食用菌实验指导5-7

实验五原种、栽培种培养基制备
原种即二级种,就是将试管中的母种,接入菌种瓶(袋)内,等菌丝长满后形成的菌种。栽培种就是将原种再接入菌种瓶(袋)培养形成的三级种,也就是直接用于生产的菌种,所以称之为栽培种。
一、实验目的和要求:
通过实验初步掌握原种、栽培种培养基的配料、装瓶(袋)、灭菌,并了解原种、栽培种培养基的不同配方及不同的制作方法。
二、实验器材和用具:
卧式高压蒸汽灭菌锅、架盘天平、接种室(箱)、超净工作台、菌种瓶或菌种袋、接种耙、塑料套环、锥形捣木、擦布、棉花、不锈钢锅、秤、盆、橡皮圈;
棉籽壳、麸皮、石膏、碳酸钙、白糖、过磷酸钙。
三、培养基配方:
1.棉籽壳培养基(适于多种食用菌):
棉籽壳78%,麸皮20%,过磷酸钙1%,蔗糖1%,水约60%(约200%)。
2.木屑米糠培养基(适用于香菇、木耳等木腐生类食用菌):
木屑(锯木屑)78%,米糠或麸皮20%,石膏1%,蔗糖1%,料水比为1:4~1:6,使
含水量达到60%,即用手握抓材料时指缝间现水而不滴水。
3.麦粒培养基(适用于平菇、猴头菇、金针菇等):
麦粒100%,蔗糖1%,碳酸钙1%,水500L左右。
四、实验步骤:
1.棉籽壳培养基的配制:
拌料:根据计划生产原种、栽培种的数量,计算出各种原料的用量,分别称取后,将不溶性辅料和主料搅拌均匀,将可溶性辅料加入水中溶解,逐渐泼入拌好的主料中搅拌,继续加水拌料,拌料时,边加水边测含水量,以便控制水分,不至过多或不足。
含水量的测定:拌好料后,用手抓一把培养料,在手中紧握,手指缝中有水渗出可下滴1-2滴水为宜,千
万不能3-4滴,也不能没水滴。
装瓶(装袋):菌种瓶口径3cm,容积750ml,菌种袋一般用12×26cm或14×28cm的聚丙烯塑料袋,边装边捣实(但不宜过紧,太紧则透气性差,菌丝生长不良),以手按结实有弹性为宜。
打孔:培养料装好后,用锥形木棒从瓶(袋)中央向下打一个洞,洞深离瓶(袋)底部2-3cm,这种一是可以增加瓶(袋)内氧气,二是有助于菌丝沿着洞穴向下蔓延,三是便于固定菌种块,不致游动而影响成活,有利于瓶下部菌丝生长良好。
擦瓶(袋):打洞后,用湿毛巾或湿布将瓶(袋)口外粘附的培养料擦净,擦干,以免接种后污染杂菌。
包扎:塞上棉塞,用牛皮纸将瓶(袋)口及棉塞包住,用绳或橡皮圈扎紧。
2.木屑米糠培养基
木屑米糠培养基的配制方法同棉籽壳培养基相似,只是含水量稍少些,用手抓一把培养料在手中,手指缝中有水渗出而不下滴为准,装瓶(袋)时培养料的压实要比棉籽壳稍松些,因木屑颗粒小,且能留有较多的空隙。
灭菌:包扎好的料瓶(袋)放入高压灭菌锅内进行灭菌。灭菌与手提式高压灭菌锅相似,只是在1.5kg/cm2压力下,灭菌1-1.5h即可。
五、思考题:原种培养基装瓶(袋)后,用锥形木捣洞的目的是什么?
