可活化的抗CTLA-4抗体的给药及施用的制作方法

可活化的抗ctla-4抗体的给药及施用
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技术领域
5.本技术公开用于癌症的可活化的抗ctla-4抗体的给药及施用的方法。

背景技术：

6.免疫系统能够控制肿瘤发展且介导肿瘤消退。这需要肿瘤抗原特异性t细胞的产生及活化。多种t细胞共刺激受体及t细胞负调节剂或共抑制受体配合作用以控制t细胞活化、增殖及效应功能的获得或丧失。t细胞共刺激及共抑制分子中最早且最佳表征的为cd28及ctla-4。rudd等人(2009)immunol.rev.229:12。cd28通过结合至抗原呈递细胞上的b7-1及b7-2配位体提供对t细胞受体接合的共刺激信号，而ctla-4提供负信号向下调节t细胞增殖及功能。ctla-4，其亦结合b7-1(cd80)及b7-2(cd86)配位体但比cd28具有更高亲和力，透过细胞自主(或内在)及细胞非自主(或外在)途径，充作t细胞功能的负调节剂。cd8及cd4 t效应(t
eff
)功能的内在控制由以下介导：因t细胞活化所致的ctla-4的可诱导的表面表达、t细胞增殖的抑制及因相对细胞上的b7配位体的多价接合的细胞因子产生。peggs等人(2008)immunol.rev.224:141。
7.抗ctla-4抗体在交联时抑制体外t细胞功能。krummel及allison(1995)j.exp.med.182:459；walunas等人(1994)immunity 1:405。调节t细胞(t
regs
)，其组成性地表达ctla-4，以非细胞自主方式控制效应t细胞(t
eff
)功能。针对ctla-4缺乏的t
regs
具有受损的抑制能力(wing等人(2008)science 322:271)及阻断ctla-4与b7相互作用的抗体可抑制t
reg
功能(read等人(2000)j.exp.med.192:295；quezada等人(2006)j.clin.invest.116:1935)。更近，t
effs
亦已显示透过外在途径控制t细胞功能(corse及allison(2012)j.immunol.189:1123；wang等人(2012)j.immunol.189:1118)。通过t
regs
及t
effs
对t细胞功能之外在控制透过ctla-4阳性细胞移除抗原呈递细胞上的b7配位体的能力发生，由此限制其共刺激潜力。qureshi等人(2011)science 332:600；onishi等人(2008)proc.nat’l acad.sci.(usa)105:10113。ctla-4/b7相互作用的抗体阻断被认为通过干扰通过ctla-4接合传递的负信号来促进t
eff
活化；此种对t细胞活化及增殖的内在控制可促进t
eff
及t
reg
二者增殖(krummel及allison(1995)j.exp.med.182:459；quezada等人(2006)j.clin.invest.116:1935)。在早期动物模型的研究中，ctla-4的抗体阻断显示会加剧自体免疫。perrin等人(1996)j.immunol.157:1333；hurwitz等人(1997)j.neuroimmunol.73:57。通过扩展至肿瘤免疫，抗ctla-4引起确立的肿瘤消退的能力提供ctla-4阻断的潜
力的生动实施例。leach等人(1996)science 271:1734。
8.针对人类ctla-4的人类抗体伊匹单抗及曲美木单抗(tremelimumab)经选择以抑制ctla-4-b7相互作用(keler等人(2003)j.immunol.171:6251；ribas等人(2007)oncologist 12:873)且已在多种恶性病的各种临床试验中进行测试。hoos等人(2010)semin.oncol.37:533；ascierto等人(2011)j.transl.med.9:196。伊匹单抗，其首先被核准用于转移性黑素瘤，此后已被核准用于其他癌症，且在还有其他癌症中正处于临床测试。hoos等人(2010)semin.oncol.37:533；hodi等人(2010)n.engl.j.med.363:711；pardoll(2012)nat.immunol.13(12):1129。在2011年，基于先前经的患有晚期黑素瘤的患者的iii期试验中总存活的改良，伊匹单抗(其具有igg1恒定区)在us及eu被核准用于不可切除或转移性黑素瘤。hodi等人(2010)n.engl.j.med.363:711。经常观测到肿瘤消退及疾病稳定，但用这些抗体伴随着不良事件与能够影响各种器官系统的发炎浸润。利用伊匹单抗的副作用的严重度及频率，其携载免疫介导的不良反应的黑盒警告，且当与纳武单抗(nivolumab)组合时甚至达到更大程度，限制许多主治医师使用伊匹单抗。
9.已开发出伊匹单抗的可活化的形式，其中轻链包含干扰结合至ctla-4的掩蔽部分，但在通过在肿瘤中比在周边组织中更普遍和/或更具活性的蛋白酶裂解后优先释放于肿瘤微环境中。wo 18/085555。此种肿瘤特异性活化实现肿瘤微环境中的完全ctla-4阻断活性，从而促进抗肿瘤免疫反应，同时最小化正常组织中的ctla-4阻断，否则在正常组织中其可导致全身毒性。由此，可活化的形式结果为与初生亲本分子相比增加的指数。
10.尽管可活化的ctla-4抗体的新颖作用机制提供益处，但由于利用伊匹单抗的中不存在的新颖药物动力学及药效学考虑，其在就给药及施用的方法方面提出挑战。已知的用于伊匹单抗的给药施用的方法可因此不适用于可活化的ctla-4抗体的。需要可活化的抗ctla-4抗体(诸如可活化的伊匹单抗)的给药及施用的方法，所述方法最大化其指数且优化对经活化的伊匹单抗的暴露。

