实验二细菌的涂片制备、染及观察 (7)
实验三真菌制片及形态的观察 (9)
实验四培养基的制备和灭菌 (10)
实验五乳酸菌微生物的分离、纯化和培养 (13)
实验六食品中细菌总数的测定 (16)
实验七食品中大肠菌的测定 (19)
数码彩扩实验八环境因素对微生物的影响 (22)
实验九细菌的生理生化反应 (25)
食品微生物学实验课的目的是：训练学生掌握微生物学最基本的操作技能；了解食品微生物学的基本知识；加深理解课堂讲授的某些微生物学理论。同时，通过实验；培养学生观察、思考、分析问题、解决问题和提出问题的能力；养成实事求是、严肃认真的科学态度，以及敢于创新的开拓精神；树立勤俭节
约、爱护公物的良好作风。
为了上好微生物学实验课，并保证安全，特提出如下注意事项：
1、每次实验前必须对实验内容进行充分预习，以了解实验的目的、原理和方法，做到心中有数，思路清楚。
2、认真、及时做好实验记录，对于当时不能得到结果而需要连续观察的实验，则需记下每次观察的现象和结果，以便分析。
3、实验室内应保持整洁，勿高声谈话和随便走动，保持室内安静。
4、实验时小心仔细，全部操作应严格按操作规程进行，万一遇有盛菌试管或瓶不慎打破、皮肤破伤或菌液吸人口中等意外情况发生时，应立即报告指导教师，及时处理，切勿隐瞒。
5、实验过程中，切勿使乙醇、乙醚、丙围等易燃药品接近火焰。如遇火险，应先关掉火源，再用湿布或沙土掩盖灭火。必要时用灭火机。
6、使用显微镜或其他贵重仪器时，要求细心操作，特别爱护。对消耗材料和药品等要力求节约，用毕后放回原处。
7、每次实验完毕后，必须把所用仪器抹净放妥将实验室收拾整齐，擦净桌面，如有菌液污染桌面或其他地方时，可用3%来苏尔液或5%石碳酸液覆盖0.5h后擦去，如系芽孢杆菌，应适当延长消毒时间。凡带菌之工具（如吸管、玻璃刮棒等）在洗涤前须浸泡在3%来苏尔液中进行消毒。
8、每次实验需进行培养的材料，应标明自己的组别及处理方法，放于教师指定的地点进行培养。实验室中菌种和物品等，未经教师许可，不得携出室外。
9、每次实验的结果，应以实事求是的科学态度填人报告表格中，力求简明准确，认真回答思考题，并及时汇交教师批阅。
10、离实验室前将手洗净，注意关闭火、煤气、门窗、灯等。
实验一 显微镜的使用与细菌形态构造的观察
一、目的要求
1、掌握光学显微镜的使用和保护方法
2、认识细菌的基本形态与结构
二、 显微镜的使用
普通光学显微镜是一种精密的光学仪器。以往最简单的显微镜仅由几块透镜组成，而当前使用的显微镜由一套透镜组成。普通光学显微镜通常能将物体放大1500—2000倍。
（一）显微镜的构造
口袋领域1、显微镜的机械装置
显微镜的机械装置包括镜座、镜筒、物镜转换器、载物台、推动器、粗动螺旋、微动螺旋等部件 （1）镜座 镜座是显微镜的基本支架，它由底座和镜臂两部分组成。在它上面连接有载物台和镜筒，它是用来安装光学放大系统部件的基础。
（2）镜筒 镜筒上接接目镜，下接转换器，形成接目镜与接物镜（装在转换器下）间的暗室。
从物镜的后缘到镜筒尾端的距离称为机械筒长。因为物镜的放大率是对一定的镜筒长度而言的。镜筒长度的变化，不仅放大倍率随之变化，而且成像质量也受到影响。因此，使用显微镜时，不能任意改变镜筒长度。国际上将显微镜的标准筒长定为160mm ，此数字标在
现代普通光学显微镜利用目镜和物镜两组透镜系统来放大成像，故又常被称为复式显微
镜。它们由机械装置和光学系统两大部分组成
（图1-1）。在显微镜的光学系统中，物镜的性
能最为关键，它直接影响着显微镜的分辩率。而
涤纶单丝在普通光学显微镜通常配置的几种物镜中，油镜
的放大倍数最大，对微生物学研究最为重要。与
铁硅铝其他物镜相比，油镜的使用比较特殊，需在载玻
片与镜头之间加滴镜油：增加照明亮度，增加显
微镜的分辨率。
物镜的外壳上。
（3）物镜转换器物镜转换器上可安装3—4个接物镜，一般是三个接物镜（低倍、高倍、油镜）。Nikon显微镜装有四个物镜。转动转换器，可以按需要将其中的任何一个接物镜和镜筒接通，与镜筒上面的接目镜构成一个放大系统。