实验五(续)原种、栽培种接种及培养
母种扩大成原种,原种扩大成生产上直接生产种为栽培种。
一、实验目的和要求:
通过对原种、栽培种的扩大培养,基本掌握原种、栽培种接种操作技能,并培养学生定期检查菌丝生长情况的观察能力和鉴别杂菌污染特征识别能力。
二、实验器材和用具:
接种箱(室)、超净工作台、菌种瓶(袋)架、酒精灯、镊子、75%酒精棉球、火柴、标签纸。
三、实验步骤:
1.检查母种、原种有无杂菌污染或有怀疑的菌种去之。
2. 原种接种法:接种要求在无菌室(箱),超净工作台内进行无菌操作。接种时要求动作快而准确,以减少污染。
取斜面母种,用75%酒精棉球擦拭管外壁,在酒精灯火焰上灼烧管口,,用右手持接种耙,灼烧,放在试管内侧,冷却,拔出菌种瓶(袋)上棉塞,右手小手指夹住,然后切取1.5-2.0cm2大小斜面菌种一块,通过酒精灯火焰上方,送入菌种瓶(袋)内,固定在接种孔上,塞上菌种瓶棉塞。每支斜面试管可接种3-5瓶(袋),贴上标签。
3.原种恒温培养
接种后的原种瓶,放入23-25°C的培养室或恒温箱内培养。培养期间应经常检查有无杂菌污染,如发现黄、绿、桔红、黑杂菌时,要及时检出清理。经过25-30天,待菌丝长满瓶(袋)底就可取作种子用,生长好的原种菌丝洁白,粗壮,纯净,即可用来繁殖扩大栽培种。
4.栽培种接种法
操作与母种接原种相似,但栽培种是原种接栽培种,是瓶(袋)接瓶(袋),要用瓶(袋)架,或两人配合操作,可采用灭菌的镊子夹取原种接入栽培种瓶内。
四、思考题:
1. 生产上制种,为什么一般都要经过三级制种阶段?
实验六平菇代料栽培
平菇是我国栽培最广泛,产量最高,食用和出口最多的一种食用菌。是当今世界上栽培最多的四大食用菌(蘑菇、香菇、平菇、草菇)之一。
在自然界,大多数食用菌野生在腐木上,在古代及以前人工栽培大多用段木,随着食用菌栽培事业的发展,段木资源越来越少,而且也不经济,随之发展为利用含有纤维素、木质素的工农业生产的边角料和废料来培养食用菌,就称之为代料栽培。
平菇由于菌丝生长快,抗异性强,所以栽培方法很多,既可熟料也可生料,方法上可床栽,大田栽,也可袋栽。
一、实验目的和要求:
了解平菇的生物学特性,学习平菇代料熟料栽培的生产工艺,掌握其关键技术。二、实验材料和用具:
聚丙烯塑料袋(高压)、聚乙烯塑料袋(常压)、高压(常压)灭菌锅、铁锹、水桶、磅秤、接种工具、消毒杀菌剂、竹筐、捆扎绳;棉籽壳、石膏粉、石灰粉、过磷酸钙、稻草。
三、实验步骤:
1.大田、露地生料栽培
栽培原料最佳为棉子壳,其次是玉米芯、稻草。
(1)培养料配方:棉子壳95% 过磷酸钙(磷肥)2% 石膏粉2% 石灰粉1% 多菌灵0.1%。(2)做畦畦建得好坏对产量影响很大。畦以45cm左右宽为好,长不限,在菇畦中间隔20cm放一块砖头,播种结束后取出,填土与培养料齐平。
(3)拌料应在清洁的水泥地和铺有砖块的地面上,先将棉子壳、过磷酸钙、石膏粉石灰粉拌均匀,多菌灵加水在拌料时用喷雾器喷入,使含水量达65%左右
(4)铺料、播种将菌种取出放在干净的容器中(容器用0.1%的高猛酸钾溶液洗过)在把菌种瓣成蚕豆大小,不能手搓,以免损伤菌丝播种量一般料干重的12-15%,播种采用层播法二层料,二层种,每播一层用板轻压一次,达到菌种与料紧密接触造成发菌优势,培养料厚度在10cm左右,没平方米用料20kg左右,用种量,上层:下层=2:1,上层菌种要求均匀,菌种要撒到边,面多促使早封面,脱离危险期。播完后用木板拍成垄条状,此料面比“平料面”具有发菌快、出菇早、菇形大等优点,播种结束盖上报纸,再用塑料膜覆盖加上草帘,使其温度控制在30°C以下。
(5)发菌期管理主要是观察料温变化,播种后约3-5d,料温达最高峰,只要不超过30°C 就不用动。一般7-10d菌丝可封面,20d后,结合增加光照,适当通风,诱导原基形成。当菌丝发到底,料面出现黄小水珠,形成大量原基,表明菌丝发育成熟,由营养生长转为生殖生长。