技术实现要素：

11.本发明提供可活化的抗ctla-4抗体的给药及施用的方法，其中该抗体作为单药疗法每四周一次(q4w)或每八周一次(q8w)施用。本发明进一步提供可活化的抗ctla-4抗体与抗pd1或抗pd-l1抗体(诸如纳武单抗)的组合的给药及施用的方法，其中该可活化的抗ctla-4抗体每四周一次(q4w)或每八周一次(q8w)施用。
12.在一些实施方案中，可活化的抗ctla-4抗体为伊匹单抗的可活化的形式，诸如抗体，其包含包含seq id no:9的重链可变区序列的重链及包含选自由seq id no:21、22及23组成的的轻链可变区序列的轻链(“可活化的伊匹单抗”)。
13.在各种实施方案中，可活化的抗ctla-4抗体，诸如可活化的伊匹单抗，为作为单药疗法以240、800、1600或2400mg的均一剂量施用。在一个实施方案中，可活化的抗ctla-4抗体以1600mg施用，且可视需要q8w施用。
14.在另外实施方案中，可活化的抗ctla-4抗体与抗pd-1或抗pd-l1抗体(诸如纳武单抗)组合以240、600、800、1200或1600mg的均一剂量施用。在各种组合实施方案中，该抗pd-1或抗pd-l1抗体(诸如纳武单抗)以160、360或480mg的均一剂量施用。
15.在一个组合疗法实施方案中，可活化的抗ctla-4抗体以240mg的均一剂量施用及抗pd-1或抗pd-l1抗体以360mg的均一剂量施用，二者均为q3w。在另一个实施方案中，施用前述组合疗法持续四个疗程，接着连续地以q4w360mg纳武单抗维持。
16.在一个组合疗法实施方案中，可活化的抗ctla-4抗体以800mg的均一剂量q8w施用及抗pd-1或抗pd-l1抗体以480mg的均一剂量q4w施用。在另一个组合疗法实施方案中，可活化的抗ctla-4抗体以1200mg的均一剂量q8w施用及抗pd-1或抗pd-l1抗体以480mg的均一剂量q4w施用。在一个特定实施方案中，可活化的伊匹单抗以1200mg的均一剂量q8w施用及纳武单抗以480mg的均一剂量q4w施用。
17.在另一个组合疗法实施方案中，可活化的抗ctla-4抗体以600mg的均一剂量q4w施用及抗pd-1或抗pd-l1抗体以480mg的均一剂量q4w施用。在选定的组合疗法实施方案中，该可活化的抗ctla-4抗体为可活化的伊匹单抗及该抗pd-1或抗pd-l1抗体为纳武单抗。在一个特定实施方案中，可活化的伊匹单抗以600mg的均一剂量q4w施用及纳武单抗以480mg的均一剂量q4w施用。
18.在一些实施方案中，本发明的性抗体的单位剂量以选自由小瓶、安瓿、预填充式注射器及自动注射器组成的的形式经包装。
19.在一些实施方案中，可活化的伊匹单抗如本文所用是指伊匹单抗的可活化的形式，其包含包含seq id no:9的重链可变区的重链及包含选自由seq id no:21、22及23组成的的轻链可变区序列的轻链。可活化的伊匹单抗的轻链可变域可视需要进一步包含seq id no:16之间隔子且该轻链可包含seq id no:14的κ恒定域，例如seq id no:24所提供之间隔子yv39-2011轻链。可活化的伊匹单抗的重链可进一步包含seq id no:10的igg1恒定域，例如如在seq id no:11或12所提供的伊匹单抗重链中。可活化的伊匹单抗可包含包含seq id no:11或12的重链及包含seq id no:24的轻链。
20.在各种实施方案中，抗pd1或抗pd-l1为包含seq id no:25或26的重链序列及seq id no:27的轻链序列的纳武单抗。
21.本发明的给药及施用的方法可用于多种疾病，诸如癌症，包括小细胞肺癌(sclc)、非小细胞肺癌(nsclc)、结肠直肠癌(crc)、肾细胞癌(rcc)、去势抗性前列腺癌(crpc)、膀胱癌、胃癌、食道癌及黑素瘤。在特定实施方案中，本发明的给药及施用的方法用于核准伊匹单抗用于其的适应症，诸如不可切除或转移性黑素瘤、或黑素瘤的辅助，或当与抗pd1或抗pd-l1抗体(诸如纳武单抗)组合施用时，晚期肾细胞癌(rcc)、微卫星(microsatellite)不稳定性高(msi-h)或错误配对修补缺陷(dmmr)转移性结肠直肠癌、黑素瘤、非小细胞肺癌(nsclc)、恶性胸膜间皮瘤或肝细胞癌。在一个实施方案中，本发明的给药及施用的方法用于先前未经的不可切除的iii至iv期黑素瘤。
