一种包含几丁寡糖和抗生素的组合物及其应用的制作方法

1.本发明涉及杀生剂技术领域，尤其涉及一种包含几丁寡糖和抗生素的组合物及其应用。

背景技术：

2.在农业生产的过程中，作物病害是导致农作物减产的重要原因。针对这一状况，施用各类农药进行防治是当今该领域常见的手段。然而周期性施药也带来了诸如耐药性上升、环境破坏的问题，单一的农药已愈发难以满足对病害的防治需求。因此，新型的复合型农药组合物的开发对农业可持续发展具有重要意义。
3.中国专利cn102302037a公开了一种含有壳寡糖的杀菌剂农药组合物，包括组分a和组分b，所述组分a为壳寡糖或壳寡糖衍生物，组分b选自活性化合物中的其中一种或几种，该农药组合物产生协同增效作用，减少化学合成杀菌剂的用量，克服或延缓了杀菌剂抗药性；提高作物自身的抗逆性，提高作物产量；调节植物体内部代谢平衡，提高农产品的品质；增强了杀菌剂施用安全性，对生态环境和人类更加安全。
4.中国专利cn103609572a提供了一种含有四霉素与氨基寡糖素的杀菌组合物，该杀菌组合物的有效成分四霉素与氨基寡糖素两元复配，其余为辅助成分。其中所述农药组合物中有效成分四霉素与氨基寡糖素的质量比为1～50：50～1，制剂中有效成分四霉素与氨基寡糖素的质量份数比0.1％～50％，其余为农药中允许使用和接受的辅助成分，本发明所述农药组合物的剂型为乳油、悬浮剂、可湿性粉剂、水分散粒剂、水乳剂、微乳剂、颗粒剂、微胶囊剂、水剂，可广泛用于防治果树、蔬菜、地下根茎、烟草、中药材及粮棉作物的病毒、细菌、真菌引起的花叶病、小叶病、斑点病、病、霜霉病、疫病、蔓枯病、黄矮病、稻瘟病、青枯病、软腐病、腐烂病；根腐病、枯萎病等病害。
5.由n-乙酰氨基葡萄糖和氨基葡萄糖组成，聚合度小于20，分子量小于3.9kd的糖链分子称为几丁类寡糖。其中，脱乙酰度大于70％的称为壳寡糖，或氨基寡糖素；脱乙酰度小于50％的称为几丁寡糖。上述专利采用壳寡糖制备杀菌剂农药组合物，然而壳寡糖在植物上的特异性受体少，其活性的重要基础为高度脱乙酰化暴露的氨基所携带的正电荷，故壳寡糖十分依赖此特性与细胞膜结合来发挥作用，这使得壳寡糖在该领域中的应用大大受限。相比之下，几丁寡糖具有较强的植物诱导活性，与相同聚合度的壳寡糖相比活性更好。与壳寡糖植物免疫诱导作用机制不同的是，几丁寡糖的活性更高的原因或在于其主要由n-乙酰氨基葡萄糖组成，而单糖上的乙酰基团对于寡糖与受体的结合至关重要；因此，更高聚合度的几丁寡糖往往活性更强。然而几丁寡糖脱乙酰度较低，在水和有机溶液中的溶解性均很低，在水分散系中容易聚集；此外，由于植物表面脂质层的存在，几丁寡糖作用于植物后容易受到环境因素如风、雨水等的影响而流失，难以在植物表面长效附着，影响了几丁寡糖在本领域中的进一步应用。

技术实现要素：

6.有鉴于现有技术的上述缺陷，本发明所要解决的问题是提供一种防治效果优异、在作物表面附着性好的包含几丁寡糖和抗生素的组合物。
7.一种包含几丁寡糖和抗生素的组合物，包括如下质量百分比的原料：
8.几丁寡糖0.1～10％、抗生素1～10％、防腐剂2～5％、增效剂2～5％，余量为水。
9.优选的，所述几丁寡糖的聚合度小于20，分子量小于3.9kd，脱乙酰度小于50％。
10.优选的，所述抗生素为春雷霉素、四霉素中的任意一种。
11.优选的，所述防腐剂为山梨酸钾、苯甲酸、苯甲酸、苯甲酸钠中的至少一种。
