⽆菌室⼀般是在⽣物实验室内专辟的⼀个⼩房间,⾯积不宜过⼤,约4m2~5m2,⾼2.5m左右即可。⽆菌室外要设⼀个缓冲间、净化风淋间及更⾐间。⽆菌室和缓冲间都必须密闭。室内装备必须有空⽓过滤装置。⽆菌室和缓冲间都装有紫外线灯,⽆菌室的紫外线灯距离⼯作台⾯lm。⽆菌室内的地⾯、墙壁必须平整,不易藏污垢,便于清洁。⼯作台的台⾯必须处于⽔平状态。⼯作⼈员进⼊⽆菌室应在更⾐室穿戴好灭菌的⾐、帽、鞋,经过净化风淋室,再到缓冲间,然后进⼊⽆菌室进⾏检验⼯作。 县级市的企业⼀般实验室多使⽤⼩型超净⼯作台。超净⼯作台其结构简单,便于移动,⼯作台内有紫外灯和净化风机,外部是推拉式⼩门或开两个洞的玻璃门,操作时将双臂伸进去即可。
(1)⽆菌操作间的洁净度应达到10000级,室内温度保持在20℃-24℃,湿度保在45%~60%,超净台洁净度应达到100级。⽆菌室应每⽉检查菌落数,在⽆菌室或超净⼯作台开启的状态下,取内径90mm的⽆菌培养⽫若⼲,⽆菌操作分别注⼊融化并冷却⾄约45℃的平板计数琼脂培养基的15mL,放⾄凝固后,倒置于36℃ ±1℃培养箱培养48h,证明⽆菌后,取平板 3~5个,分别放置在⼯作位置的左中右等处,开盖暴露30分钟后,倒置于36℃ ±1℃培养箱培养 48h,取出检查。100级洁净区平板杂菌数平均不得超过1个菌落,10000级的洁净室平均不得超过3个菌落,如超过限度,应对⽆菌室进⾏彻底消毒,直⾄重复检查合乎要求为⽌。
(2)⽆菌室应保持清洁整齐,室内仅存放必须的检验⽤具如酒精灯、酒精棉、打⽕机、镊⼦、接种环、剪⼑及玻璃笔等。严禁堆放杂物,以防污染。
(3)⽆菌室应备有⼯作浓度的消毒液,如 5%的甲酚溶液,75%的酒精,0.1%的新洁尔灭溶液等。
工作台面(4)需要带⼊⽆菌室使⽤的仪器、药品、玻璃器⽫等⼀切物品,均应包扎严密或应经适宜的⽅法灭菌。如培养⽫、吸管⽤不锈钢简装好在160℃-170℃的⼲燥箱中灭菌 1h~2h;⽣理盐⽔⽤⾼压灭菌器于121℃灭菌20分钟等。 (5)⽆菌室使⽤前必须打开⽆菌室和缓冲间的紫外灯辐照30分钟以上,并且同时打开净化风机进⾏换⽓。在紫外灯关闭后半⼩时⽅可进⼊⽆菌室进⾏⼯作。在样品检验完毕后,应及时清理剩余样品和各种药品及玻璃器⽫,安全退出后再打开所有紫外灯辐照灭菌30分钟。
(6)送检样品在检验前应保持外包装完整,不得开启,以防污染。检验前,⽤75%的酒精棉球消毒外表⾯,必要时⽤点燃的酒精棉进⾏灭菌。
(7)每次操作过程中,均应做空⽩对照,以检查⽆菌操作的可靠性。
(8)吸取菌液时,必须⽤吸⽿球吸取,切勿直接⽤⼝接触吸管,如吸管碰到⼿及其它未灭菌的物体,必须重新更换,以防污染。
(9)接种针每次使⽤前后,必须通过⽕焰燃烧灭菌,待冷却后,⽅可接种培养物。
(10)带有菌液的吸管、试管等器⽫应浸泡在盛有5%的来苏⼉溶液的消毒桶内消毒,24h取出冲洗。培养⽫则需在⾼压灭菌器中重新灭菌后⽅可处理营养基,切记不要直接冲⼊下⽔道中,防⽌阻塞。如有菌液洒在桌上或地上,应⽴即⽤5%⽯碳酸溶液或 3%的来苏⼉倾覆在被污染处⾄少 30min,再做处理,⼯作⾐帽等受到菌液污染时,应⽴即脱去,⾼压蒸汽灭菌后洗涤。
以上就是关于⽆菌室的设计要求。更多实验室相关资讯敬请关注我们。