具体实施方式
22.定义
23.为了可更容易地理解本发明，首先定义某些术语。如本技术中所用，除非本文另有明确提供，否则以下术语中的各者应具有以下陈述的含义。在整篇申请中陈述另外定义。
[0024]“可活化的抗ctla-4抗体”如本文所用是指阻断ctla-4结合至b7配位体的拮抗剂抗ctla-4抗体的经修饰形式，其包含抑制结合至ctla-4直至通过在肿瘤微环境中更为普遍
和/或更具活性的蛋白酶裂解的结构修饰。“可活化的抗ctla-4抗体”涵盖伊匹单抗的可活化的形式，诸如包含经修饰以包含掩蔽部分(masking moiety；mm)及可裂解部分(cleavable moiety；cm)的轻链的抗体，如wo 18/085555中所公开，例如可活化的伊匹单抗。
[0025]“可活化的伊匹单抗”如本文所用是指伊匹单抗的可活化的形式，其包含包含seq id no:9的重链可变区序列的重链及包含选自由seq id no:21、22及23组成的的轻链可变区序列的轻链。可活化的伊匹单抗的轻链可变域可视需要进一步包含seq id no:16之间隔子且该轻链可包含seq id no:14的κ恒定域，例如seq id no:24所提供之间隔子yv39-2011轻链。可活化的伊匹单抗的重链可进一步包含seq id no:10的igg1恒定域，例如如在seq id no:11或12所提供的伊匹单抗重链中。可活化的伊匹单抗可包含包含seq id no:11或12的重链及包含seq id no:24的轻链。
[0026]“佐剂”如本文所用是指与疫苗结合施用给个体，与在无佐剂下施用疫苗所致的免疫反应相比增强对疫苗的免疫反应的剂。佐剂亦可指在手术移除肿瘤后使用的剂以降低疾病复发风险，诸如在手术移除黑素瘤后使用伊匹单抗或可活化的伊匹单抗。
[0027]“施用(administering)”、“施用(administer)”或“施用(administration)”是指使用本领域技术人员已知的各种方法及递送系统中的任何者，将包含剂的组合物以物理性方式引入至个体。本发明抗体的优选施用途径包括静脉内、腹膜内、肌肉内、皮下、脊柱或其他非经肠施用途径，例如通过注射或输注。词组“非经肠施用”如本文所用意指除经肠及局部施用之外的施用模式，通常通过注射，且包括但不限于静脉内、腹膜内、肌肉内、动脉内、鞘内、淋巴管内、病灶内、囊内、眶内、心脏内、皮内、经气管、皮下、表皮下、关节内、囊下、蛛网膜下、脊柱内、硬膜外及胸骨内注射及输注以及体内电穿孔。或者，本发明的抗体可经由非注射途径，诸如局部、表皮或黏膜施用途径，例如经鼻内、经口、经阴道、经直肠、经舌下或局部施用。施用亦可执行例如一次、复数次和/或历时一个或多个延长的时段。
[0028]
除非另有说明，否则用于癌症的抗体的施用为非经肠，诸如静脉内(iv)或皮下(sc)。本发明的给药及施用的方法可进行任意数目的周期，自一个、两个、三个、四个周期等直至连续(重复给药直至不再需要、疾病复发或达到不可接受的毒性)。出于本发明的组合疗法实施方案的目的，一个周期包括最小施用单位，其包含至少一个剂量的每种组分(药物)。
[0029]“初始剂量”或“初始给药”如本文所用是指对利用该方案的患者的首次给药、及该相同给药方案的任何后续重复(诸如第二、第三及第四周期等)，且与“维持剂量”或“维持给药”相反，其是指在一个或多个初始剂量后在更长时期(例如长于三个月上至数年或甚至无限期)内施用之后续剂量。维持给药可视需要包括比初始剂量更小频率的给药和/或更低的剂量。除非另有说明，否则本文公开且主张的给药方案构成初始剂量及初始给药。
[0030]“组合疗法”如本文所用是指在协调计划中施用两种或更多种剂，其中该组合的第一组分的剂量及给药时间间隔为基于第二组分的剂量及给药时间间隔，以引起整体益处。其不限于施用的任何特定细节，且涵盖呈所述组分的混合物的施用、呈单独组合物的施用，无论是在给定日同时或依序。尽管当给药时程表相同或为彼此的倍数(例如q4w及q8w)时组合疗法最方便，但其亦涵盖若任何给定周期的给药时间间隔不一致，在不同日的施用。