12.优选的，所述增效剂为ls-408、还原响应型增效剂中的任意一种。
13.为了解决几丁寡糖在水分散系中分散不佳以及难以附着于植物表面的技术问题，本发明制备了一种还原响应型增效剂。该还原响应型增效剂以4-巯基丁酸为初始原料，经酰卤化后与月桂胺发生取代反应，引入了亲脂性的长烷烃链；随后以二甲基亚砜作为氧化剂，使取代产物与4-巯基丁酸发生氧化反应，4-巯基丁酸与取代产物的巯基之间氧化形成二硫键，而4-巯基丁酸另一端的羧基经活化后与盐酸多巴胺的胺基发生酰胺化反应，引入邻苯二酚基团。
14.为了防止邻苯二酚基团在制备过程中发生氧化，本发明将盐酸多巴胺溶液在四硼酸钠和碳酸氢钠的溶液中，通过形成硼酸络合物的方式来保护邻苯二酚基团；当反应接近完成时，通过调节产物的ph来脱保护邻苯二酚基团。由于避免了该基团的氧化，制备的还原响应型增效剂具有邻苯二酚基团的一端表现出良好的粘附性，与几丁寡糖的结合性强；而另一端亲脂性的长烷烃链与植物表面具有相似结构的蜡层可以更好地匹配，进而增加了几丁寡糖在作物表面上的粘附性。
15.进一步优选的，所述还原响应型增效剂的制备方法如下，以重量份计：
16.m1、将0.9～1.6份4-巯基丁酸与2.7～4.6份氯化亚砜混合均匀，升温并进行酰卤化反应；反应结束后经减压蒸馏去除氯化亚砜，剩余物经干燥后溶于100～200份四氢呋喃，过滤得滤液，随后经旋蒸处理去除四氢呋喃，得到纯化酰卤化产物，备用；
17.m2、另取1.2～2份所述纯化酰卤化产物溶于25～50份四氢呋喃，得到酰氯溶液；将1.4～2.4份月桂胺溶于50～100份无水乙醇，随后加入0.25～0.50mol/l的氢氧化钠水溶液调节该溶液的ph至8～10，得到月桂胺反应溶液；降低温度并将所述酰氯溶液在15～30min内匀速滴加至所述月桂胺反应溶液以进行取代反应，反应结束后经旋蒸处理去除无水乙醇、四氢呋喃及水，得到取代粗产物；所述取代粗产物经水洗、干燥，得到纯化取代产物，备用；
18.m3、另取2.2～3.7份所述纯化取代产物、0.9～1.6份4-巯基丁酸与100～200份水混合，向该混合物中加入0.6～1份二甲基亚砜作为氧化剂，随后在氮气通风条件下升温进行氧化反应，反应结束后，产物经冷冻干燥，得到氧化产物，备用；
19.m4、将3.1～5.2份所述氧化产物与50～100份n-甲基吡咯烷酮混合，随后加入0.4～0.7份二环己基碳二亚胺、0.05～0.08份n-羟基琥珀酰亚胺，混合均匀进行活化，得到活化反应液；将0.9～1.5份四硼酸钠、0.4～0.6份碳酸氢钠溶于25～75份n-甲基吡咯烷酮，随后加入1.5～2.5份盐酸多巴胺，混合均匀后加入所述活化反应液，在无氧条件下进行酰胺化反应；反应结束后，加入0.5～1mol/l的盐酸调节产物的ph至2～4，随后倒入过量0～4℃
的水中，经过滤收集滤饼、干燥，得到所述还原响应型增效剂。
20.优选的，步骤m1中所述酰卤化反应的温度为85～95℃，反应时间为6～18h。
21.优选的，步骤m2中所述取代反应的温度为0～4℃，反应时间为0.5～1.5h。
22.优选的，步骤m3中所述氧化反应的温度为90～120℃，反应时间为6～12h。
23.优选的，步骤m4中所述活化的温度为55～65℃，活化时间为1～3h。
24.优选的，步骤m4中所述酰胺化反应的温度为室温，反应时间为6～12h。
