不同中药乙醇提取物对酪氨酸酶抑制活性的对比分析

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江苏省扬州市

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【摘要】目的：艾叶提取物研究分析不同中药乙醇提取物对酪氨酸酶抑制活性的对比。方法：选取中药诃子、艾叶、紫草、白芷等药材应用70%乙醇提取方法，将维生素C、熊果苷作为阳性参照，运用体外酪氨酸酶抑制方法，对比不同药物的活性。结果：中药诃子酪氨酸酶抑制率达到50.34%，艾叶酪氨酸酶抑制率为21.67%，而紫草酪氨酸酶抑制率达到-10.36%。结论：中药诃子、艾叶醇提取物对于酪氨酸酶有抑制活性，能够为美白中药的研究提供新方向。

【关键词】乙醇提取物；美白；酪氨酸酶抑制活性

美容中药与化妆品在我国有着悠久的发展历史，最早在《五十二病方》中记录有关美容的方剂共8首[1]。由于中药的毒副作用相对比较低，应用后有着明显的效果，所以深受爱美女士

的追捧。中医药美白、祛斑等产品在国外发展迅猛，市面上有许多美白产品都是利用抑制酪氨酸酶活性，降低黑素形成，具有美白的作用，药物美白作用效果可利用监测手段，将酪氨酸酶抑制率作为重要的评估标准。本次研究基于体外实验，借助酪氨酸酶活性抑制实验，对诃子、艾叶、紫草、白芷等药材美白与抗菌消炎中药的美白活性进行观察，为研发中药美白制剂提供可靠的研究依据。

1.材料与方法

1.1材料选取

智能浴缸熊果苷由台湾第一化工原料股份有限公司提供；酪氨酸酶与酪氨酸源自于美国Sigma企业；KH2PO4与K2HPO4由台湾联工化学制药厂提供。

1.2中药供试液制取

中药饮片诃子、艾叶、紫草、白芷中药源于北京同仁堂药方，称量10克原药材，放在三角瓶中，加入用药乙醇150毫升浸泡12小时，在三角瓶口处，覆盖玻璃皿，文火加热45分钟，把中药提取液进行抽滤处理，旋转蒸发仪器浓缩，旋转真空干燥仪器，使其在温度为5

0℃的环境下干燥处理，制备供试中药提取物粉末，利用天平精准称量17毫克中药提取液干燥粉末，将其转移到容量瓶之中，通过纯净水超声溶解定容处理后，制取成浓度为每升1.7毫克的供试药液。

1.3配制溶液

PBS缓冲液配制（pH值为6.8）方法：把53毫升KH2PO4溶液（0.5mol/L）和47毫升K2HPO4溶液（0.5mol/L）相互混合，将其加入氯化钠9克，稀释到1000毫升，形成PBS缓冲液。

酪氨酸溶液配制方法：称量酪氨酸18.1毫克，将其与20毫升PBS缓冲液相互混合，加热搅拌直到呈透明样。

酪氨酸酶溶液配制方法：称量酪氨酸酶1.9毫克，加入PBS溶液10毫升，在避光冰浴下，实施超声波震荡直到透明，获得酪氨酸溶液1000U/mL。

熊果苷供试液配制方法：利用PBS溶液进行熊果苷配制，浓度为每毫升4毫克。

维生素C供试液配制方法：利用PBS溶液进行维生素C配制，浓度为每毫升4毫克。

1.3酪氨酸酶抑制测试方法

取5mmol/L酪氨酸溶液50微升与100微升中药水溶液混合放在96孔板。然后把上述混合溶液在避光情况下，兑入1000U/mL酪氨酸酶溶液20微升，在温度为25℃情况下反应10分钟。阳性参照组为熊果苷、维生素C，浓度控制在每毫升4毫克。纯净水即为空白参照组。每个样品均设定5个复孔。利用紫外分光光仪器，读取吸光度值波长为475纳米。样品对于酪氨酸酶抑制率公式为，抑制比= ，而含酪氨酸梅和不含酪氨酸酶吸光度差值公式为（△A）=C-D。其中，A表示纯净水加入酪氨酸酶吸光度数值；B表示纯净水没有加入酪氨酸酶吸光度数值；C表示加药样本加入酪氨酸酶吸光度数值；D表示加药样本没有加入酪氨酸酶吸光度数值。