[0031]“抗体”(ab)应包括但不限于特异性结合至抗原的糖蛋白免疫球蛋白且包含经二硫键互连的至少两条重链(hc)及两条轻链(lc)。各重链包含重链可变区(本文缩写为vh)及重链恒定区。重链恒定区包含三个域c
h1
、c
h2
及c
h3
。各轻链包含轻链可变区(本文缩写为v
l
)及轻链恒定区。轻链恒定区由一个域c
l
组成。该vh及v
l
区可进一步细分为称为互补决定区(cdr)的高变区，其间散布着更加保守的称为框架区(fr)的区域。各vh及v
l
由自氨基端至羧基端按以下顺序排列的三个cdr及四个fr组成：fr1、cdr1、fr2、cdr2、fr3、cdr3、fr4。重链及轻链的可变区包含与抗原相互作用的结合域。
[0032]
如本文所用，且根据常规解释，经描述为包含“一”重链和/或“一”轻链的抗体是指包含所引述重链和/或轻链中的“至少一者”的抗体，且因此将涵盖具有两条或更多条重链和/或轻链的抗体。具体而言，如此描述的抗体将涵盖具有两条实质上相同的重链及两条实质上相同的轻链的常规抗体。抗体链可实质上相同但若其由于翻译后修饰(诸如赖氨酸残基的c端裂解、替代糖基化模式等)而不同则不完全相同。然而，聚糖内岩藻糖基化不同的抗体并不实质上相同。
[0033]
如本文所用，抗体轻链的“轻链可变域”包含轻链框架区(fr)及cdr序列，诸如fr1-cdrl1-fr2-cdrl2-fr3-cdrl3-fr4，诸如seq id no:13所提供的伊匹单抗的轻链可变域。当提及可活化的抗ctla-4抗体使用时，“轻链可变域”可进一步包含掩蔽部分、可裂解部分及视需要的如本文所公开的其他序列组件。
[0034]
除非另有说明或从上下文明确，否则由其靶特异性定义的抗体(例如“抗ctla-4抗体”)是指可结合至其人类标靶(亦即人类ctla-4)的抗体。此种抗体可或可不结合至来自其他物种的ctla-4。
[0035]
免疫球蛋白可源自任何通常已知的同型物，包括但不限于iga、分泌型iga、igg及igm。在某些物种中，igg同型物可分为亚类：人类中的igg1、igg2、igg3及igg4、及小鼠中的igg1、igg2a、igg2b及igg3。“同型物”是指由重链恒定区基因编码的抗体类别(例如igm或igg1)。“抗体”包括例如天然存在的抗体及非天然存在的抗体，包括同种异型变体；单克隆抗体及多克隆抗体；嵌合抗体及人源化抗体；人类抗体或非人类抗体；完全合成抗体；及单链抗体。除非另有说明或从上下文明确，否则本文公开的抗体为人类igg1抗体。igg1恒定域序列包括但不限于已知igg1同种异型变体。序列表中的序列当然包含所提供的序列而不是任何其他序列。
[0036]“经分离的抗体”是指实质上不含具有不同抗原特异性的其他抗体的抗体(例如，特异性结合至ctla-4的经分离的抗体实质上不含特异性结合至除ctla-4之外的抗原的抗体)。然而，特异性结合至ctla-4的经分离的抗体可与其他抗原交叉反应，诸如来自不同物种的ctla-4分子。此外，经分离的抗体可实质上不含其他细胞材料和/或化学品。通过比较，“经分离的”核酸是指物质的核酸组成，其与存在于自然界中的核酸明显不同，亦即具有独特化学身份、性质及效用。例如，不同于天然dna的经分离的dna为天然dna的独立部分，而不是在自然界中发现的更大结构复合体(染体)的组成部分。此外，不同于天然dna的经分离的dna可用作pcr引物或杂交探针用于尤其测量基因表达及检测生物标志物基因或突变以诊断疾病或预测剂的功效。亦可使用本领域熟知的标准技术纯化经分离的核酸以便实质上不含其他细胞组分或其他污染物，例如其他细胞核酸或蛋白质。
[0037]
术语“单克隆抗体”(“mab”)是指单分子组成的抗体分子的制剂，亦即其一级序列
基本上相同，且其展现针对特定抗原决定基的单一结合特异性及亲和力的抗体分子。单克隆抗体可通过杂交瘤、重组体、转基因或本领域技术人员已知的其他技术来产生。
