，hatu(403mg,1.06mmol)和
diea(228mg,1.77mmol)用四氢呋喃(10ml)溶解后，反应液在室温搅拌过夜，tlc监测反应完全后，反应液用1nna2co3(10ml)和1n hcl(10ml)分别洗涤一遍，有机相干燥后，旋干得到粗品。粗品用柱层析纯化，洗脱剂极性v
乙酸乙酯
：v
正己烷
＝20：1到4：1得到淡黄油状物264-3(400mg,产率：74.5％)，esi-ms(m/z)：608.3[m+h]
+
。
[0261]
(2)(r)-(9h-芴-9-基)甲基3-(2，7-二氮杂螺[3.5]壬烷-2-羰基)-3，4-二氢异喹啉-2(1h)-羧酸酯盐酸盐(264-4)的合成
[0262]
将264-3(400mg,0.658mmol)用dcm(6ml)溶解后，往溶液中加入盐酸二氧六环溶液(4m，3ml)，之后反应液在室温搅拌2个小时。tlc监测反应完全后，反应液直接旋干得到产品。目标化合物264-4为淡黄油状物(356mg,产率：99.5％)，esi-ms(m/z)：508.3[m+h]
+
。
[0263]
(3)(r)-(9h-芴-9-基)甲基3-(7-((6r，9r，12r，15r)-6，9-二苄基-15-(4-(叔丁氧基羰基)氨基)丁基)-12-异丁基-2，2-二甲基-4，7，10，13-四氧代-3-氧杂-5，8，11，14-四氮杂十六碳-16-酰基)-2，7-二氮杂螺[3.5]壬-2-羰基)-3，4-二氢异喹啉-2(1h)-羧酸酯(264-6)的合成
[0264]
将1-1(150mg,0.199mmol)，hatu(113mg,0.298m mol)和diea(154mg,0.796mmol)用四氢呋喃(10ml)溶解后，反应液室温搅拌30分钟后，往反应液中加入264-4(151mg,0.298mmol)后，反应液在室温搅拌过夜，tlc监测反应完全后，之后反应液用1n na2co3(10ml)和1n hcl(10ml)分别洗涤一遍，有机相干燥后，旋干得到粗品。粗品用柱层析纯化，洗脱剂极性v
dcm
：v
meoh
＝100：1到40：1得到目标化合物264-6为白固体(135mg,产率：54.5％)，esi-ms(m/z)：1243.7[m+h]
+
。
[0265]
(4)(r)-n-((r)-6-叔丁氧基羰基氨基-1-氧代-1-(2-((r)-1，2，3，4-四氢异喹啉-3-羰基)-2，7-二氮杂螺[3.5]壬-7-基)己-2-基)-2-((r)-2-((r)-2-叔丁氧基羰基氨基-3-苯基丙酰氨基)-3-苯基丙酰氨基)-4-甲基戊酰胺(264-7)的合成
[0266]
将264-6(135mg,0.109mmol)，用二氯甲烷(6ml)溶解后，加入(3ml)，室温搅拌过夜，tlc监测反应完全后,旋干。柱层析纯化，洗脱剂极性v
dcm
：v
meoh
＝100：1到20：1得到目标化合物264-7为白固体(100mg,产率：89.8％)，esi-ms(m/z)：1021.6[m+h]
+
。
[0267]
(5)(r)-n-((r)-6-氨基-1-氧代-1-(2-(r)-1，2，3，4-四氢异喹啉-3-羰基)-2，7-二氮杂螺[3.5]壬-7-基)己-2-基)-2-((r)-2-((r)-2-氨基-3-苯丙酰胺基)-3-苯丙酰胺基)-4-甲基戊酰胺三盐酸盐(264)的合成
[0268]
将264-7(100mg,9.79
×
10-5
mol)用dcm(6ml)溶解后，往溶液中加入盐酸二氧六环溶液(4m，3ml)，之后反应液在室温搅拌2个小时。tlc监测反应完全后，停止反应，反应液直接过滤，固体干燥后得到产品。目标化合物264为白固体(88mg,产率：96.6％)，esi-ms(m/z)：821.5[m+h]
+
。
[0269]1h nmr(400mhz,cd3od)δ7.55
–
7.14(m,14h),4.73(s,1h),4.61
–
4.02(m,6h),4.00
–
3.62(m,4h),3.61
–
3.35(m,4h),3.29
–
2.83(m,9h),2.10
–
1.28(m,17h),1.11
–
0.82(m,6h).