（4）载物台载物台中央有一孔，为光线通路。在台上装有弹簧标本夹和推动器，其作用为固定或移动标本的位置，使得镜检对象恰好位于视野中心。 （5）推动器是移动标本的机械装置，它是由一横一纵两个推进齿轴的金属架构成的，好的显微镜在纵横架杆上刻有刻度标尺，构成很精密的平面座标系。如果我们须重复观察已检查标本的某一部分，在第一次检查时，可记下纵横标尺的数值，以后按数值移动推动器，就可以到原来标本的位置。
偷钱猫存钱罐（6）粗动螺旋粗动螺旋是移动镜筒调节接物镜和标本间距离的机件，老式显微镜粗螺旋向前扭，镜
头下降接近标本。新近出产的显微镜（如Nikon显微镜）镜检时，右手向前扭载物台上升，让标本接近物镜，反之则下降，标本脱离物镜。
（7）微动螺旋用粗动螺旋只可以粗放的调节焦距，要得到最清晰的物象，需要用微动螺旋做进一步调节。微动螺旋每转一圈镜筒移动0.1毫米（100微米）。新近出产的较高档次的显微镜的粗动螺旋和微动螺旋是共轴的。
2、显微镜的光学系统
显微镜的光学系统由反光镜，聚光器，接物镜，接目镜等组成，光学系统使物体放大，形成物体放大像。
（1）反光镜较早的普通光学显微镜是用自然光检视物体，在镜座上装有反光镜。反光镜是由一平面和另一凹面的镜子组成，可以将投射在它上面的光线反射到聚光器透镜的中央，照明标本。不用聚光器时用凹面镜，凹面镜能起会聚光线的作用。用聚光器时，一般都用平面镜。新近出产的较高档次的显微镜镜座上装有光源，并有电流调节螺旋，可通过调节电流大小调节光照强度。
（2）聚光器聚光器在载物台下面，它是由聚光透镜、虹彩光圈和升降螺旋组成的。聚光器可分为明视场聚光器和暗视场聚光器。
聚光器安装在载物台下，其作用是将光源经反光镜反射来的光线聚焦于样品上，以得到最强的照明，使物象获得明亮清晰的效果。聚光器的高低可以调节，使焦点落在被检物体上，以得到最大亮度。一般聚光器的焦点在其上方1.25mm处，而其上升限度为载物台平面下方0.1mm。因此，要求使用的载玻片厚度应在0.8—1.2mm之间，否则被检样品不在焦点
上，影响镜检效果。聚光器前透镜组前面还装有虹彩光圈，它可以开大和缩小，影响着成像的分辨力和反差，若将虹彩光圈开放过大，超过物镜的数值孔径时，便产生光斑；若收缩虹彩光圈过小，分辨力下降，反差增大。因此，在观察时，通过虹彩光圈的调节再把视场光阑（带有视场光阑的显微镜）开启到视场周缘的外切处，使不在视场内的物体得不到任何光线的照明，以避免散射光的干扰。
（3）物镜安装在镜筒前端转换器上的接物透镜利用光线使被检物体第一次造像，物镜成像的质量，对分辨力有着决定性的影响。物镜的性能取决于物镜的数值孔径（numerical apeature简写为NA），每个物镜的数值孔径都标在物镜的外壳上，数值孔径越大，物镜的性能越好。
物镜的种类很多，可从不同角度来分类：
根据物镜前透镜与被检物体之间的介质不同，可分为：
道路声屏障设计①干燥系物镜以空气为介质，如常用的40×以下的物镜，数值孔径均小于1。
②油浸系物镜常以香柏油为介质，此物镜又叫油镜头，其放大率为90×—100×，数值孔值大于1。
根据物镜放大率的高低，可分为：
①低倍物镜指1×—6×，NA值为0.04—0.15；
②中倍物镜指6×—25×，NA值为0.15—0.40；
③高倍物镜指25×—63×，NA值为0.35—0.95；
④油浸物镜指90×—100×，NA值为1.25—1.40。
（4）目镜目镜的作用是把物镜放大了的实像再放大一次，并把物像映入观察者的眼中。目镜的结构较物镜简单，普通光学显微镜的目镜通常由两块透镜组成，上端的一块透镜称“接目镜”，下端的透镜称“场镜”。上下透镜之间或在两个透镜的下方，装有由金属制的环状光阑或叫“视场光阑”，物镜放大后的中间像就落在视场光阑平面处，所以其上可安置目镜测微尺。
（二）显微镜的使用操作及注意事项
显微镜结构精密，使用时必须细心，要按下述操作步骤进行。
1、观察前的准备
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