[0038]“人类”抗体(humab)是指具有其中框架及cdr区二者均源自人类生殖系免疫球蛋白序列的可变区的抗体。此外，若抗体包含恒定区，则该恒定区亦源自人类生殖系免疫球蛋白序列。本发明的人类抗体可包含不是由人类生殖系免疫球蛋白序列编码的氨基酸残基(例如，通过体外随机或定点诱变或通过体内体细胞突变引入的突变)。然而，术语“人类抗体”如本文所用非意在包括其中源自另一哺乳动物物种(诸如小鼠)的生殖系的cdr序列已接枝至人类框架序列上的抗体。术语“人类”抗体及“完全人类”抗体为同义使用。
[0039]“抗体片段”是指完整抗体的一部分，一般包括完整抗体的“抗原结合部分”(“抗原结合片段”)，其保留特异性结合至完整抗体所结合的抗原的能力且亦保留介导fcr结合能力的抗体的fc区。
[0040]“抗体依赖性细胞介导的细胞毒性”(“adcc”)是指体外或体内细胞介导的反应，其中表达fcr的非特异性细胞毒性细胞(例如，自然杀手(nk)细胞、巨噬细胞、嗜中性粒细胞及嗜酸性粒细胞)识别结合至靶细胞上的表面抗原的抗体且于随后导致靶细胞的裂解。原则上，具有活化fcr的任何效应细胞可经触发以介导adcc。
[0041]“癌症”是指以身体内异常细胞的不受控制生长为特征的各种各样的疾病。不受调节的细胞分裂及生长分裂及生长导致形成会侵入邻近组织且亦可透过淋巴系统或血流转移至身体的远侧部分的恶性肿瘤或细胞。
[0042]“细胞表面受体”是指能够接收信号且跨细胞的质膜传递此种信号的分子及分子的复合体。
[0043]“效应功能”是指抗体fc区与fc受体或配位体的相互作用、或由其产生的生物化学事件。示例性“效应功能”包括clq结合、补体依赖性细胞毒性(cdc)、fc受体结合、fcγr介导的效应功能，诸如adcc及抗体依赖性细胞介导的吞噬作用(adcp)、及细胞表面受体(例如，b细胞受体；bcr)的下调。此种效应功能一般需要将fc区与结合域(例如，抗体可变域)组合。
[0044]“免疫反应”是指脊椎动物内针对外来的剂的生物反应，该反应保护生物体免受这些剂及由其引起的疾病的影响。免疫反应为由免疫系统的细胞(例如，t淋巴细胞、b淋巴细胞、自然杀手(nk)细胞、巨噬细胞、嗜酸性粒细胞、肥大细胞、树突细胞或嗜中性粒细胞)及由任何这些细胞或肝脏产生的可溶性大分子(包括抗体、细胞因子及补体)的作用介导，其导致选择性靶向侵入病原体的脊椎动物身体、感染病原体的细胞或组织、癌细胞或其他异常细胞、或(在自体免疫或病理性发炎的情况下)正常人类细胞或组织；结合至其等；损坏其等；破坏其等和/或自其等消除。
[0045]“免疫调节剂(immunomodulator)”或“免疫调节剂(immunoregulator)”是指可参与调节(modulating)、调节(regulating)或改变免疫反应的信号传导路径的组分。“调节(modulating)”、“调节(regulating)”或“改变”免疫反应是指免疫系统的细胞或此种细胞的活性的任何改动。此种调节包括免疫系统的刺激或抑制，其可表达为各种细胞类型的数目的增加或减少、这些细胞的活性的增加或减少、或可在免疫系统内发生的任何其他变化。已识别出抑制性及刺激性免疫调节剂，其中一些可在肿瘤微环境中具有增强的功能。在所公开的发明的优选实施方案中，免疫调节剂位于t细胞的表面上。“免疫调节靶(immunomodulatory target/immunoregulatory target)”为免疫调节剂所靶向用于通过
物质、剂、部分、化合物或分子的结合且其活性因物质、剂、部分、化合物或分子的结合而改变。免疫调节靶包括例如细胞的表面上的受体(“免疫调节受体”)及受体配位体(“免疫调节配位体”)。
[0046]“免疫疗法”是指通过包括诱导、增强、抑制或以其他方式改变免疫反应的方法来罹患疾病或处于感染或罹患疾病复发风险中的个体。
[0047]“增强内源性免疫反应”意指增加个体中现有免疫反应的有效性或效力。可例如通过抑制内源宿主免疫反应的克服机制或通过增强内源宿主免疫反应的刺激机制来达成此种有效性及效力的增加。
[0048]“蛋白质”是指包含至少两个连续连接的氨基酸残基的链，其中对链的长度没有上限。蛋白质中的一个或多个氨基酸残基可包含修饰，诸如但不限于糖基化、磷酸化或二硫键形成。术语“蛋白质”在本文中与“多肽”可互换使用。
