丙酮浓缩蛋白溶液步骤2

丙酮浓缩蛋白溶液步骤
操作步骤:
1) 1mL冷丙酮(-20℃)至200μL样品溶液,混匀。
2) -20℃放置2 h
实验室用振荡器
3) -4℃离心15 min
4) 弃去上清液,用丙酮清洗沉淀2-3次。
5) 使沉淀风干,于1-2倍沉淀体积的缓冲液中再悬浮沉淀。
步骤2;
1cold acetone-20℃)
21体积  样品+4体积冷丙酮;混匀,-20℃过夜
312000g离心 10分钟
4,小心吸去上清
5,放在桌上风干,大约20来分钟(自己看着半,剩余的丙酮量不一样,各地方条件也不一样)
6,加1乘的sds sample buffer(量自己根据实验目的定),仔细洗离心管远离转轴侧面的管壁(特别对于微量蛋白)。珊瑚姜votex喷嘴清洗,煮,冷,上样sds-page
我的步骤:
Protocol
1.将蛋白样品沸水煮3min,混匀后离心,取250μL钱箱,加入-20℃预冷的丙酮1mL-20℃冰箱静置3h
2.-4℃离心(12000r/min20min,弃上清(直接倒掉)。
3.200μL丙酮洗涤沉淀2次。
4.室温静置风干25min
氮化铝烧结炉5.加入裂解buffer 20μL玻璃钢冷却塔图解votex,室温静置2min,加入5μL loading buffer,沸水煮3min
6.12000r/min离心1min,上样,电泳,考染。

本文发布于:2024-09-21 19:55:39,感谢您对本站的认可!

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