[0270]
实施例14：(r)-n-((r)-6-氨基-1-氧代-1-(2-(r)--2-羰基)-2，7-二氮杂螺[3.5]壬-7-基)己-2-基)-2-((r)-2-((r)-2-氨基-3-苯基丙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)-4-甲基戊酰胺三盐酸盐(265)的合成
[0271][0272]
(1)(r)-叔丁基2-(1-(((9h-芴-9-基)甲氧基)羰基)-2-羰基)-2，7-二氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸酯(265-3)的合成
[0273]
将1(200mg,0.884mmol)，265-2(311mg,0.884mmol)，hatu(403mg,1.06mmol)和diea(228mg,1.77mmol)用四氢呋喃(10ml)溶解后，反应液在室温搅拌过夜，tlc监测反应完全后，反应液用1nna2co3(10ml)和1n hcl(10ml)分别洗涤一遍，有机相干燥后，旋干得到粗品。粗品用柱层析纯化，洗脱剂极性v
乙酸乙酯
：v
正己烷
＝20：1到4：1得到淡黄油状物265-3(460mg,产率：93.0％)，esi-ms(m/z)：560.3[m+h]
+
。
[0274]
(2)(r)-(9h-芴-9-基)甲基2-(2，7-二氮杂螺[3.5]壬烷-2-羰基)-1-羧酸酯(265-4)的合成
[0275]
将265-3(460mg g,0.822mmol)用dcm(6ml)溶解后，往溶液中加入盐酸二氧六环溶液(4m，3ml)，之后反应液在室温搅拌2个小时。tlc监测反应完全后，反应液直接旋干得到产品。目标化合物265-4为淡黄油状物(406mg,产率：99.5％)，esi-ms(m/z)：460.3[m+h]
+
。
[0276]
(3)(r)-(9h-芴-9-基)甲基2-(7-((6r，9r，12r，15r)-6，9-二苄基-15-(4-(叔丁氧基羰基)氨基)丁基)-12-异丁基-2，2-二甲基-4，7，10，13-四氧代-3-氧杂-5，8，11，14-四氮杂十六碳-16-酰基)-2，7-二氮杂螺[3.5]壬烷(265-6)的合成
[0277]
将1-1(100mg,0.133mmol)，hatu(76mg,0.199mmol)和diea(69mg,0.532mmol)用四氢呋喃(10ml)溶解后，反应液室温搅拌30分钟后，往反应液中加入265-4(99mg,0.199mmol)后，反应液在室温搅拌过夜，tlc监测反应后，之后反应液用1nna2co3(10ml)和1n hcl(10ml)分别洗涤一遍，有机相干燥后，旋干得到粗品。粗品用柱层析纯化，洗脱剂极性v
dcm
：v
meoh
＝100：1到40：1得到白固体265-6(50mg,产率：31.4％)，esi-ms(m/z)：1195.7[m+h]
+
。
[0278]
(4)(r)-n-((r)-6-叔丁氧基羰基氨基-1-氧代-1-(2-((r)--2-羰基)-2，7-二氮杂螺[3.5]壬-7-基)己-2-基)-2-((r)-2-((r)-2-叔丁氧基羰基氨基-3-苯丙酰氨基)-3-苯丙酰氨基)-4-甲基戊酰胺(265-7)的合成
[0279]
将265-6(50mg,4.18
×
10-5
mol)，用二氯甲烷(6ml)溶解后，加入(3ml)，室温搅拌过夜，tlc监测反应，反应完全后，旋干。柱层析纯化，洗脱剂极性v
dcm
：v
meoh
＝100：1到20：1
得到白固体265-7(30mg,产率：73.7％)，esi-ms(m/z)：973.6[m+1]
+
。
[0280]
(5)(r)-n-((r)-6-氨基-1-氧代-1-(2-(r)--2-羰基)-2，7-二氮杂螺[3.5]壬-7-基)己-2-基)-2-((r)-2-((r)-2-氨基-3-苯基丙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)-4-甲基戊酰胺三盐酸盐(265)的合成
[0281]
将265-7(30mg,3.08
×
10-5
mol)用dcm(6ml)溶解后，往溶液中加入盐酸二氧六环溶液(4m，3ml)，之后反应液在室温搅拌2个小时。tlc监测反应完全后，停止反应，反应液直接过滤，固体干燥后得到产品。目标化合物265为白固体(25mg,产率：92.0％)，esi-ms(m/z)：773.5[m+h]
+
。
[0282]1h nmr(400mhz,cd3od)δ7.53
–
7.16(m,10h),4.71(dt,j＝18.4,9.1hz,1h),4.41(dt,j＝9.8,5.0hz,1h),4.26
–
3.96(m,4h),3.94
–
3.59(m,4h),3.58
–
3.34(m,4h),3.29
–
2.76(m,8h),2.27
–
1.35(m,23h),0.98(dd,j＝16.0,6.2hz,6h).
