NASBA技术平台：无需核酸扩增仪的高灵敏核酸检测技术 中国乃至世界的疫情爆发重点和控制重点在基层，这就要求在实验条件较差的基层检测单位，在样品洁净度较差，没有高级的分子生物学实验技能人员的情况下也能得出正确的检测结果。这样的检测方法才能进行普遍实施，在监测网络中发挥最大作用。于常海越来越意识到传染病的早期监控实际上需要的检测手段不仅仅需要灵敏度高，特异性好，更需要能够适用于不同的检测环境。
NASBA（Nucleic acid sequence-based amplification）技术是一项以RNA 为模板的快速等温扩增技术，这项技术特别适用于RNA 分子的检测。其特点是整个扩增过程在恒温条件下进行，因此不需要特殊（如PCR 仪）的控温装置，大大避免了PCR 扩增过程中复杂的温度变化。于常海借助NASBA技术平台，开发了世界上第一个成熟而广泛适用的禽流感早期快速诊断系统此系统包括对禽流感各亚型包括高致病性病毒的特异性检测，为世界上多个国家地区用于禽流感的早期常规筛查和疫情防控, 推动了国内外禽流感疫情监控的发展。该技术平台技术以NASBA病毒检测系统为中心，在确保高灵敏度、高准确率的前提下，使检测周期缩短至半天；且无需特殊的昂贵仪器，检测人员无需特殊技能；它是一个速度快、成本低并且实现了全自动检测的诊断系统，更重要的是此高效灵敏的设备适用于资源有限的高感染区，如：条件落后的基层偏远地区。这些地区也往往是疫情爆发的最前沿。该技术的应用显著减少了大面积筛查时的工作量和成本。
由于该技术是恒温扩增，加上标准化的操作步骤，使不同实验室所得实验结果具有很高的可比性。于常海开发的NASBA 技术平台的优越性包括：
1.NASBA 不会受到抗体存在的影响，能够区分接种疫苗的生物体中目的病毒存在与否。
2.NASBA 在禽流感检测中能够区分致病菌株和非致病菌株
3.对禽流感H5N1病毒的检测，已经充分的证明：NASBA的灵敏度可以与病毒检测“金标准”——病毒分离法相媲美。
4.与NASBA相比, 病毒培养方法操作繁琐、实验时间长，操作严格。即使熟练的技术人员至少需要14天的时间完成
整个过程。
5.使用NASBA技术，在最适实验条件下15小时能够扩增1012倍，远远高于PCR的109倍的扩增效果。
于常海小组迄今已成功开发出可检测禽流感特异性（H1-H15 ）（NASBA-AIV）、H5 亚型（NASBA-H5）、H7 亚型（NASBA-H7）的NASBA/ECL 检测试剂盒。实验结果显示，NASBA 技术比目前商品化的免疫检测试剂盒敏感至少1000 倍，比常规PCR 方法也敏感许多，与现行的病毒培养的检测方法灵敏
度相当。但是病毒培养通常需要至少几天以上的时间才能得到结果，而NASBA 技术常规仅需要4-6 小时就可以准确地得到结果，便于尽早采取防治措施。英国与联合国兽医参考实验室(Veterinary Lab Agency)合作并验证，采用NASBA 技术对来自不同地区、不同时期爆发的禽流感病毒进行检测，结果显示，NASBA-H5、NASBA-H7、NASBA-AIV 均可准确无误地检出病毒。NASBA 技术操作简便，自动化水平高，可以减少人为造成的误差。而且还是一种高通量方法，可以同时检测50 个样本，非常适用于大规模样品的筛查，节省基层使用时的检测成本。NASBA 技术的扩增产物为RNA 分子，使用者可以根据需要选择不同的检测方法，如电化学发光法和酶联法等。而且，与PCR 的产物DNA 分子不同，RNA 分子不易对实验仪器和环境造成污染，避免了产物交叉污染实验仪器、操作环境导致的假阳性结果。适用于NASBA 技术的样品范围很广，除动物组织，血液、体液样本外，还可对环境样本进行监测，如禽类饲养场所、交易场所、运输工具等等，因此为监测和控制禽流感的传播提供了有效的依据和手段。
NASBA技术平台在国内外获得的专利-用于检查非致病或致病的甲型流感亚型H5病毒的成套工具批准日期专利编号
2001年10月12日
专利编号: HK1034858
2007年11月1日
专利编号: Australia 14936/02
2009年7月1日
2010年2月19日
专利编号: HK 1057768
2008年1月30日
专利编号: Mexico 253986
2004年6月8日
专利编号: New Zealand 525190
2005年4月24日
专利编号: Singapore 96039
和泰国的禽流感高科技预防大会等国际会议上做主要演讲，介绍该项技术平台。
NASBA系统装置平台在国内外获得的专利-（不包含NASBA技术平台检测禽流感的专利）
批准
日期
专利编号
2008
年1
月9
日
专利编号: Europe 1310565 （包括Italy; UK; France; Germany）
2009
年4月8日专利编号: Europe 1308521 （UK; Germany; France; Switzerland & Liechtenstein; Luxembourg; Monaco; Italy; Netherlands; Belguim）
2009
年4
月
22
日
专利编号: ZL01142507.5
2010
年3
月5
日
专利编号: HK 1055306
NASBA-EOC技术平台已成功应用于禽类和人禽流感、SARS、口蹄疫、新城疫等多种传染病的早期诊断；该技术平台获国内外发明专利10项，在Nature Biotechnology, BBRC和Lancet等权威杂志上发表论文10余篇。该技术已被列为我国禽流感检测的国家标准，通过世界粮农组织和世界动物卫生组织(FAO/OIE)参考实验室的严格评估和验证，受到OIE禽流感防治指南的推荐；禽流感的NASBA-酶联检测和电化学检测系统经过两年的严格审批，已通过了日本农林水产省正式批准，成为在日本注册的第一个亚洲生物产品。基于多个技术平台的产品已在多个国家和地区广泛应用，相关技术培训达几十次，且多次应邀在国际会议上做介绍，获得同行的一致好评。
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