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尿沉渣分析仪问答

发布日期：2007-09-05 发布人:ylqx123 最后更新时间:2009-05-15 浏览次数:1210

1.为什么要采用尿沉渣计数板？

答：尿沉渣的量和压(涂)片厚度是标准化重要环节，在普通玻片上随意滴加沉渣液或加盖玻片(甚至不加盖玻片)，不能提供标准化的结果。建议使用标准化的沉渣计数板。

2.尿沉渣的检查内容应包括哪些？

答：《尿沉渣检查标准化的建议(讨论稿)》中规定尿沉渣的检查内容应包括：

A. 细胞：红细胞、白细胞、吞噬细胞、上皮细胞(包括肾小管上皮细胞、移行上皮细胞、鳞状上皮细胞)、异型细胞等。

B. 管型：透明管型、细胞管型、颗粒管型、蜡样管型、脂肪管型、混合管型、宽形管型等。

C. 结晶：磷酸盐、草酸钙、尿酸结晶和药物结晶等。

D. 细菌、寄生虫(或虫卵)、真菌、精子、粘液等。

E. 临床医生特殊要求的其他成分。

3.等离子割干化学尿分析是怎样测定白细胞的？

答：干化学法检查尿内白细胞的原理，是基于粒细胞浆内含有酯酶，能水解试剂带膜块中的吲哚酚酯生成吲哚酚和有机酸，进一步氧化而显，颜的深浅与白细胞含量的多少成正比。

高比重尿、维生素C、高葡萄糖尿、清蛋白、淋巴细胞尿、头孢菌素可造成测定结果的假阴性。

4.干化学尿分析是怎样测红细胞的？

答：红细胞、血红蛋白及肌红蛋白具有类似过氧化物酶的作用，将无的底物氧化为有化合物。

某些氧化物如漂白粉等可导致假阳性反应。尿路感染，由于细菌产生过氧化物酶也会引起假阳性。

尿液中大量维生素C的存在而产生还原作用，可抑制试验氧化作用，引起假阴性。甲醛也会使试验敏感性降低或呈假阴性。

5.为什么说干化学尿分析只能用于“过筛”？

答：如前所述，干化学测定尿液中白细胞、红细胞都属于间接测量，容易受到各种因素干扰，出现各种假阴性、假阳性报告。

不同厂家、不同型号的试剂带敏感度不一样，而且还有批间误差的影响。

6.尿沉渣分析仪分成哪几类？

答：尽管近年来在尿沉渣检查中发展了一些新的方法(例如用单克隆抗体识别各种细胞)，但就商品化的尿沉渣分析仪而言，按测量原理分类，目前只分成镜检图像式和流式细胞法两类。

在镜检图像式尿沉渣分析仪中按测量池的不同，又可分为一次性标准定量板式和流动池式两种。

7.尿沉渣分析仪发展情况如何？

答：经典的尿沉渣显微镜检查已伴随检验界渡过了漫长岁月，至今仍是最直接最权威的方法。尿沉渣分析仪的历史还是短暂的，新产品正在不断涌现。

1988年，美国国际遥控图像系统公司研制成功世界上第一台摄像式尿沉渣分析仪，由检验人员在计算机显示屏上鉴别细胞。

8.流式细胞法尿沉渣分析仪的测量原理是什么？

答：这种尿沉渣分析仪应用了流式细胞和电阻抗原理：当尿标本被稀释并染后，靠液压作用通过鞘液流动池，它被无粒子颗粒的鞘液包围，使每个细胞以单个纵列的形式通过流动池的中心轴线，并被氩激光光束照射。仪器将每个细胞发出的荧光、散射光和电阻抗信号转变成电信号。根据每个尿液标本的直方图和散射图来区分细胞及其形态。