[0283]
实施例15：7-((r)-6-氨基-2-((r)-2-((r)-2-((r)-2-氨基-3-苯基丙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)-4-甲基戊酰胺基)己酰基)-n-(3-氟-4-(三氟甲氧基)苯基)-2，7-二氮杂螺[3.5]壬烷-2-甲酰胺二三氟乙酸盐(253)的合成
[0284][0285]
(1)苯基(3-氟-4-(三氟甲氧基)苯基)氨基甲酸酯(253-2)的合成
[0286]
将253-1(0.45g,2.31mmol)和吡啶(0.36g,4.62mmol)用四氢呋喃(16ml)溶解后，冰浴下将220-2(0.43g,2.77mmol)加入到上述溶液中，之后反应液在室温搅拌过夜，tlc监测反应完全后，过滤，滤液直接旋干得到粗品。粗品用柱层析纯化，洗脱剂极性v
正己烷
：v
乙酸乙酯
＝15：1到5：1得到白固体253-2(0.70g,产率：96.3％)，esi-ms(m/z)：316.0[m+h]
+
。
[0287]
(2)2-(3-氟-4-(三氟甲氧基)苯基)氨基甲酰基)-2，7-二氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁酯(253-3)的合成
[0288]
将253-2(700mg,2.22mmol)和1(551mg,2.44mmol)用dmso(6ml)溶解后，往反应液中加入k2co3(1.22g,8.88mmol)之后，反应液在室温搅拌过夜，tlc监测反应完全后，反应液倒入冰水(30ml)中，再用二氯甲烷(10ml
×
3)萃取后，合并有机相并用饱和食盐水(10ml)洗涤两遍，有机相干燥后，旋干得到粗品。粗品用柱层析纯化，洗脱剂极性v
dcm
：v
meoh
＝80：1到
20：1得到白固体253-3(779mg,产率：78.4％)，esi-ms(m/z)：448.1[m+h]
+
。
[0289]
(3)n-(3-氟-4-(三氟甲氧基)苯基)-2，7-二氮杂螺[3.5]壬烷-2-甲酰胺三氟乙酸盐(253-4)的合成
[0290]
将253-3(250mg,0.56mmol)用二氯甲烷(6ml)溶解后，往溶液中加入三氟乙酸(2ml)，之后反应液在室温搅拌2个小时。tlc监测原料大部分消耗完，停止反应，反应液直接旋干并用乙醚(10ml)打浆，过滤，干燥固体得到白化合物253-4(248mg,产率：96.2％)，esi-ms(m/z)：348.1[m+h]
+
。
[0291]
(4)7-((r)-6-叔丁氧基羰基氨基-2-((r)-2-((r)-2-((r)-2-叔丁氧基羰基氨基-3-苯基丙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)-4-甲基戊酰胺基)己酰基)-n-(3-氟-4-(三氟甲氧基)苯基)-2，7-二氮杂螺[3.5]壬烷-2-甲酰胺(253-6)的合成
[0292]
将1-1(140mg,0.19mmol)，hatu(87mg,0.23mmol)和diea(62mg,0.48mmol)用四氢呋喃(6ml)溶解后，反应液室温搅拌30分钟后，往反应液中加入253-4(92mg,0.20mmol)后，反应液在室温搅拌过夜，tlc监测反应完全后，之后反应液加入dcm(20ml)后用1nna2co3(10ml)和1n hcl(10ml)分别洗涤一遍，有机相干燥，旋干到粗品。粗品用柱层析纯化，洗脱剂极性v
dcm
：v
meoh
＝80：1到30：1得到白固体253-6(121mg,产率：60.1％)，esi-ms(m/z)：1083.3[m+h]
+
。
[0293]
(5)7-((r)-6-氨基-2-((r)-2-((r)-2-((r)-2-氨基-3-苯基丙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)-4-甲基戊酰胺基)己酰基)-n-(3-氟-4-(三氟甲氧基)苯基)-2，7-二氮杂螺[3.5]壬烷-2-甲酰胺二三氟乙酸盐(253)的合成
[0294]
将253-6(121mg,0.17mmol)用二氯甲烷(4.5ml)溶解后，往溶液中加入三氟乙酸(1.5ml)，之后反应液在室温搅拌2个小时。tlc监测原料大部分消耗完，停止反应，反应液旋干后用乙醚(20ml)打浆，固体过滤，干燥后得到产品。目标化合物253为白固体(95mg,产率：76.5％)，esi-ms(m/z)：883.2[m+h]
+
。
[0295]1hnmr(400mhz,cd3od),δ7.62(m,2h),7.37-7.21(m,11h),4.86(m,1h),4.71(m,1h),4.38(m,1h),4.08(m,1h),3.85-3.63(m,6h),3.51-3.38(m,2h),3.26-3.19(m,2h),3.00-2.90(m,4h),1.88-1.42(m,13h)，0.98(d,3h),0.94(d,3h).