(6)出菇期管理重点是通风保湿,架膜揭纸,平菇发育可分为--原基期—桑椹期—珊瑚期—成型期—成熟期,只有到成型期可以向菇体直接喷水,原基期—桑椹期—珊瑚期三期都不能向菇体直接喷水。待菇丛中有一菇体菇盖(带头菇)及将平展时及时采收,一手按住培养基,一手将菇体旋转整丛采下。
(7)转潮管理每采完一潮,把菌床上残存的死菇、菇柄等清理干净,停水2-3d,把疏松的培养料稍压实,让菌丝恢复生长并积蓄养分,随后喷足水分,保持料面湿润,盖好塑料膜,按出菇期管理。
2.生料床式栽培
(1)培养料配方:稻草72%,木屑15%,麸皮10%,石膏粉1%,过磷酸钙1%,多菌灵0.1%。
(2)备料,拌料:先将稻草铡成10cm左右的小段,再用2%的石灰水浸泡12-24h,也可整把浸泡后铡段,捞起沥干后拌入其他原料,注意控制培养料的水分,使其含水量为60%-65%,即用手握紧稻草时,指缝略有水渗出,滴1-2滴为度,ph调至7.5-8.0,栽培品种不同,ph 值不同。
(3)铺料,播种:可以用床栽式筐栽,铺料可现在床架式筐底铺一层农用薄膜,然后铺料,用木板拍
紧,铺料,铺料的厚度以10-15cm为宜,气温较高时,培养料略薄,气温较低时,培养料略厚,每平方米床面用干料15-20kg。
铺料后即可播种,以穴播方式,穴距5-8cm,穴深3-5cm,没平方米用菌种4-5瓶(袋),最后再撒一层菌种覆面。播种后在料床上盖一层报纸,再盖上一层农膜即可。
(4)发菌管理:播种后菇房温度应控制在15-20°C,相对湿度为70%,掌握料温不超过30°C,超过可适宜通风,30°C以下都不需要通风。
(5)出菇管理:播种后20-30天,不同品种菌丝长满培养料时间不同,此时料面出现桑葚状的平菇子实体原基,此时可揭去覆盖的农膜,控制菇房里的温度在15-20°C左右,喷水保湿,将菇房空气相对湿度调至90%左右,加强菇房的通风换气,经5-7天平菇长至八成熟时可采收。
(6)采收:左手将长菇的料面压住,右手将菇体旋转一下拔越即可。由于平菇菌盖较脆,采下放好就不要翻动,以免影响商品价值。
(7)一潮菇采收完后进行第二潮菇管理,稻草栽培一般可采三潮菇,棉籽壳栽培可采5-6潮菇。停止喷水2天左右,通风,待菌丝恢复生长,盖上农膜,待再出现桑葚原基,按以上方法管理。
3.熟料装袋:可多种培养基栽培,但现在一般采用棉籽壳栽培,因为棉籽壳营养丰富,产量高。
(1)培养料配方:棉籽壳90%,麸皮或米糠10%,石灰粉1%。
(2)拌料与装袋:按比例拌料,含水量60%-65%,,一定要翻拌均匀,菌袋选用17×50cm 规格的聚丙烯(高压)、聚乙烯(常压),装袋时要求压实,同时要防止料带漏洞,穿孔等,捆扎扎口时最好将袋口反折扎第二道。
(3)灭菌与按种:为防止培养料变酸,装袋后要及时进行灭菌,高压1.5kg/cm2保持1-1.5h,常压100°C 12-24h,灭菌结束,取出料袋置接种室(箱),待料温降至30°C接种,解开两头扎绳接种,种量以封料面,按好重扎好口,和料袋口一样扎。
(4)发菌:接种后,将菌袋及时移入培养室,以“井”字形堆叠,袋堆约为1m高,利于散热,室温控制在25°C左右,若温度达30°C,则要全开门窗,通风,避光培养,一般第二天菌丝就可恢复生长,每隔3-5天翻堆检查一次,20-30d,菌丝发满菌袋,两头有黄水产生,转入出菇管理。
(5)出菇管理:可采用两头出菇。
袋栽墙式出菇:发好菌的菌袋脱去塑料袋成为菌棒,菌棒整齐排放在事先铺好的土埂上,每排完一层,上面覆一层2-4厘米厚的生土(也有用熟土的),也可以抹一层生土和成的泥,可排放6-8层,最后一层覆土做成泥池,可以存水。菌墙垒好后,向泥池加水,以后一直保持有水。这样上面的水可以通过覆土
渗到下面出菇时对水分的要求,加大空气相对湿度、加大温差变化,菌丝扭结形成子实体原基,原基期—桑椹期—珊瑚期—成型期—成熟期,只有到成型期可以向菇体直接喷水,待菇丛中有一菇体菇盖(带头菇)及将平展时及时采收,一手按住培养基,一手将菇体旋转整丛采下。
进行二茬菇管理,一般可采3—5茬菇.