25.现有产品促进几丁寡糖附着于植物表面时，几丁寡糖的释放是难以控制的，容易经时流失；也就是说，当植物出现病害时，几丁寡糖的释放量不一定能够满足防治的需求。而本发明中，几丁寡糖与还原响应型增效剂结合后对病害处具有响应能力。发明人发现，作物病害处出现的局部坏死会产生特殊的微环境，在病原菌致病的早期，植物体内抗氧化酶的活性上升，使谷胱甘肽的含量明显增加，从而营造了具有还原性的微环境。还原响应型增效剂中的二硫键在上述微环境下发生还原反应形成巯基，分子链发生断裂，使一端附着的几丁寡糖变为游离态释放到患处，及时发挥防治的效果。
26.在符合本领域常识的基础上，上述各优选条件，可以任意组合，即得本发明各较佳实施例。
27.本发明配方中部分原料的介绍及作用如下：
28.几丁寡糖：由n-乙酰氨基葡萄糖和氨基葡萄糖组成，聚合度小于20，分子量小于3.9kd的糖链分子称为几丁类寡糖。其中，脱乙酰度大于70％的称为壳寡糖，或氨基寡糖素；脱乙酰度小于50％的称为几丁寡糖。
29.春雷霉素：有机化合物，化学式为c
14h25
n3o9，常用作农用杀菌剂，对水稻上的稻瘟病有优异防效和作用，对防治西瓜细菌性角斑病，桃树流胶病，疮痂病，穿孔病等病害有特效。
30.四霉素：杀菌剂，微生物农药，杀菌谱广，对鞭毛菌、子囊菌和半知菌亚门真菌等三大门类二十六种已知病原真菌均有极强的杀灭作用。适用各种农作物多种真菌病害的防治。尤其对果树腐烂病、斑点落叶病；棉花黄(枯)萎病；大豆根腐病；水稻纹枯病、苗期立枯病。
31.本发明的有益效果：
32.与现有技术相比，本发明将脱乙酰度小于50％的几丁寡糖与抗生素复合使用，其生物安全性高、人畜无害、性价比高、使用方便，具有协同增效、提高靶标病害防效的特点。
33.相比于现有技术，本发明制备并使用了一种还原响应型增效剂，该还原响应型增效剂的一端具有亲脂性的长烷烃链，另一端具有邻苯二酚基团，中部以二硫键连接；与几丁寡糖结合性好，增加了几丁寡糖的分散型，施药后在作物表面上的粘附性强。
34.相比于现有技术，本发明中几丁寡糖与还原响应型增效剂结合后对病害处具有响应能力，还原响应型增效剂中的二硫键在病害产生的还原性微环境下发生还原反应形成巯基，使分子链发生断裂，让一端附着的几丁寡糖变为游离态释放到患处，可以及时发挥防治效果。
具体实施方式
35.下面通过实施例的方式进一步说明本发明，但并不因此将本发明限制在所述的实
施例范围之中。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，按照常规方法和条件，或按照商品说明书选择。
36.本发明对照例及实施例中部分原材料参数如下：
37.几丁寡糖，聚合度＜20，分子量＜3.9kd，脱乙酰度：30～40％，赫澎(上海)生物科技有限公司提供；
38.春雷霉素，cas号：6980-18-3，日本北兴化学工业株式会社提供；
39.四霉素，cas号：11076-50-9，湖北玖丰隆化工有限公司提供；
40.ls-408，济南绿赛化工有限公司提供；
41.4-巯基丁酸，cas号：13095-73-3，湖北实兴化工有限公司提供；
42.月桂胺，cas号：124-22-1，江苏普乐司生物科技有限公司提供；
43.盐酸多巴胺，cas号：62-31-7，深圳振强生物技术有限公司提供。
44.实施例1
45.一种包含几丁寡糖和抗生素的组合物，包括如下质量百分比的原料：几丁寡糖5％、春雷霉素2％、山梨酸钾2％，余量为水。