[0296]
实施例16：(2r)-n-((2r)-6-氨基-1-(2-(六氢-1h-呋喃并[3，4-c]吡咯-5-羰基)-2，7-二氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)-1-氧代己-2-基)-2-((r)-2-((r)-2-氨基-3-苯丙酰氨基)-3-苯丙酰氨基)-4-甲基戊酰胺二三氟乙酸盐(256)的合成
[0297][0298]
(1)7-叔丁基2-苯基2，7-二氮杂螺[3.5]壬烷-2，7-二羧酸酯(256-2)的合成
[0299]
将1(0.5g,2.21mmol)和三乙胺(0.45g,4.42mmol)用四氢呋喃(20ml)溶解后，冰浴下将220-2(0.41g,2.65mmol)加入到上述溶液中，之后反应液在室温搅拌过夜，tlc监测反应完全后，过滤，滤液直接旋干得到粗品。粗品用柱层析纯化，洗脱剂极性v
正己烷
：v
乙酸乙酯
＝15：1到5：1得到白固体256-2(0.72g,产率：94.1％),esi-ms(m/z)：347.1[m+h]
+
。
[0300]
(2)2-(六氢-1h-呋喃并[3，4-c]吡咯-5-羰基)-2，7-二氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁酯(256-3)的合成
[0301]
将256-2(660mg,1.91mmol)和6h-1h-呋喃[3,4-c]吡咯盐酸盐(314mg,2.10mmol)用dmso(6ml)溶解后，往反应液中加入k2co3(791mg,5.73mmol)之后，反应液在100℃搅拌16小时，tlc监测反应完全后，反应液倒入冰水(30ml)中，再用二氯甲烷(10ml
×
3)萃取后，合并有机相并用饱和食盐水(10ml)洗涤两遍，有机相干燥旋干得到粗品。粗品用柱层析纯化，洗脱剂极性v
dcm
:v
meoh
＝80：1到25：1洗脱，得到白固体256-3(405mg,产率：58.2％),esi-ms(m/z)：366.1[m+h]
+
。
[0302]
(3)2，7-二氮杂螺[3.5]壬烷-2-基(四氢-1h-呋喃并[3，4-c]吡咯-5(3h)-基)甲酮(256-4)的合成
[0303]
将256-3(405mg,1.11mmol)用二氯甲烷(6ml)溶解后，往溶液中加入三氟乙酸(2ml)，之后反应液在室温搅拌2个小时。tlc监测原料大部分消耗完，停止反应，反应液直接旋干并用乙醚打浆，过滤，干燥固体得到白固体256-4(401mg,产率：95.3％)，esi-ms(m/z)：266.1[m+h]
+
。
[0304]
(4)(2r)-n-((2r)-6-叔丁氧基羰基氨基-1-(2-(六氢-1h-呋喃并[3，4-c]吡咯-5-羰基)-2，7-二氮杂螺[3.5]壬-7-基)-1-氧代己-2-基)-2-((r)-2-((r)-2-叔丁氧基羰基氨基-3-苯基丙酰氨基)-3-苯基丙酰氨基)-4-甲基戊酰胺(256-6)的合成
[0305]
将1-1(140mg,0.19mmol)，hatu(87mg,0.23mmol)和diea(62mg,0.48mmol)用四氢呋喃(6ml)溶解后，反应液室温搅拌30分钟后，往反应液中加入256-4(76mg,0.20mmol)后，
反应液在室温搅拌过夜，tlc监测反应完全后，之后反应液加入dcm(20ml)后用1nna2co3(10ml)和1n hcl(10ml)分别洗涤一遍，有机相干燥后，旋干得到粗品。粗品用柱层析纯化，洗脱剂极性v
dcm
:v
meoh
＝80：1到25：1洗脱，得到白固体256-6(127mg,产率：68.2％)，esi-ms(m/z)：1001.4[m+h]
+
。
[0306]
(5)(2r)-n-((2r)-6-氨基-1-(2-(六氢-1h-呋喃并[3，4-c]吡咯-5-羰基)-2，7-二氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)-1-氧代己-2-基)-2-((r)-2-((r)-2-氨基-3-苯丙酰氨基)-3-苯丙酰氨基)-4-甲基戊酰胺二三氟乙酸盐(256)的合成
[0307]
将256-6(127mg,0.13mmol)用二氯甲烷(4.5ml)溶解后，往溶液中加入三氟乙酸(1.5ml)，之后反应液在室温搅拌2个小时。tlc监测原料大部分消耗完，停止反应，反应液旋干后用乙醚(10ml)打浆，过滤，干燥后得到产品。目标化合物256为白固体(122mg,产率：93.4％)，esi-ms(m/z)：801.3[m+h]
+
。
[0308]1hnmr(400mhz,cd3od),δ7.39-7.21(m,10h),4.88(m,1h),4.73(m,1h),4.41(m,1h),4.11(m,1h),3.90(m,1h),3.83-3.58(m,10h),3.52-3.43(m,3h),3.29-3.21(m,2h),3.03-2.92(m,6h),1.43-1.45(m,13h)，0.99(d,3h),0.96(d,3h).