[0049]“个体”包括任何人类或非人类动物。术语“非人类动物”包括但不限于脊椎动物，诸如非人类灵长类动物、绵羊、狗、兔、啮齿动物(诸如小鼠、大鼠及天竺鼠)、禽类物种(诸如鸡)、两栖动物及爬行动物。在优选实施方案中，个体为哺乳动物，诸如非人类灵长类动物、绵羊、狗、猫、兔、雪貂或啮齿动物。在所公开的发明的任何方面的更优选实施方案中，个体为人类。除非另有说明，否则本文所指的个体为人类。术语“个体”及“患者”在本文中可互换使用。
[0050]
药物或剂(诸如本发明的fc融合蛋白)的“有效量”或“有效剂量”为药物当单独或与另一种剂组合使用时可促进疾病消退的任何量，疾病消退通过以下证明：疾病症状的严重度降低，增加疾病无症状期的频率及持续时间，或预防因疾病病痛所引起的受损或失能。药物的有效量或剂量包括“预防有效量”或“预防有效剂量”，其为药物当单独或与另一种剂组合施用给处于发展出疾病风险或罹患疾病的复发风险中的个体时抑制疾病的发展或复发的任何量。剂促进疾病消退或抑制疾病的发展或复发的能力可使用本领域技术人员已知的多种方法来评估，诸如在临床试验期间在人类受试者中，在预测人类中功效的动物模型系统中，或通过在体外检定中测定该剂的活性。
[0051]
举例而言，抗癌剂促进个体的癌症消退。在优选实施方案中，有效量的药物促进癌症消退至消除癌症的点。“促进癌症消退”意指单独或与抗肿瘤剂组合施用有效量的药物导致肿瘤生长或大小减少，肿瘤坏死，至少一种疾病症状的严重度降低，增加疾病无症状期的频率及持续时间，预防因疾病病痛所引起的受损或失能，或以其他方式改善患者的疾病症状。此外，关于的术语“有效”及“有效性”包括药理学有效性及生理安全性。药理学有效性是指药物促进患者的癌症消退的能力。生理安全性是指由于药物的施用所致的毒性的程度、或在细胞、器官和/或生物体层级上的其他不良生理效应(不良效应)。
[0052]
举肿瘤的例子而言，相对于未经的个体，药物的有效量或剂量优选抑制细胞生长或肿瘤生长至少约20％，更优选至少约40％，甚至更优选至少约60％，且又更优选至少约80％。在最佳实施方案中，药物的有效量或剂量完全抑制细胞生长或肿瘤生长，亦即优选抑制细胞生长或肿瘤生长100％。化合物抑制肿瘤生长的能力可在动物模型系统中进行评估，诸如ct26结肠腺癌、mc38结肠腺癌及sa1n纤维肉瘤小鼠肿瘤模型，所述模型预测在人类肿瘤中的功效。或者，组合物的此种性质可通过检查化合物抑制细胞生长的能力来评估，此种抑制可通过本领域技术人员已知的检定来体外测量。在本发明的其他优
选实施方案中，可观测到肿瘤消退且持续至少约20天、更优选至少约40天或甚至更优选至少约60天的时间。
[0053]
个体的“”或“疗法”是指以逆转、缓解、改善、抑制、减缓或预防与疾病相关的症状、并发症、病状或生化指标的发作、进展、发展、严重度或复发为目标对个体进行或施用活性剂至个体的任何类型的干预或过程。
[0054]
可活化的抗ctla-4抗体的给药及施用
[0055]
唯一经核准的抗ctla-4抗体伊匹单抗当以3mg/kg(转移性黑素瘤)或10mg/kg(辅助黑素瘤)施用时在高达25％的转移性黑素瘤患者中提供长期生存，但往往伴随着毒性。偏好通过肿瘤相关蛋白酶活化的可活化的抗体在给定剂量下降低周边毒性中具有前景性，从而对于任何给定的毒性程度允许更高(且因此可能更有效)剂量、或该二者的一些中间折衷(tread-off)。已提出可活化的伊匹单抗作为靶向ctla-4路径相比伊匹单抗的改良、更安全的方式，已知伊匹单抗导致在较高剂量下限制副作用。wo 18/085555。本文所提供的给药及施用的方法为对于自可活化的抗体方法获得最大益处及最大化指数是必要的。肿瘤可活化的抗ctla-4抗体的新颖作用机制意指不存在可仰赖的先前给药数据及经验。
[0056]
本发明部分基于可活化的伊匹单抗的早期人类临床试验的结果。肿瘤活组织检查的分析证实，如所预期，与血浆相比，可活化的伊匹单抗在tme内优先转化为经单-及双-裂解形式。此种优先裂解导致提高的安全性，因为对于肿瘤内抗ctla-4活性的任何给定水平，周边抗ctla-4活性(经裂解的物质)较低。
[0057]