9.流式细胞法尿沉渣分析仪有何优缺点？

答：流式细胞法尿沉渣分析仪是目前自动化程度最高、分析速度最快的尿沉渣仪(每个样品约需72秒钟)。然而，它也存在着明显不足之处：

- 无法区分小圆上皮细胞的类别(如肾小管上皮细胞、中层和底层移行上皮细胞等)，必须离心染镜检才能区分；

- 只能检测出透明管型和标出有病理管型的存在可能，只有通过离心镜检，才能确认是那一类管型；

- 仪器对酵母细胞、精子细胞和结晶有标记时都应离心镜检，才能真正区分；

- 不能提供尿沉渣的真实形态图，而是散射图和直方图。

所以，专家们的共识是：干化学尿液分析仪、流式细胞法尿沉渣分析仪等均只能作为尿液分析的筛选手段，而只有显微镜检查是最终的。

用户对选择流式细胞法尿沉渣分析仪持谨慎态度的另一些原因是：

- 仪器价格昂贵，而且日常使用成本也过高，试剂成本过高；

- 仪器的使用、维护较复杂；

- 容易发生交叉污染、阻塞等现象。

流式细胞法尿沉渣分析仪适用于标本量非常大的医院，作为尿沉渣筛选检查设备，对有疑问的标本进一步进行显微镜检查是不可避免的。

10.流动池式尿沉渣分析仪如何工作？

答：流动池式尿沉渣分析仪目前市场上有两类：一类是定量的，流动池内有计数格；另一类为非定量，流动池内无计数格，故无法满足尿沉渣定量检查标准的要求。流动池式定量尿沉渣分析仪一般由流动计数池、定量加样器、显微镜、计算机、干化学尿分析仪构成。用蠕动泵自动吸入定量尿液，流动计数池刻有4个大方格(容积为0.25μl /大格)，每个大方格又分成25小方格(容积为0.01μl核桃开口机 /小格)。通过人工操作显微镜观察标本，计数分型完毕，自动冲洗标本。

11.流动池式尿沉渣分析仪有何特点？

答：流动池式尿沉渣分析仪的优点是基于可靠的显微镜观察和自动进样、自动冲洗。其缺点是：

- 测试速度太慢：进样时需吸入时间和稳定时间，如果反复冲洗不净的话还要长时间浸泡，而人工操作显微镜不仅缓慢而且工作强度大；

- 操作难以规范化，受人为因素影响，同一标本往往因观察者不同而结果不同，即使同一观察者也会因两次观察路径不同而结果不同；

- 存在不可避免的交叉污染，这是流动池式仪器的通病；

- 容易发生阻塞，连接部的死区造成污垢的积累；

- 如果对标本染就会污染流动池，导致无法冲洗干净。

12.选购流动池式尿沉渣分析仪时应注意什么？

答：目前市场上流动池式尿沉渣分析仪会出现以下一些问题：

- 非定量流动池上没有定量刻度，当然也就无法以XX/μl报告；

- 流动池内腔厚度未经常化计量，无法保证被测样品的体积精度；

- 流动池内腔过厚，细胞无法在同一焦平面上观察到，并且样品漂移容易发生漏检；

- 片面强调染，造成流动池污染。

13.镜检时如何才能克服尿沉渣标本的非均匀性？

答：尿沉渣标本的显著特征就是非均匀性。为了克服标本非均匀性对测试结果的影响，镜检时要做到两条：

- 保证不少于最小观察体积；

- 严格按规定路径进行观察。

14.什么叫自动显微平台技术？

答：所谓自动显微平台技术是指显微镜的载物平台(X、Y轴方向)的运动、聚焦(Z轴方向)、物镜的切换、光源的强弱等等都受控于计算机。也就是说，只要通过鼠标、控制器、甚至网上传来的控制命令，显微镜就能按照人们的意愿动作起来。普利生AMP2000触摸笔型自动显微平台的扫描精度达1微米。因此，该技术具有广阔的应用前景，目前已成功应用于病理远程全景同步会诊、尿沉渣自动扫描等领域。

15.用于离心尿液的离心管有何要求？

答：《尿沉渣检查标准化的建议(讨论稿)》中规定：频率补偿“应具备以下条件：清洁、透明、带刻度，刻度应至少标明10ml、1ml、0.2ml，容积应12ml，试管底部呈锥形或缩窄形。试管口应尽可能具有密封装置，最好使用不易破碎一次性塑料或玻璃离心管。”

16.尿沉渣专用离心管有何特点？

答：目前，定量尿沉渣检查普遍采用的一种专用离心管，管壁有刻度，可盛放10ml尿液。管的底部有一个0.2ml的突出部分，在倒去离心后的上清液时，利用液面的表面张力将0.2ml的尿沉渣样品留在这里面。也就是说很方便地获得了浓缩50倍的标本。