[0309]
实施例17：(2r)-n-((2r)-6-氨基-1-(2-(八氢环戊二烯并[c]吡咯-2-羰基)-2，7-二氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)-1-氧代己-2-基)-2-((r)-2-(r)-2-氨基-3-苯基丙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)-4-甲基戊酰胺儿三氟乙酸盐(343)的合成
[0310][0311]
(1)2-(八氢环戊二烯并[c]吡咯-2-羰基)-2，7-二氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁酯(343-3)的合成
[0312]
将256-2(400mg,1.16mmol)和343-2(154mg,1.39mmol)用dmso(6ml)溶解后，往反应液中加入k2co3(800mg,5.8mmol)之后反应液在105℃搅拌16小时，tlc监测反应完全后，反应液倒入冰水(30ml)中，再用二氯甲烷(10ml
×
3)萃取后，合并有机相并用饱和食盐水(10ml)洗涤两遍，有机相干燥后，旋干得到粗品。粗品用柱层析纯化，洗脱剂极性v
dcm
:v
meoh
＝60：1到20：1得到浅棕固体343-3(305mg,产率：71.7％)，esi-ms(m/z)：364.1[m+h]
+
。
[0313]
(2)(六氢环戊[c]吡咯-2(1h)-基)(2，7-二氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)甲酮(343-4)的合成
[0314]
将343-3(305mg,0.85mmol)用二氯甲烷(12ml)溶解后，往溶液中加入三氟乙酸(4ml)，之后反应液在室温搅拌2个小时。tlc监测原料大部分消耗完，停止反应，反应液直接旋干并用乙醚(10ml)打浆，过滤，干燥得到的目标化合物343-4为白固体(270mg,产率：85.2％)，esi-ms(m/z)：264.1[m+h]
+
。
[0315]
(3)(2r)-n-((2r)-6-叔丁氧基羰基氨基-1-(2-(八氢环戊二烯并[c]吡咯-2-羰基)-2，7-二氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)-1-氧代己-2-基)-2-((r)-2-((r)-2-叔丁氧基羰基氨基-3-苯基丙酰氨基)-3-苯基丙酰氨基)-4-甲基戊酰胺(343-6)的合成
[0316]
将1-1(150mg,0.20mmol)，hatu(91mg,0.24mmol)和diea(77mg,0.60mmol)用四氢呋喃(6ml)溶解后，反应液室温搅拌30分钟后，往反应液中加入343-4(83mg,0.22mmol)后，反应液在室温搅拌过夜，tlc监测反应完全后，之后反应液加入dcm(20ml)后用1nna2co3(10ml)和1n hcl(10ml)分别洗涤一遍，有机相干燥后，旋干得到粗品。粗品用柱层析纯化，洗脱剂极性v
dcm
:v
meoh
＝60：1到20：1得到白固体343-6(117mg,产率：58.9％)，esi-ms(m/z)：999.4[m+h]
+
。
[0317]
(4)(2r)-n-((2r)-6-氨基-1-(2-(八氢环戊二烯并[c]吡咯-2-羰基)-2，7-二氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)-1-氧代己-2-基)-2-((r)-2-(r)-2-氨基-3-苯基丙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)-4-甲基戊酰胺儿三氟乙酸盐(343)的合成
[0318]
将343-6(117mg,0.12mmol)用二氯甲烷(4.5ml)溶解后，往溶液中加入三氟乙酸(1.5ml)，之后反应液在室温搅拌2个小时。tlc监测原料大部分消耗完，停止反应，反应液旋干后用乙醚打浆，过滤，干燥后得到产品。目标化合物343为白固体(107mg,产率：89.0％)，esi-ms(m/z)：801.2[m+h]
+
。
[0319]1hnmr(400mhz,cd3od),δ7.37-7.23(m,10h),4.72(m,1h),4.39(m,1h),4.10(m,1h),3.81-3.41(m,9h),3.31-3.17(m,4h),3.09-2.92(m,4h),2.67(m,2h),1.85-1.45(m,21h)，0.99(d,3h),0.96(d,3h).