46.实施例2
47.一种包含几丁寡糖和抗生素的组合物，包括如下质量百分比的原料：几丁寡糖5％、四霉素1.5％、山梨酸钾2％，余量为水。
48.实施例3
49.一种包含几丁寡糖和抗生素的组合物，包括如下质量百分比的原料：几丁寡糖5％、春雷霉素2％、山梨酸钾2％、ls-408 3％，余量为水。
50.实施例4
51.一种包含几丁寡糖和抗生素的组合物，包括如下质量百分比的原料：几丁寡糖5％、春雷霉素2％、山梨酸钾2％、还原响应型增效剂3％，余量为水。
52.所述还原响应型增效剂的制备方法如下：
53.m1、将0.9kg 4-巯基丁酸与2.7kg氯化亚砜混合均匀，升温并进行酰卤化反应，酰卤化反应的温度为90℃，反应时间为12h；反应结束后经减压蒸馏去除氯化亚砜，剩余物经干燥后溶于100kg四氢呋喃，过滤得滤液，随后经旋蒸处理去除四氢呋喃，得到纯化酰卤化产物，备用；
54.m2、另取1.2kg所述纯化酰卤化产物溶于25kg四氢呋喃，得到酰氯溶液；将1.4kg月桂胺溶于50kg无水乙醇，随后加入0.50mol/l的氢氧化钠水溶液调节该溶液的ph至8，得到月桂胺反应溶液；降低温度并将所述酰氯溶液在30min内匀速滴加至所述月桂胺反应溶液以进行取代反应，取代反应的温度为0℃，反应时间为1h；反应结束后经旋蒸处理去除无水乙醇、四氢呋喃及水，得到取代粗产物；所述取代粗产物经水洗、干燥，得到纯化取代产物，备用；
55.m3、另取2.2kg所述纯化取代产物、0.9kg 4-巯基丁酸与100kg水混合，向该混合物中加入0.6kg二甲基亚砜作为氧化剂，随后在氮气通风条件下升温进行氧化反应，氧化反应的温度为110℃，反应时间为8h；反应结束后，产物经冷冻干燥，得到氧化产物，备用；
56.m4、将3.1kg所述氧化产物与50kg n-甲基吡咯烷酮混合，随后加入0.4kg二环己基碳二亚胺、0.05kg n-羟基琥珀酰亚胺，混合均匀进行活化，活化的温度为60℃，活化时间为
2h，得到活化反应液；将1.5kg盐酸多巴胺加至50kg n-甲基吡咯烷酮，混合均匀后加入所述活化反应液，在无氧条件下进行酰胺化反应，酰胺化反应的温度为室温，反应时间为8h；反应结束后，倒入过量0℃的水中，经过滤收集滤饼、干燥，得到所述还原响应型增效剂。
57.实施例5
58.一种包含几丁寡糖和抗生素的组合物，包括如下质量百分比的原料：几丁寡糖5％、春雷霉素2％、山梨酸钾2％、还原响应型增效剂3％，余量为水。
59.所述还原响应型增效剂的制备方法如下：
60.m1、将0.9kg 4-巯基丁酸与2.7kg氯化亚砜混合均匀，升温并进行酰卤化反应，酰卤化反应的温度为90℃，反应时间为12h；反应结束后经减压蒸馏去除氯化亚砜，剩余物经干燥后溶于100kg四氢呋喃，过滤得滤液，随后经旋蒸处理去除四氢呋喃，得到纯化酰卤化产物，备用；
61.m2、另取1.2kg所述纯化酰卤化产物溶于25kg四氢呋喃，得到酰氯溶液；将1.4kg月桂胺溶于50kg无水乙醇，随后加入0.50mol/l的氢氧化钠水溶液调节该溶液的ph至8，得到月桂胺反应溶液；降低温度并将所述酰氯溶液在30min内匀速滴加至所述月桂胺反应溶液以进行取代反应，取代反应的温度为0℃，反应时间为1h；反应结束后经旋蒸处理去除无水乙醇、四氢呋喃及水，得到取代粗产物；所述取代粗产物经水洗、干燥，得到纯化取代产物，备用；