也有不脱塑料袋在室内或在塑料大棚墙式二头出菇的。
实验七香菇代料栽培
我国传统的人工砍花栽培香菇技术早在800多年前就已基本定型,并一直沿用至二十世纪初。在二十世纪30年代创立了人工接种新技术,我国在60年代中期开始推广纯种接种生产技术,70年代中期开始用木屑代替段木生产香菇,80年代,福建创立了“古田模式”香菇生产技术,现在全国生产香菇都是以此模式为基础的。
一.实验目的和要求
了解香菇的生物学特性,学习香菇熟料塑料袋栽培生产程序,掌握其关键技术。
二.实验材料
1.原料杂木屑棉子壳玉米芯麸皮或米糠蔗糖石膏过磷酸钙石灰粉
2.菌种香菇栽培种适合代料栽培的菌种分为三个类型:
高温型:夏秋出菇(9-11月,3-5月),出菇温度14-25°C
中温型:春秋出菇(10-12月,3-5月),出菇温度10-23°C
低温型:春季出菇(12-4月)出菇温度10-20°C
我们现在栽培的品种应该是中温型。
3.用具聚丙烯塑料袋(或聚乙烯塑料袋)捆扎綫竹筐铁锹水桶磅秤农
用塑料膜接种箱接种工具高压(常压)灭菌锅消毒杀菌剂等
三.实验步骤
1.备料培养基配方
(1)杂木屑 78%  麸皮或米糠 20%  蔗糖 1%  石膏粉 1%
(2)棉子壳40%  杂木屑38%  麸皮或米糠 18%  玉米粉2%  蔗糖 1%  石膏粉 1% (3)玉米芯60%  杂木屑20%  麸皮或米糠 17%  蔗糖 1%  石膏粉 1%  过磷酸钙1% 以上原料必须新鲜,霉变或腐烂的原料不能使用。木屑要以硬质阔叶树种的为好,最好是堆放一年以上的陈木屑:棉子壳用1.5%的石灰水浸泡24小时后,捞起沥干备用:玉米芯粉碎成玉米颗粒备用。
2.拌料与装袋选一配方,按比例将培养料拌均匀,含水量在50%-55%为宜。实践中,
检验培养料的含水量的方法是用手抓把培养料用力紧捏后,指缝间渗水印但无水滴为好,松开培养料成团不散开,但碰之即散,塑料袋选用15-17cmX50-55cm规格的聚丙烯塑料袋(高压)聚乙烯塑料袋(常压)、。在生产中一般采用装袋机装袋,量小用手工。
装袋时要求压实,同时要防止料袋漏洞、穿孔,以防杂菌污染。捆扎扎口时最好将袋口反折扎第二道。
3.灭菌与接种为避免培养料变酸,装袋后要及时进行灭菌。常压灭菌的温度要求尽快升至100°C,并维持24小时,高压灭菌6小时,方能彻底灭菌。灭菌结束当温度降至70°C以下时,取出料袋置于接种室(箱),待温度降至30°C时,准备接种。接种时要严格无菌操作用打孔器在料袋两面打孔,一面打二孔,一面打三孔的错位孔,孔深2cm,用接种器接入菌种,再用灭菌的胶布或专用胶片封口。
4.发菌与培养接种后,将菌袋及时移入培菌室。以“井”字形堆叠,高约为1m,利于散热。室温控制在25°
C左右,若温度达30°C,则要开门窗通风,降低堆高以防烧菌。空气相对湿度应在70%为宜。接种后3-4d,接种块生出白绒毛状菌丝,每隔7-10d要翻堆检查一次,跳去污染菌袋。当菌丝长至8-10cm,可适当加大通风量,以利菌丝生长。此阶段最好不要有光线,尽量做到暗光培养。
5.脱袋与排场香菇接种后,适温培养经60d左右,以达生理成熟,便可脱袋。菌丝成熟的时间长短,除环境条件外,也因香菇品种不同而异。脱袋的标准:袋壁四周的菌丝体膨胀、皱褶、隆起的肿块状态占整袋面积的2/3;在接种块周围出现微微的棕褐。表明生

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