此外，基于经可活化的伊匹单抗的个体的活组织检查的基因表达研究显示，先前利用伊匹单抗所见的结果的相同模式，这表明可活化的伊匹单抗的效应通过与伊匹单抗相同的抗ctla-4活性介导，与预期的作用机制一致。显示来自利用可活化的伊匹单抗的的临床益处(标靶病灶缩小)的个体在其第一个周期的第15天展现与前的表达相比升高的一组发炎基因的表达。相比之下，具有稳定疾病(标靶病灶生长《20％，但没有缩小)的个体或那些没有显示临床益处(标靶病灶生长》20％)者均没有展现发炎基因的此种升高的表达。在伊匹单抗的临床试验中观测到相同模式。
[0058]
此外，可活化的伊匹单抗的给药研究令人意外地显示，可活化的伊匹单抗的q8w给药优于q4w给药。第一周期的pk研究显示，以1600mg q8w的个体展现与经1600mg q4w的个体相当的经单-及双裂解的物质的cmax暴露。经1600mg q8w的个体亦显示与那些经800mg q4w者相比约两倍的经单-及双裂解的物质的暴露。亦发现，q8w比利用相同量的药物q4w的给药更安全。与经800mg q4w的个体相比，经1600mg q8w施用的个体的不良事件的频率较低。这些结果一起表明，可活化的伊匹单抗的q8w给药q8w优于q4w给药，其为给定量的所施用药物提供增强的暴露，且副作用显著降低。此种改良的概况可部分归因于经活化的化合物的暴露的动力学，因为活物为自亲本化合物连续产生且因此具有更长表观半衰期。
[0059]
尽管如此，可活化的伊匹单抗与抗pd-1或抗pd-l1抗体(诸如纳武单抗)的q4w给药仍旧是可行的替代组合疗法给药时程表。此种q4w给药将此种组合物疗法方案与并与纳武单抗单药疗法使用的q2w或q4w给药时程表对齐，且因此比现有经核准的针对
及的q3w组合疗法方案更方便且更廉价。处方信息，2020年3月更新。
[0060]
用于癌症的性抗体通常以约为抗体在人类受试者中的半衰期(对于igg，该半衰期为约21天)的时间间隔施用。目前经核准的用于癌症的单克隆抗体通常为每一周(qw)、两周(q2w)、三周(q3w)或四周(q4w)给药，其中q2w及q3w最为常见。hendrikx等人(2017)oncologist 22:1212，ovacik与lin(2018)clin.transl.sci.11:540。例如，用于癌症的各种经核准的性抗体为q2w/q4wq3wq2w/q3w/q4w施用。(伊匹单抗)的半衰期为15.4天，且其经核准用于q3w施用，尽管其亦q12w施用用于在初始四次剂量q3w后长期维持辅助黑素瘤使用。yervoy处方信息，2020年3月更新。约为抗体半衰期的给药时间间隔为合理的，因为其确保在药物含量显著下降之前补给，因此促进在稳定状态下的均匀循环药物含量(暴露)。
[0061]
可活化的伊匹单抗包含在常规二价igg结构中的两条重链及两条轻链，尽管在轻链的氨基端处具有另外序列组件(包括mm及cm)。由于各cm可经独立裂解，故可活化的伊匹单抗可在相同时间以完整/未裂解、单裂解及双裂解形式全部存在。在无意受理论限制下，关于q8w给药的惊人结果可为此三种不同抗体物质的复杂药物动力学的结果，其中经单-及双裂解的物质随着时间的推移通过蛋白酶裂解自完整可活化的伊匹单抗产生，同时在相同时间所有物质的含量随着其自身独特半衰期而衰减。在无意受理论限制下，q8w给药可防止经单-及双-裂解(活性)物质在周边积聚，否则此可能发生(如以q4w给药)且导致副作用。
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表1
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序列表总结
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关于抗体序列，序列表提供成熟可变区及重链及轻链的序列，亦即所述序列不包含信号肽。
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等效物：
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本领域技术人员当知晓或能够仅使用例行实验来确定本文公开的特定实施方案的许多等效物。此种等效物意在由随附的权利要求书涵盖。