62.m3、另取2.2kg所述纯化取代产物、0.9kg 4-巯基丁酸与100kg水混合，向该混合物中加入0.6kg二甲基亚砜作为氧化剂，随后在氮气通风条件下升温进行氧化反应，氧化反应的温度为110℃，反应时间为8h；反应结束后，产物经冷冻干燥，得到氧化产物，备用；
63.m4、将3.1kg所述氧化产物与50kg n-甲基吡咯烷酮混合，随后加入0.4kg二环己基碳二亚胺、0.05kg n-羟基琥珀酰亚胺，混合均匀进行活化，活化的温度为60℃，活化时间为2h，得到活化反应液；将0.9kg四硼酸钠、0.4kg碳酸氢钠溶于50kg n-甲基吡咯烷酮，随后加入1.5kg盐酸多巴胺，混合均匀后加入所述活化反应液，在无氧条件下进行酰胺化反应，酰胺化反应的温度为室温，反应时间为8h；反应结束后，加入0.5mol/l的盐酸调节产物的ph至4，随后倒入过量0℃的水中，经过滤收集滤饼、干燥，得到所述还原响应型增效剂。
64.测试例1
65.比较几丁寡糖和春雷霉素、四霉素复合的杀菌效果及确定最佳杀菌效果的比例：
66.几丁寡糖对稻瘟病菌抑制作用：采用菌丝生长抑制法。按照相应试验比例分别配制成含药要求的系列浓度pda培养基平板和不加药(加等量无菌水)的pda培养基平板(ck空白对照)。试验时，平板中央接入培养好的稻瘟病菌菌饼，25℃培养8d后测量菌落直径，每个处理5次重复。计算各处理平均直径，并求出各个处理及浓度对病菌菌落生长的抑制率。计算出供试药剂对稻瘟病菌的抑制中浓度(ec50)。
67.几丁寡糖及其复配杀菌剂对稻瘟病菌抑制作用：采用菌丝生长抑制法，按照相应试验比例分别配制或混配成含药要求的系列浓度pda培养基平板和不加药(加等量无菌水)的pda培养基平板(ck空白对照)。试验时，平板中央接入培养好的稻瘟病菌菌饼，25℃培养8d后测量菌落直径，每个处理5次重复。计算各处理平均直径，并求出各个处理及浓度对病菌菌落生长的抑制率。计算出供试药剂对稻瘟病菌的抑制中浓度(ec50)。
68.上述各试验比例及名称见表1。
69.表1
[0070][0071]
育苗三叶一心喷施药剂后接种稻瘟病菌：用稻瘟病菌孢子悬浮液喷雾接种法。保护作用试验在药剂处理后24h接种；作用试验在药剂处理前24h接种，每个处理3次重复。待空白对照病叶率达到50％以上时，根据调查数据计算各处理的病情指数和防治效果。
[0072]
稻瘟病分级标准：
[0073]
0级：整株无病；
[0074]
1级：出现褐点病斑；
[0075]
3级：出现典型纺锤形病斑，病斑面积占整叶面积的5％以下；
[0076]
5级：典型病斑，病斑面积占整叶面积的6％～25％；
[0077]
7级：典型病斑，病斑面积占整叶面积的50％以上。
[0078]
几丁寡糖对稻瘟病菌抑制作用结果见表2；杀菌剂对稻瘟病菌的毒力测定结果见表3；几种杀菌剂和几丁寡糖混配对稻瘟病菌抑制作用结果见表4；几种杀菌剂和几丁寡糖混配对稻瘟病的防治效果结果见表5。
[0079]
表2：
[0080][0081]
表3：
[0082][0083]
表4：
[0084][0085]
表5：
[0086][0087]
通过上述测试结果可以看出，6个浓度的几丁寡糖对稻瘟病菌都具有一定的抑制作用，随着浓度的增大，抑制率不断增加。将5％几丁寡糖与2％春雷霉素或1.5％四霉素进行复合，相比于单一成分具有更好的防治效果。
[0088]
测试例2
[0089]