[0320]
实施例18：(r)-n-((r)-1-(2-((r)-1-乙酰基吡咯烷-2-羰基)-2，7-二氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)-6-氨基-1-氧代己-2-基)-2-((r)-2-((r)-2-氨基-3-苯基丙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)-4-甲基戊酰胺二三氟乙酸盐(354)的合成
[0321][0322]
(1)(r)-2-(1-乙酰吡咯烷-2-羰基)-2，7-二氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁酯(354-2)的合成
[0323]
将1(400mg,1.77mmol)，hatu(806mg,2.12mmol)和diea(457mg,3.54mmol)用四氢呋喃(12ml)溶解后，反应液室温搅拌30分钟后，往反应液中加入354-1(306mg,1.95mmol)后，反应液在室温搅拌过夜，tlc监测反应完全后，之后反应液加入dcm(20ml)后，用1nna2co3(10ml)和1n hcl(10ml)分别洗涤，有机相干燥后，旋干得到粗品。粗品用柱层析纯化，洗脱剂极性v
dcm
：v
meoh
＝80：1到30：1得到黄油状物354-2(611mg,产率：94.6％)，esi-ms(m/z)：366.1[m+h]
+
。
[0324]
(2)(r)-1-(2-(2，7-二氮杂螺[3.5]壬烷-2-羰基)吡咯烷-1-基)乙酮三氟乙酸盐(354-3)的合成
[0325]
将354-2(611mg,1.54mmol)用dcm(12ml)溶解后，往溶液中加入三氟乙酸(4ml)，之后反应液在室温搅拌3个小时。tlc监测原料大部分消耗完，停止反应，反应液旋干后用乙醚(10ml)打浆，过滤，干燥固体得到白固体354-3(594mg,产率：93.6％)，esi-ms(m/z)：266.1[m+h]
+
。
[0326]
(3)(r)-n-((r)-1-(2-((r)-1-乙酰基吡咯烷-2-羰基)-2，7-二氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)-6-叔丁氧基羰基氨基-1-氧代己-2-基)-2-((r)-2-((r)-2-叔丁氧基羰基氨基-3-苯基丙酰氨基)-3-苯基丙酰氨基)-4-甲基戊酰胺(354-5)的合成
[0327]
将1-1(148mg,0.19mmol)，hatu(87mg,0.23mmol)和diea(62mg,0.48mmol)用四氢呋喃(6ml)溶解后，反应液室温搅拌30分钟后，往反应液中加入354-3(82mg,0.20mmol)后，反应液在室温搅拌过夜，tlc监测反应完全后，之后反应液加入dcm(20ml)后，用1nna2co3(10ml)和1n hcl(10ml)分别洗涤，有机相干燥后，旋干得到粗品。粗品用柱层析纯化，洗脱剂极性v
dcm
：v
meoh
＝100：1到30：1得到白固体354-5(115mg,产率：58.5％)，esi-ms(m/z)：
1001.4[m+h]
+
。
[0328]
(4)(r)-n-((r)-1-(2-((r)-1-乙酰基吡咯烷-2-羰基)-2，7-二氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)-6-氨基-1-氧代己-2-基)-2-((r)-2-((r)-2-氨基-3-苯基丙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)-4-甲基戊酰胺二三氟乙酸盐(354)的合成
[0329]
将354-5(115mg,0.11mmol)用二氯甲烷(4.5ml)溶解后，往溶液中加入三氟乙酸(1.5ml)，之后反应液在室温搅拌3个小时。tlc监测原料大部分消耗完，停止反应，反应液旋干后用乙醚(10ml)打浆，固体过滤干燥得到产品。目标化合物354为白固体(83mg,产率：70.2％)，esi-ms(m/z)：801.3[m+h]
+
。
[0330]1hnmr(400mhz,cd3od),δ7.35-7.20(m,10h),4.70(m,1h),4.43-3.92(m,5h),3.82-3.35(m,8h),3.28-3.17(m,2h),3.01-2.90(m,4h),2.21-1.38(m,21h)，0.97(d,3h),0.93(d,3h).
[0331]
生物测试例
[0332]
对к阿片受体的激动活性
[0333]
forskolin(毛喉素)能够刺激人к阿片受体高表达细胞株-oprki细胞(discoverx)camp的释放，而к阿片受体激动剂能够抑制forskolin刺激的camp释放。通过检测受试化合物对forskolin刺激的camp释放的抑制作用，能够测定化合物对人к阿片受体的激动活性。首先用一定浓度的forskolin和不同浓度的受试化合物与人高表达к阿片受体细胞株一起孵育。使用基于时间分辨荧光共振能量转移(tr-fret)的camp免疫测试法(lanceperkinelmer)来确定所激发的oprk1细胞中的camp水平。具体方法如下：
