(19)中华人民共和国国家知识产权局
(12)发明专利申请
(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201910309965.1
(22)申请日 2019.04.17
(71)申请人 上海大学
地址 200444 上海市宝山区上大路99号
(72)发明人 陈忠 武琳 崔倩 余翠 傅志伟
杨明
(74)专利代理机构 北京易捷胜知识产权代理事
务所(普通合伙) 11613
代理人 齐胜杰
(51)Int.Cl.
A01K 61/10(2017.01)
(54)发明名称
(57)摘要
本发明涉及一种斑马鱼高胆固醇模型的构
建方法，其包括如下步骤：S1、斑马雌雄成鱼以1:
2～2:3的比例置于交配盒，交配后收卵，将健康
的卵在28℃恒温培养，5天后显微镜下挑选健康
饲料，用于饲养所述健康斑马鱼幼鱼；S3、将斑马
鱼幼鱼用高胆固醇饲料连续培养后，同时用普通
饲料喂养的斑马鱼幼鱼作为对照组，斑马鱼血管
胆固醇积累量显著性高于对照组时，斑马鱼高胆
固醇模型建成。本发明构建的斑马鱼高胆固醇模
型的方法具有经济、简便、稳定、可靠等优点，斑
马鱼高胆固醇模型可用于高血脂及其并发症的
药物筛选、
毒性评估和机制研究等方向。权利要求书1页 说明书5页 附图4页CN 109906979 A 2019.06.21
C N 109906979
A
权 利 要 求 书1/1页CN 109906979 A
1.一种斑马鱼高胆固醇模型建立的方法，其特征在于，其包括如下步骤：
S1、斑马雌雄成鱼以1:2～2:3的比例置于交配盒，交配后收卵，健康的卵在28℃恒温培养，之后显微镜下挑选健康斑马鱼幼鱼；
S2、在蛋黄粉中添加胆固醇制作高胆固醇饲料，将不添加胆固醇的蛋黄粉作为普通饲料，用于饲养所述健康斑马鱼幼鱼；
S3、将斑马鱼幼鱼用高胆固醇饲料连续培养后，同时用普通饲料喂养的斑马鱼幼鱼作为对照组，斑马鱼血管胆固醇积累量显著性高于对照组时，斑马鱼高胆固醇模型建成。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤S1中，所述交配的时间为1.5h后收卵，所述培养的时间为5天。
3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤S2中，所述高胆固醇饲料中胆固醇在蛋黄粉中的添加量为质量百分比5％～12.5％。
4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤S2中，所述高胆固醇饲料的每天的喂养量为1.4mg/尾～3.2mg/尾。
5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤S2中，所述高胆固醇饲料中胆固醇在蛋黄粉中的添加量为质量百分比为5％，所述高胆固醇饲料的每天的喂养量为2mg/尾。
6.如权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤S2中，所述高胆固醇饲料中还添加胆固醇示踪剂荧光胆固醇酯类似物，添加量为10μg/g。
7.如权利要求6所述的方法，其特征在于，在步骤S3中，所述胆固醇示踪剂荧光胆固醇酯类似物为CHOLESTERYL BODIPY 524/563 C11，采用乙醚作为有机助溶剂。
8.如权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤S3中，所述连续培养为在28℃恒温培养8～10天。
9.如权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤S3中采用只喂养添加有10μg/g的胆固醇示踪剂荧光胆固醇酯类似物的蛋黄粉为对照组，培养后共聚焦或体视荧光显微镜实时观察。
10.如权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤S2中，所述蛋黄粉为将新鲜鸡蛋煮熟，取出蛋黄，压碎后冷冻干燥器处理得到蛋黄干粉。
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