二维电泳步骤

二维凝胶电泳(又称双向电泳)的步骤:
1.等电聚焦电泳:在细管中加入含有两性电解质、8M的脲以及非离子型去污剂的聚丙烯酰胺凝胶进行等电聚焦,变性的蛋白质根据其等电点的不同进行分离。
2.凝胶处理:将凝胶从管中取出,用含有SDS的缓冲液处理30分钟,使SDS与蛋白质充分结合。
3.凝胶固定:将处理过的凝胶条放在SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳浓缩胶上,加入丙烯酰胺溶液或熔化的琼脂糖溶液使其固定并与浓缩胶连接。sds聚丙烯酰胺凝胶电泳
4.第二维电泳:在第二维电泳过程中,结合SDS的蛋白质从等电聚焦凝胶中进入SDS-聚丙烯酰胺凝胶,在浓缩胶中被浓缩,在分离胶中依据其分子量大小被分离。

本文发布于:2024-09-22 04:18:07,感谢您对本站的认可!

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标签:凝胶   聚焦   浓缩   含有   蛋白质
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