[0334]
检测缓冲液：1
×
stimulation buffer，500μm ibmx，ddh2o。化合物配制：化合物用dmso溶解后配制为终浓度为10mm的母液，稀释成2mm的工作浓度，用echo对化合物进行4倍梯度稀释，初始浓度为2mm，10个浓度梯度，并分别加50nl到384细胞板中，双复孔，终浓度为10μm，然后将细胞板1000rpm离心1min；用echo转移50nlforskolin(终浓度是3μm)至384细胞板。
[0335]
细胞铺板：将冻存的细胞融化，1000转离心5min,弃掉上清液，用hbss缓冲液清洗两次细胞后，用检测缓冲液重悬细胞，将细胞密度调整到3.0
×
105个/ml，加入至384孔板中，每孔10μl，3000个细胞。震荡20s，1000rpm离心1min，将细胞板放入23℃孵箱中培养60min。标准曲线的配制：用检测缓冲液对标准品camp进行4倍梯度稀释，共8个浓度点，最高浓度是800nm，按照微孔板布局图每孔加入10μl。检测试剂配制：用裂解缓冲液将anti camp-cryptate和amp-d2稀释至1
×
，按照微孔板布局图，每孔加入10μl检测试剂，震荡20s，1000rpm离心1min，将细胞板放入23℃孵箱中培养60min。最后在envision上读板。
[0336]
运用microsoft excel软件计算活性百分比，对于激动剂使用公式％effect＝100
×
(sample raw value-low control average)/(high control average-low control average)。运用graphpad prism 5数据分析软件，对于激动剂选用dose-response-stimulation—log[agonist]vs.response
‑‑
variable slope模式进行拟合分析，得出各检测样品的ec
50
值。其中对照组1(cr-845，制备方法参考专利cn101535336a)和对照组2(制备方法参考专利wo2019015644a1)分别具有如下结构，实验数据见表1。
[0337][0338]
表1：受试化合物对к阿片受体的激动活性
[0339]
化合物编号ec
50
(nm)1670.0058111680.0062911760.042291980.24112150.052562290.0082152300.35462390.046432560.0018392650.026463370.42663430.464cr8450.06232对照组20.01154
[0340]
结论：通过以上ec
50
结果可见，本发明的实施例化合物对к阿片样物质受体具有优异的激动效能。本发明的其他化合物对к阿片样物质受体具有类似优异的激动效能。
[0341]
大鼠pk实验
[0342]
化合物单次静脉给药(溶媒5％dmso+10％solutol(hs-15)+85％saline)于雄性sd大鼠(给药剂量1mg/kg，每组6只)，在固定的时间点取血。血样采集后，立即温和地颠倒试管至少5次，保证混合充分后放置于冰上。血液用肝素抗凝，然后8000rpm离心5分钟，将血清与红细胞分离。用移液器吸岀血清转移至2ml的聚丙烯管，标明化合物的名称和时间点，在进行lc-ms分析前保存在-80℃冰箱，待测。样品处理后，用lcms/ms对血浆中的物质进行定量分析。通过进行了验证的药动学计算机程序，用以这种方式获得的血浆浓度/时曲线来计算药动学参数，实验数据见表2：
[0343]
表2：受试化合物对大鼠pk结果
[0344]
化合物编号给药方式(t
1/2
,h)auclast(h*ng/ml)265iv0.22420.9256iv0.14392.7168iv0.2194.4
[0345]
结论：本发明化合物具有较好的药代动力学性质。
[0346]
以上所述实施例的各技术特征可以进行任意的组合，为使描述简洁，未对上述实施例中的各个技术特征所有可能的组合都进行描述，然而，只要这些技术特征的组合不存在矛盾，都应当认为是本说明书记载的范围。
[0347]
以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。

技术特征：

1.式(ii)所示结构的化合物、其药学上可接受的盐、或其立体异构体：x1和x2中，有一个为ch2，一个为nr，其中，r为a为r1和r2各自独立地为：h、c
1-6
烷基、-(ch2)
n1-o-[(ch2)
n2-o]
n3-r
a
或-(ch2)
n4-nr
b
r
c
；n1、n2、n3、n4各自独立地为1、2、3、4或5；y1为单键、cr
11
r
12
、o、s、-(cr
11
＝cr
12
)-或-nh-；r
11
和r
12
各自独立地选自：h、c
1-4
烷基、苯基、5-6元杂芳基或卤素；所述c
1-4
烷基、苯基、5-6元杂芳基任选进一步被以下基团取代；卤素、氰基、羟基、苯基、-nr
b
r
c
、-cor
d
、-coor
d
或-conr
b
r
c