本发明包含几丁寡糖和抗生素的组合物防治水稻稻瘟病田间药效试验：设计小区试验，共计5组，每组进行3次重复，于水稻分蘖盛期稻瘟病发生初期，每隔7天施药1次，连续用药3次，每次施药用量为150ml/亩；在水稻第三次用药后7天和14天，调查各小区发病情况，各小区取3点，每点调查50株，记载发病病株和严重度(计算发病率、病情指数和防病效果)。试验品种为松粳9，病害级别调查方法参考表6。病情指数计算公式如下：
[0090][0091]
表7：
[0092][0093]
包含几丁寡糖和抗生素的组合物防治水稻稻瘟病田间药效试验结果见表8。
[0094]
表8：
[0095][0096][0097]
通过上述实施例间的对比可以看出，实施例5对水稻稻瘟病具有最佳的田间防治效果。产生这种现象的原因可能在于，实施例4、5制备的还原响应型增效剂具有邻苯二酚基团的一端表现出良好的粘附性，与几丁寡糖的结合性强；而另一端亲脂性的长烷烃链与植物表面具有相似结构的蜡层可以更好地匹配，进而增加了几丁寡糖在作物表面上的粘附性。在病原菌致病的早期，植物体内抗氧化酶的活性上升，使谷胱甘肽的含量明显增加，从
而营造了具有还原性的微环境。还原响应型增效剂中的二硫键在上述微环境下发生还原反应形成巯基，分子链发生断裂，使一端附着的几丁寡糖变为游离态释放到患处，及时发挥防治的效果。与实施例4相比，实施例5的效果更佳，产生这种现象的原因可能在于，实施例5将盐酸多巴胺溶液在四硼酸钠和碳酸氢钠的溶液中，通过形成硼酸络合物的方式来保护邻苯二酚基团；当反应接近完成时，通过调节产物的ph来脱保护邻苯二酚基团。由于避免了该基团的氧化。
[0098]
测试例3
[0099]
包含几丁寡糖和抗生素的组合物在作物叶面的粘附性测试参考文献(袁会珠，齐淑华，代斌.药液在作物叶片的流失点和最大稳定持留量研究[j].农药学学报，2000，2(4)：66-71.doi：10.3321/j.issn:1008-7303.2000.04.012.)中的具体方法与步骤进行。粘附性通过最大稳定持流量来表征。试验采用浸渍法，剪取水稻叶片,用天平称重得w0(g)，而后用摄子夹持垂直放入清水中3～5s，迅速把叶片拉出水面，垂直悬置，待其不再有液滴流消时称重得w1(g)，测定叶片面积s(cm2)，按照如下公式计算叶片的最大稳定持留量rm(mg/cm2)：
[0100][0101]
包含几丁寡糖和抗生素的组合物在作物叶面的粘附性测试结果见表9。
[0102]
表9：
[0103]
名称最大稳定持留量(mg/cm2)实施例110.8实施例333.1实施例446.4实施例557.2
[0104]
最大稳定持留量反映了包含几丁寡糖和抗生素的组合物在水稻作物叶面的黏附程度，最大稳定持留量的数值越高则黏附性能越强。通过上述实施例的对比可以看出，采用了还原响应型增效剂能够增加对叶面的粘附。产生这种现象的原因可能在于，还原响应型增效剂中的邻苯二酚基结构具有良好的粘附性，而亲脂性的长烷烃链与叶面脂质层的亲和性好，附着能力强，进而提升了最大稳定持留量。

技术特征：