17.是不是任何标本都必须浓缩50倍？

答：这是一种误解。一般标本浓缩50倍后，可提高检测率，减少观察体积。对于那些明显混浊的标本，可以不浓缩，以免浓缩后又要稀释，稀释过程很容易引入测量误差。计算数据时要考虑到浓缩与不浓缩的区别。

18.对于离心机有何要求？

答：《尿沉渣检查标准化的建议(讨论稿)》中规定：“采用水平式离心机，离心时应盖上盖，以保证安全。离心时，机内温度应尽可能保持<25°C，离心机相对离心力应在400xg左右。

离心机转速与相对离心力的换算公式为：

g = 11.8 x ( rpm/1000 )2 x R

或 rpm = 1000 x ( 500/11.8 x R )1/2

注：rpm为每分钟转数

微型液位开关R为半径，指从离心机轴中央到离心管底部的距离

g为相对离心力

例如：水平式离心机半径为20cm时，采用1338r/min(或1350r/min)

水平式离心机半径为16cm时，采用1495r/min(或1500r/min)

水平式离心机半径为10cm时，采用1892r/min(或1900r/min)

19.对显微镜有何要求？

答：《尿沉渣检查标准化的建议(讨论稿)》中建议：“尿沉渣检查尽可能使用具有内置光源的显微镜，光线强度可调，应具备40倍、10倍的物镜和10倍的目镜。同一实验室如有多台显微镜，各显微镜的物镜及目镜的放大倍数应一致。”

同时又建议：“有条件的实验室应开展各种尿液有形成分的染检查，配置多种类型显微镜(如相差显微镜，偏振光显微镜等)，以便于有形成分的进一步鉴别。水溶液锂电池”

20.FASTREAD 10尿沉渣定量分析板有何特点？

答：FASTREAD 10板为NCCLS和中华医学会检验分会推荐的一次性尿沉渣定量分析板。

每块板上有10个大格，即可放10个样品。每个大格的可观察体积约7μl ，其中划有刻度的计数区的总体积为精确的1μl 。每个计数区分为10个中格，每个中格又划分为16个小格。也就是说，1μl 体积的样品，在这里被精密地分成160个小格。

由于采用一次性定量板，所以不再需要清洗，也不用担心染剂的玷污，省力省时无交叉污染。

定量板的价格便宜，而且不需其它试剂。

顾可梁教授通过对普通载玻片不加盖玻片法、载玻片加盖玻片法、改良Neubauer计数池法、FASTREAD 10定量板法四种方法进行比较后指出，在实验室常用的尿沉渣检查法中，以定量分析板法的变异系数最小(尿沉渣镜检，上海医学检验杂志，2000；15(2)：68)。

21.尿沉渣标本染的目的是什么？

答：相当多专家赞同尿沉渣非染镜检，他们对尿沉渣染的疑虑是：

- 某些染液的成分会导致溶血现象，在低比重尿中尤为明显；

- 由于大量染液的加入而引起稀释比的计算误差。

应当指出在大多数情况下尿沉渣非染镜检足以胜任，然而有些情况下，染的优点将很有帮助。选择合适的染方法可减小发生溶血的几率。至于染液稀释标本而引起的误差可从技术上予以改进。

尿沉渣染的目的主要是：

- 防止尿沉渣标本中主要成分在镜检时遗漏和误认；

- 便于确定某些特殊成分(如脂肪球等)；

- 判断难辨别的尿沉渣成分(如半透明的上皮细胞等)或异形细胞等；

- 制备临床或科研所需永久性标本。

22.如何进行尿沉渣标本染？

答：建议尿沉渣临床检验采用以下步骤，以避免染液对尿沉渣标本的稀释作用：

- 在标准定量分析池中进行非染定量计数；

- 对于有疑问的标本，可进一步染分型，可在玻片上观察。

如果要提高分辨率，采用位相差显微镜是一种明智的选择。而偏振光显微镜对尿中脂肪和结晶的鉴别也很有帮助。

对于采用一次性FASTREAD板的用户当然可以直接在定量池中测量染标本，操作简单方便。

23.有哪些常用尿沉渣标本染方法？

答：常用的尿沉渣染方法有湿片染（活体染、超活体染）和固定染（组织化学染、荧光染和免疫化学特定成分染）两类。

不同的染方法有助于不同的检测目的，有时它们往往是互补的。

在大部分场合，采用SM(Sternheimer-Malbin)或S(Sternheimer)活体染已能解决问题。

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