蠕虫学完全剖检术及蠕虫标本采集与制作

蠕虫学完全剖检术及蠕虫标本采集与制作
蠕虫学完全剖检术及蠕虫标本采集与制作
一、实验目的及要求
掌握寄生虫完全剖检法,通过剖解采集家畜的全部寄生虫标本,并进行鉴定和计数,为诊断和了解蠕虫病的流行情况,防治和研究寄生虫病提供科学依据。
胃蝇二、实验器材
解剖刀,解剖剪,镊子,标本瓶,体视显微镜,透视显微镜,贝尔曼法装置。瓷盆、瓷量杯、带胶皮头玻璃滴管、玻璃烧杯、载玻片、盖玻片、普通玻璃块、铁水桶、肥皂粉、毛巾。
药品生理盐水、20%福尔马林、10%福尔马林、5%福尔马林、70%酒精、1%盐水等
三、实验方法、步骤和操作要领
根据实际工作中的要求不同,蠕虫学完全剖检术可分为寄生虫学完全剖检法、某个器官的寄生虫剖检法(如旋毛虫的调查等)和对某些器官内的某一种寄生虫的剖检法(如牛血吸虫的剖检收集法)。
(一)剖检前的准备
1.动物的选择。对于因寄生虫病感染而需作出诊断的动物及驱虫药物试验的动物则可直接用于寄生虫学剖检。而为了查明某—地区的寄生虫区系时,动物必须选择确实在该地区生长的,并应尽可能包括不同的年龄和性别,同时瘦弱或有临床症状的动物被视为主要的调查对象。也可以采用因病死亡的家畜进行剖解。死亡时间一般不能超过24小时(一般虫体在病畜死亡24~48崩解消失)。
对每头用于寄生虫学剖检的动物都应在登记表上详细填写动物种类、品种、年龄、性别、编号、营养状况、临床症状等。
2.选定做剖检的家畜在剖检前先绝食1~2天,以减少胃肠内容物,便于寄生虫的检出。
3.对家畜进行剖解前,对其体表应作认真检查和寄生虫的采集工作。观察体表的被毛和皮
肤有无瘢痕、结痂、出血、皲裂、肥厚等病变,并注意对体外寄生虫(虱、虱蝇、蜱、螨、皮蝇幼虫等)的采集。
4.在进行剖解前最好先取粪便进行虫卵检查、计数,初步确定该畜体内寄生虫的寄生情况,对以后寻虫体时可能有所帮助。但也应注意,不要因为粪便检查结果,而给工作者带来不全面的主观印象,忽视了未在粪便中发现虫卵的那些虫体的寻。
5.剖检家畜进行动脉放血处死,如利用屠宰场的屠畜可按屠宰场的常规处理,但脏器的采集必须合乎寄生虫检查的要求。
(二)家畜的完全剖检技术及寄生虫的采集
在家畜死亡或捕杀后,首先制作血片,染镜检,观察血液中有无寄生虫。然后进行剖解。剖检程序如下:
1.淋巴结和皮下组织的检查及寄生虫的采集。按照一般解剖方法进行剥皮,并随检观察身体各部淋巴结和皮下组织有无虫体寄生。发现虫体随即采集并作记录。
2.头部各器官的检查及寄生虫的采集。头部从枕骨后方切下,首先检查头部各个部位和感觉器官。然后沿鼻中隔的左或右约0.3cm处的矢状面纵形锯开头骨,撬开鼻中隔,进行检查。
(1)检查鼻腔鼻窦。检查鼻腔鼻窦,取出虫体,然后在水中冲洗,沉淀后检查沉淀物。看有无羊鼻蝇蛆、水蛭(水牛)、疥癣虫、锯齿状舌形虫寄生。
(2)检查脑部和脊髓。打开脑腔和脊髓管后先用肉眼检查有无绦蚴(脑多头蚴或猪囊尾蚴),羊鼻蝇蛆寄生。再切成薄片压薄镜检,检查有无微丝蚴寄生。
(3)检查眼部。先眼观检查,再将眼脸结膜及球结膜在水中刮取表层,水洗沉淀后检查沉淀物,
最后剖开眼球,将眼房水收集在平皿内,在放大镜下检查是否有丝虫的幼虫、囊尾蚴、吸吮线虫寄生。
(4)检查口腔。检查唇、颊、牙齿间、舌肌、咽头,有无囊尾蚴、蝇蛆、筒线虫、蛭类寄生。
3.腹腔各脏器的检查及寄生虫的采集。按照一般解剖方法剖开腹腔,首先检查脏器表面的寄生虫和病变。再逐一对各个内脏器官进行检查。然后收集腹水,沉淀后观察其中有无寄生虫寄生。
(1)消化系统检查及寄生虫采集。在结扎食道末端和直肠后,先切断食道、胃肠上相连的肝、胰脏以及肠系膜、直肠末端,取出消化系统。消化系统所属的肝、脾、胰也一并取出。再将食道、胃(反刍动物的四个胃应分开)、小肠、大肠、盲肠分段作二重结扎后分离。胃肠内有大量的内容物,应在1%盐水中剖开,将内容物洗入液体中,然后对粘膜循序仔细检查,洗下的内容物则反复加1%盐水沉淀,待液体清澈无为止,再取沉渣进行检查。为了检查沉渣中细小的虫体,可在沉渣中滴加碘液,使粪渣和虫体均染成棕黄,继之以5%的硫代硫酸钠溶液脱,但虫体着后不脱,仍然保持棕黄,而粪渣和纤维均脱,故棕虫体易于辨认。