结果

参照药维生素C针对酪氨酸酶抑制率达到94.61%，阳性参照药物熊果苷抑制率达到44.36%，常见的美白中药白芷抑制率为-7.44%。中药诃子酪氨酸酶抑制率达到50.34%，艾叶酪氨酸酶抑制率为21.67%，而紫草酪氨酸酶抑制率达到-10.36%，详情见表一。

表一：四种中药醇提物对于酪氨酸酶抑制的情况

长链二元酸

样品	△A	抑制率
白芷	0.417±0.024	-7.44±12.34
紫草	0.432±0.021	-10.36±5.87
艾叶	0.304±0.029	21.76±7.87
诃子	0.189±0.011	50.34±2.46
维生素C	0.004±0.003	94.61±0.68
熊果苷	0.159±0.022	线圈缠绕机 44.36±6.23

3.讨论

中医药有关美白中药的研究十分久远，记录于《神农本草经》中的美白中药[2]，具有悦泽、悦颜、美等作用。中医五行学中指出[3]，白属于金，黑属于水，而金可生水，所以面较黑的人可用白中药入肺达到补肾水的目的，除此之外，中医注重整体理

念，以活血化瘀、补气血等方式，改善全身阴阳气血，也可发挥美白的作用。白芷在《神农本草经》中记载，可长肌肤，润泽颜，用于面脂；艾叶在《本草纲目》中记录，可面上皯黯；紫草在《名医别录》中记录，可小儿疮；诃子也被称作为诃黎勒，主要久泄久咳，可发挥乌发生发的作用。

根据本次临床中药制剂的研究分析，发现阳性参照组维生素C酪氨酸酶抑制性显著，阳性参照药物熊果苷抑制率达到44.36%，该实验结果与周家明、欧景春、赵爱等人研究结果相一致[4]。尽管在研究中发现，熊果苷和维生素C对于酪氨酸酶的最高抑制率能大于90%以上，但是浓度相同的情况下，维生素C抑制作用更加明显。本次临床研究中，白芷与紫草酪氨酸酶抑制率出现负值，说明这两种药物的醇提物对于酪氨酸酶的抑制作用比较低，能够起到促进作用。

诃子作为收敛固涩重要，在藏药中素有“药中之王”的美誉贺育民[5]，根据现代药理学研究发现，诃子有着显著的抗菌、抗氧化、抗病毒等作用，能作为中药化妆品的主要原料。中药艾叶的抑制酪氨酸酶作用明显，也可用于美白成分展开深层次分析。

综上所述，当前，美白类产品屡见不鲜，成为社会大众关注的焦点，因痤疮、粉刺、脱发

等疾病是微生物导致，本研究通过分析诃子、艾叶等抑菌活性中药的美白活性，可为日后形成美白药和抑菌中药复方提供可靠参考依据。

参考文献：

[1] 李晓雯,王春丽.金露梅在酪氨酸酶催化中的抑制机理[J].中成药,2020,42(06):191-194.

[2] 刘春媛,廖峰,汝文文,等.阿胶粗多糖脱蛋白方法比较及抑制酪氨酸酶活性研究[J].安徽农业科学,2020,640(03):190-192.

[3] 李军,周涛,郑伟,等.太子参不同提取物及环肽HB对酪氨酸酶抑制活性的分析[J].时珍国医国药,2019,285(05):82-84.

[4] 周家明,欧景春,赵爱,等.三七复方提取液对酪氨酶抑制率作用的研究[J].人参研究,2020,001(003):7-9.

[5] 张国哲,刘平平,季禹乔,等.不同中药乙醇提取物对酪氨酸酶抑制活性的比较[J].中国医药导报,2020,017(016):34-36,48.

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