技术特征：

1.一种使用可活化的抗ctla-4抗体有需要的人类受试者中癌症的方法，该方法包括每四周一次(q4w)或每八周一次(q8w)施用该可活化的抗ctla-4抗体；及其中该可活化的抗ctla-4抗体包含：a.包含seq id no:9的重链可变域序列的重链；及b.包含选自由seq id no:21、22及23组成的的轻链可变域序列的轻链。2.根据权利要求1的方法，其中该可活化的抗ctla-4抗体包含：a.包含seq id no:11的序列的重链；及b.包含seq id no.24的序列的轻链。3.根据前述权利要求中任一项的方法，其中q8w施用该可活化的抗ctla-4抗体。4.根据前述权利要求中任一项的方法，其中以240、800、1600或2400mg的均一剂量施用该可活化的抗ctla-4抗体。5.根据权利要求4的方法，其中以1600mg的均一剂量q8w施用该可活化的抗ctla-4抗体。6.根据前述权利要求中任一项的方法，其中该癌症选自由以下组成的组：a.不可切除或转移性黑素瘤；及b.黑素瘤的辅助。7.一种使用可活化的抗ctla-4抗体与纳武单抗组合有需要的人类受试者中癌症的方法，该方法包括每四周一次(q4w)或每八周一次(q8w)施用该可活化的抗ctla-4抗体，其中该可活化的抗ctla-4抗体包含：a.包含seq id no:9的重链可变域序列的重链；及b.包含选自由seq id no:21、22及23组成的的轻链可变域序列的轻链。8.根据权利要求7的方法，其中该可活化的抗ctla-4抗体包含：a.包含seq id no:11的序列的重链；及b.包含seq id no.24的序列的轻链。9.根据权利要求7或8中任一项的方法，其中q8w施用该可活化的抗ctla-4抗体。10.根据权利要求7至9中任一项的方法，其中该可活化的抗ctla-4抗体以240、600、800、1200或1600mg的均一剂量施用。11.根据权利要求10的方法，其中纳武单抗以480mg的均一剂量q4w施用。12.根据权利要求11的方法，其中以600mg的均一剂量q4w施用可活化的伊匹单抗(ipilimumab)。13.根据权利要求11的方法，其中以1200mg的均一剂量q8w施用可活化的伊匹单抗。14.根据权利要求7至13中任一项的方法，其中该癌症选自由以下组成的组：a.晚期肾细胞癌；b.微卫星不稳定性高(msi-h)或错误配对修补缺陷(dmmr)转移性结肠直肠癌；c.黑素瘤；d.非小细胞肺癌(nsclc)；e.恶性胸膜间皮瘤；及f.肝细胞癌。

技术总结

本发明提供可活化的抗CTLA-4抗体，诸如可活化的伊匹单抗(ipilimumab)的给药及施用的方法。方法。

技术研发人员：

L

受保护的技术使用者：

百时美施贵宝公司

技术研发日：

2021.05.11

技术公布日：

2022/12/23