；b选自：3-10元环烷基、3-10元杂环基、5-10元芳基或5-10元杂芳基；r0为b上取代基，m1为0、1、2、3、4、5或6；r0每次出现时，各自独立地选自：c
1-4
烷基、c
1-4
烷氧基、卤素、氰基、羟基、苯基、5-6元杂芳基、＝o、-nr
b
r
c
、-cor
d
、-coor
d
、-conr
b
r
c
或-nhcor
d
；所述c
1-4
烷基、c
1-4
烷氧基、苯基、5-6元杂芳基任选进一步被以下取代基取代：卤素、氰基、羟基或苯基；r
a
为c
1-4
烷基；r
b
、r
c
各自独立地选自：h、c
1-4
烷基或c
1-4
烷氧基；r
d
选自：h或c
1-4
烷基。2.根据权利要求1所述的化合物、其药学上可接受的盐、或其立体异构体，其特征在于，所述b选自：3-8元单环烷基、5-6元环烷基并苯基、5-6元单杂环基、5-6元杂环基并5-6元杂环基、5-6元环烷基并5-6元杂环基、5-6元杂环基并苯基、5-6元杂环基并5-6元杂芳基、6-10元芳基、或5-10元杂芳基。3.根据权利要求1所述的化合物、其药学上可接受的盐、或其立体异构体，其特征在于，选自以下任一通式所示化合物：
b1选自：3-8元单环烷基、5-6元环烷基并苯基、5-6元单杂环基、5-6元杂环基并5-6元杂环基、5-6元环烷基并5-6元杂环基、5-6元杂环基并苯基、6-10元芳基、或5-10元杂芳基；b2选自：6-10元芳基或5-10元杂芳基；b3选自：6-10元芳基或5-10元杂芳基；b4选自：6-10元芳基或5-10元杂芳基。4.根据权利要求2或3所述的化合物、其药学上可接受的盐、或其立体异构体，其特征在于，3-8元单环烷基选自：环丙基、环丁基、环戊基、环戊烯基、环己基、环己烯基、环己二烯基、环庚基、环庚三烯基、或环辛基；5-6元单杂环基选自：氮丙环基、环氧乙烷基、氮杂环丁烷基、氧杂环丁烷基、恶唑烷基、1,3-二氧戊环基、二氧六环基、咪唑烷基、四氢呋喃基、四氢噻吩基、四氢吡咯基、基、哌嗪基、吗啉基、硫代吗啉基、硫代吗啉-1,1-二氧化物基、四氢吡喃基、1,3-恶嗪烷基、六氢嘧啶基、1,4-二恶烷基、1,4-氧氮杂环庚烷基、1,3-氧氮杂环庚烷基、1,2-二氢氮杂环丁二烯基、2,5-二氢-1h-吡咯基、2,3-二氢-1h-吡咯基、1,2,3,4-四氢吡啶基、1,2,3,6-四氢吡啶基、2-吡咯烷酮基或2-酮基；5-6元杂环基并5-6元杂环基选自以下任一基团：5-6元环烷基并5-6元杂环基选自以下任一基团：
5-6元环烷基并苯基选自：环戊基并苯基、或环己基并苯基；5-6元杂环基并苯基以下任一基团：6-10元芳基选自：苯或萘；5-10元杂芳基选自：噻吩、呋喃、噻唑、异噻唑、咪唑、噁唑、吡咯、吡唑、三唑、1,2,3-三唑、1,2,4-三唑、1,2,5-三唑、1,3,4-三唑、四唑、异噁唑、噁二唑、1,2,3-噁二唑、1,2,4-噁二唑、1,2,5-噁二唑、1,3,4-噁二唑、噻二唑、吡啶、哒嗪、嘧啶、吡嗪或以下任一基团：5.根据权利要求1所述的化合物、其药学上可接受的盐、或其立体异构体，其特征在于，r0每次出现时，各自独立地选自：c
1-4
烷基、卤素、-ocf3、-nh2、-coor
d
或-conr
b
r
c
。6.根据权利要求1所述的化合物、其药学上可接受的盐、或其立体异构体，其特征在于，选自以下任一基团：
z为nh、o、s、cr
h
r
j
或c＝o；w为cr
h
或n；v为cr
h
或n；且相邻的两个z不同时为杂原子；r
h
和r
j
各自独立地选自：h、c
1-4
烷基、c
1-4
烷氧基、卤素、氰基、羟基、苯基、5-6元杂芳基、-nr
b
r
c
、-cor
d
、-coor
d
、-conr
b
r
c
或-nhcor
d
；所述c
1-4
烷基、c
1-4
烷氧基、苯基、5-6元杂芳基任选进一步被以下取代基取代：卤素、氰基、羟基、苯基、-nr
b
r
c
或-coor
d
。7.根据权利要求1所述的化合物、其药学上可接受的盐、或其立体异构体，其特征在于，选自以下任一结构：8.根据权利要求1所述的化合物、其药学上可接受的盐、或其立体异构体，其特征在于，-nr1r2选自：-nh2、-nh-(ch2)
2-o-(ch2)
2-o-r
a
、-nh(ch2)
3-nr
b
r
c
或-nh(ch2)
4-nr
b
r
c
；r
a
为c
1-3
烷基；r
b
、r
c
各自独立地选自：h或c
1-3
烷基。9.根据权利要求1所述的化合物、其药学上可接受的盐、或其立体异构体，其特征在于，选自以下任一化合物：
10.权利要求1-9任一项所述的化合物、药学上可接受的盐、其立体异构体、或共晶在制备或预防к阿片样物质受体相关的疾病或病况的药物的应用，所述к阿片样物质受体相关的疾病选自疼痛、炎症、瘙痒、水肿、低钠血症、低钾血症、肠梗阻、咳嗽和青光眼。

技术总结

本发明涉及肽酰胺类化合物、其药学上可接受的盐、立体异构体及其应用，其中环状基团取代多酰胺化合物具有式(II)所示结构上述化合物具有较优的к阿片样受体激动活性。较优的к阿片样受体激动活性。

技术研发人员：

龙菁 刘军华 李泽华 粟肖为 王衡新 邓俐丽 宋志林

受保护的技术使用者：

天地恒一制药股份有限公司

技术研发日：

2022.08.17

技术公布日：

2023/2/20