1.一种包含几丁寡糖和抗生素的组合物，其特征在于，包括如下质量百分比的原料：几丁寡糖0.1～10％、抗生素1～10％、防腐剂2～5％、增效剂2～5％，余量为水；所述抗生素为春雷霉素、四霉素中的任意一种。2.根据权利要求1所述的一种包含几丁寡糖和抗生素的组合物，其特征在于：所述几丁寡糖的聚合度小于20，分子量小于3.9kd，脱乙酰度小于50％。3.根据权利要求1所述的一种包含几丁寡糖和抗生素的组合物，其特征在于：所述防腐剂为山梨酸钾、苯甲酸、苯甲酸、苯甲酸钠中的至少一种。4.根据权利要求1所述的一种包含几丁寡糖和抗生素的组合物，其特征在于：所述增效剂为ls-408、还原响应型增效剂中的任意一种。5.根据权利要求4所述的一种包含几丁寡糖和抗生素的组合物，其特征在于，所述还原响应型增效剂的制备方法如下，以重量份计：m1、将0.9～1.6份4-巯基丁酸与2.7～4.6份氯化亚砜混合均匀，升温并进行酰卤化反应；反应结束后经减压蒸馏去除氯化亚砜，剩余物经干燥后溶于100～200份四氢呋喃，过滤得滤液，随后经旋蒸处理去除四氢呋喃，得到纯化酰卤化产物，备用；m2、另取1.2～2份所述纯化酰卤化产物溶于25～50份四氢呋喃，得到酰氯溶液；将1.4～2.4份月桂胺溶于50～100份无水乙醇，随后加入0.25～0.50mol/l的氢氧化钠水溶液调节该溶液的ph至8～10，得到月桂胺反应溶液；降低温度并将所述酰氯溶液在15～30min内匀速滴加至所述月桂胺反应溶液以进行取代反应，反应结束后经旋蒸处理去除无水乙醇、四氢呋喃及水，得到取代粗产物；所述取代粗产物经水洗、干燥，得到纯化取代产物，备用；m3、另取2.2～3.7份所述纯化取代产物、0.9～1.6份4-巯基丁酸与100～200份水混合，向该混合物中加入0.6～1份二甲基亚砜作为氧化剂，随后在氮气通风条件下升温进行氧化反应，反应结束后，产物经冷冻干燥，得到氧化产物，备用；m4、将3.1～5.2份所述氧化产物与50～100份n-甲基吡咯烷酮混合，随后加入0.4～0.7份二环己基碳二亚胺、0.05～0.08份n-羟基琥珀酰亚胺，混合均匀进行活化，得到活化反应液；将0.9～1.5份四硼酸钠、0.4～0.6份碳酸氢钠溶于25～75份n-甲基吡咯烷酮，随后加入1.5～2.5份盐酸多巴胺，混合均匀后加入所述活化反应液，在无氧条件下进行酰胺化反应；反应结束后，加入0.5～1mol/l的盐酸调节产物的ph至2～4，随后倒入过量0～4℃的水中，经过滤收集滤饼、干燥，得到所述还原响应型增效剂。6.根据权利要求5所述的一种包含几丁寡糖和抗生素的组合物，其特征在于：步骤m1中所述酰卤化反应的温度为85～95℃，反应时间为6～18h。7.根据权利要求5所述的一种包含几丁寡糖和抗生素的组合物，其特征在于：步骤m2中所述取代反应的温度为0～4℃，反应时间为0.5～1.5h。8.根据权利要求5所述的一种包含几丁寡糖和抗生素的组合物，其特征在于：步骤m3中所述氧化反应的温度为90～120℃，反应时间为6～12h。9.根据权利要求5所述的一种包含几丁寡糖和抗生素的组合物，其特征在于：步骤m4中所述活化的温度为55～65℃，活化时间为1～3h；步骤m4中所述酰胺化反应的温度为室温，反应时间为6～12h。10.根据权利要求1～9任一项所述的一种包含几丁寡糖和抗生素的组合物在防治水稻稻瘟病中的应用。

技术总结

本发明公开了一种包含几丁寡糖和抗生素的组合物及其应用，属于杀生剂技术领域。所述组合物包括如下质量百分比的原料：几丁寡糖0.1～10％、抗生素1～10％、防腐剂2～5％、增效剂2～5％，余量为水。本发明将脱乙酰度小于50％的几丁寡糖与抗生素复合使用，其生物安全性高、人畜无害、性价比高、使用方便，具有协同增效、提高靶标病害防效的特点。提高靶标病害防效的特点。