①食道。先检查食道的漿膜面,观察食道肌肉内有无虫体,必要时可取肌肉压片镜检。再剖开或用筷子将食道反转,仔细检查食道粘膜面,有无寄生虫的寄生。用小刀或裁玻片刮取粘膜表层,压在两块载玻片之间检查,当发现虫体时,揭开上面的载玻片,用挑虫针将
虫体挑出。应注意粘膜面有无筒线虫、纹皮蝇(牛)、毛细线虫(鸽子等鸟类)、狼旋尾线虫(犬、猫),漿膜面有无肉孢子虫(牛羊)寄生。
②胃。应先检查胃壁外面。对于单胃动物,可沿胃大弯剪开,将内容物倒在指定的容器内,检出较大的虫体。然后用1%的盐水将胃壁洗净,取出胃壁并刮取胃壁粘膜的表层,把此刮下物放在两块玻片之间作压片镜检。洗下物应加1%的盐水,反复多次洗涤,沉淀,等液体清净透明后,分批取少量沉渣,洗入大培养皿中,先后放在白或黑的背景上,仔细观察并检出所有虫体。在胃内寄生的有马的胃线虫、胃蝇蛆、马蛔虫,猪的蛔虫,猪鸡的棘头虫,多种动物的颚口虫和毛园线虫等。如有肿瘤时可切开检查。
对反刍兽可以先把第一、二、三、四胃分开。检查第一胃时注意检出胃粘膜上的虫体,然后注意观察与胃壁贴近的胃内容物中的虫体,发现虫体全部检出来,胃内容物不必冲洗。第二、三胃的检查方法同第一胃,但对第三胃延伸到第四胃的相连处要仔细检查,必要时可以把部分切下,采取同第四胃的检查方法。第四胃的检查方法同单胃动物胃的检查方法。
③肠系膜。分离前先以双手提起肠管,把肠系膜充分展开,然后对着光线从十二指肠起问
后依次检查,看静脉中有无虫体(血吸虫)寄生,分离后剥开淋巴结,切成小块,压片镜检。
④小肠。把小肠分为十二指肠、空肠、回肠3段,分别检查。先将每段内容物倒入指定的容器内,再将肠壁翻转(即将肠浆膜内翻入肠腔内,使其粘膜面翻到外面)。然后用1%盐水洗涤肠粘膜面,仔细检出残留在上面的虫体,洗下物和沉淀物分别用反复沉淀法处理后,检查沉淀物中所有的虫体。看是否有毛圆线虫、钩虫、蛔虫、旋毛虫、同盘吸虫、华支睾吸虫、棘头虫以及寄生于各种动物的相应的绦虫、胃蝇蛆和球虫寄生。
⑤大肠。大肠分为盲肠、结肠和直肠3段,分段进行检查。在分段以前先对肠系膜淋巴结进行检查。在肠系膜附着部的对侧沿纵轴剪开肠壁,倾出内容物,以反复沉淀法检查沉淀物内寄生虫,对叮咬在肠粘膜上的寄生虫可直接采取,然后把肠壁用1%盐水洗净,仍用反复沉淀法检出洗下物中所有的虫体,已洗净的肠粘膜面再作一次仔细检查,最后再取肠粘膜压片检查,以免遗漏虫体。
⑥肝脏。首先观察肝表面有无寄生虫结节,如有可作压片检查。然后沿输胆管剪开肝脏,检查有无寄生虫,其次把肝脏自胆管的横断面切成数块放在水中用两手挤压,或将其撕成
小块,置37℃温水中,待其虫体自行走出(即贝尔曼法原理)。充分水洗后,取出肝组织碎块并用反复沉淀法检查沉淀物。
对有胆囊的动物要注意检查胆囊,可以先把胆囊从肝上剥离,把胆汁倾入大平皿内,加生理盐水稀释,检出所有的虫体最后检查胆汁,粘膜上有无虫体附着,也可用水冲洗,把冲洗后的水沉淀后,详细检查。
⑦胰腺。用剪刀沿胰管剪开,检查其中虫体,而后将其撕成小块,用贝尔曼法分离虫体,并用手挤压组织,最后在液体沉淀中寻虫体。
⑧脾脏。检查法与胰腺相同。
(2)泌尿系统检查及寄生虫采集。骨盆腔脏器亦以与消化系统同样的方式全部取出。先行眼观检查肾周围组织有无寄生虫。注意肾周围脂肪和输尿管壁有无肿瘤及包囊,如发现后切开检查,取出虫体。随后切取腹腔大血管,采取肾脏。剖开肾脏,先对肾盂进行肉眼检查,再刮取肾盂粘膜检查,最后将肾实质切成薄片,压于两玻片间,在放大镜或解剖镜下检查。剪开输尿管、膀胱和尿道检查其粘膜,并注意粘膜下有无包囊。收集尿液,用反复沉淀法处理。检查有无肾虫的寄生。
(3)生殖器官的检查及寄生虫采集。检查内腔,并刮取粘膜表面作压片及涂片镜检。怀疑为马媾疫或牛胎儿毛滴虫时,应涂片染后油浸镜检查。
4.胸腔各器官的检查及寄生虫的采集。胸腔脏器的采取,按一般解剖方法切开胸壁,注意观察脏器表面有无寄生虫蚴及其自然位置与状态,然后连同食管及气管采取胸腔内的全部脏器,并收集储留在胸腔内的液体,用水洗沉淀法进行寄生虫检查。

本文发布于:2024-09-22 16:53:08,感谢您对本站的认可!

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