【中图分类号】r737 【文献标识码】a 【文章编号】1004-7484(2012)08-0411-01
microrna(mirna)是在真核生物中发现的一类可调控基因表达的内源性非编码单链小分子rna,长约18~24个核苷酸。1993年,mirnas在秀丽隐杆线虫中首次被发现[1],到目前,人类已发现的mirna超过1000种。动物体内mirna主要通过与靶基因3’端非翻译区(3’-utr)不完全配对,抑制靶基因mrna翻译,参与细胞发育、增殖、分化、凋亡、代谢等生物学过程[2]。有研究认为,遗传或表观遗传的改变和与mirnamirna靶基因分析加工相关的基因及其蛋白的异常变化是mirna表达异常的原因。主要的遗传改变是染体异常,超过5o%的mirna位于脆性位点,并且常常与癌症相关[3]。mir-21是唯一在多种实体肿瘤肺癌、胃癌、前列腺癌、结肠癌、食管癌、胰腺癌等中高表达的mirna。mir-21可通过抑制人第10号染体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源的基因(pten)、程序性细胞死亡因子4(pdcd4)、肌球蛋白1(tpm1) 等抑癌基因来促进肿瘤的发生和进展[4]。 1 mir-21的靶基因[5]
目前,人们已经发现了多个mir-21的靶基因,这些mir-21靶基因多数具有调节细胞增殖、分化、凋亡与迁移的功能。鉴定mir-21的靶基因主要有以下3 方面的研究策略: 其一,转染反义mir-21至模型细胞中,然后应用差异蛋白质组学方法鉴定出差异表达蛋白,再应用生物信息学预测方法初步选出mir-21的潜在靶基因,最后用western blot结合荧光素酶报告基因检测系统及功能研究实验,鉴定出mir-21的靶基因。 其二,转染反义mir-21至模型细胞中,然后应用基因表达谱芯片鉴定出在mrna水平发生差异表达的基因,再应用生物信息学预测结合实验验证,鉴定出mir-21的靶基因。