一、实验目的
掌握血涂片的制作，观察血细胞的形态及在不同环境下的反应。
三、实验器材与试剂
器材：显微镜、试管、医用一次性采血针、酒精棉球、镊子、经脱脂洗净的载玻片等。 试剂：瑞氏染液、缓冲液、蒸馏水、香柏油等。
四、实验步骤
1、采血
（1）准备试管：取合适数量和规格的试管备用。
（2）检查注射器：打开一次性采血针包装，检查有无阻塞和漏气，备用。
（3）选择静脉：人体坐位，前臂水平伸直置于桌面枕垫上。暴露穿刺部位，选择容易固定、明显可见的肘部静脉。 (4)消毒：先用30g/L碘酊棉签自所选静脉穿刺处从内向外、顺时针方向消毒皮肤，待碘酊挥发后，再用75%乙醇棉签以同样方法拭去碘迹，待干。
(5)扎压脉带：在采血部位上端扎压脉带或止血带，并嘱被采血者反复握拳几次后握紧拳头，使静脉充盈暴露，便于穿刺。
(6)穿刺：取下针头无菌帽，以左手拇指固定静脉穿刺部位下端，右手拇指和中指持采血针，沿静脉走向使针头与
皮肤成30°角斜行快速刺入皮肤，然后以5°角向前穿破静脉壁进入静脉腔。见回血后，将针头顺势探入少许，以免采血时针头滑出；但不可用力深刺，以免造成血肿，同时立即去掉压脉带。
(7)抽血：固定采血针，采血针另一端连接试管，抽至所需血量后，用消毒干棉球压住针孔，迅速拔出采血针。按压针孔数分钟，以防出血。
(8)采血标本颠倒混匀，便与抗凝剂充分结合。
2、推片
取干净载玻片，让血滴在离玻片一端中4-5mm处，注意手指持载玻片的边缘，不触及表面。取一块边
缘光滑的载玻片做推片。将其一端置于血滴前方，向后移动到接触血滴，使血液均匀分散在推片与载玻片呈30-45度角，向另一端平稳地推出。涂片推好后，迅速在空气中摇，使之自然干燥。
3、染
用特种玻璃铅笔在血膜两侧画两条线，防止染液外溢。再将瑞氏染液（伊红-亚甲基蓝）滴在血膜上，至染液淹没全部血膜，染1分钟。加等量缓冲液与染液混合后再染5-10分钟。最后用蒸馏水把染液洗掉，用吸水纸吸干，自然干燥后，即可观察。
4、镜检
（1）调试好显微镜。
（2）低倍镜观察：采用10×目镜观察血涂片的质量，选择细胞分布均匀、染良好、细胞排列不拥挤（即红细胞单个分散不重叠）的区域（一般在血涂片的体尾交界处），准备进一步检测。
（3）高倍镜观察：转换40×目镜，整体观察血涂片细胞着，有无特殊细胞。
（4）油镜观察：在选定的观察区域，滴加香柏油1滴，转换油镜，仔细观察白细胞的形态结构，红细胞的大小、形态是否正常，细胞内有无内容物，以及血红蛋白的充盈度和着是否正常。同时作好记录。 五、结果观察
1、红细胞：
小而圆，没有细胞核，血涂片中最多，常被染成淡红，细胞的边缘厚，中间薄，使细胞边缘的颜比中间的深。
2、白细胞：
分为有粒白细胞和无粒白细胞，有粒白细胞包括嗜酸性白细胞、嗜碱性白细胞和嗜中性白细胞；无粒白细胞包括淋巴细胞和单核细胞。加香
（1）嗜酸性白细胞：
数量较少，但在血涂片中可以到。细胞质中存在粗大的嗜酸性颗粒，胞质常被染成红或玫瑰花，细胞核分叶形，染成紫红。
（2）嗜碱性白细胞：
数量最少，在血涂片中很难到。细胞质中存在粗大的嗜碱性颗粒，胞质常被染成蓝紫，细胞核分叶形，染较深，但常被粗大的蓝紫颗粒掩盖。
（3）嗜中性白细胞：
在有粒白细胞中，它的数量最多，很容易到。细胞质染成淡红，胞质内含有细小的颗粒，一般不易看清，细胞核为蓝紫，核分杆状、蹄形和分叶形。
（4）淋巴细胞：
在白细胞中数目是最多的，大小不等，可分为大淋巴细胞、中淋巴细胞、小淋巴细胞。大淋巴细胞较少，占中小淋巴细胞的1/4～1/18。细胞质所占的比例较小，但随细胞体积增大而相应增多，核周围细胞质，染成天兰，细胞核大，圆形，染成紫蓝。
（5）单核细胞：
数目不多，是血细胞中最大的细胞。核为肾形或马蹄形，颜比淋巴细胞较淡，细胞质为淡灰蓝。
（6）血小板：
为不规则的细胞质小块或碎片，形状象雪花，在血小板中有细小的紫蓝颗粒。血小板常聚集在红细胞之间（注意：在观察过程中注意染料、渣子和细胞及血小板等的区别）。
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