生物药生产工艺常用的纯化技术介绍

生物药生产工艺常用的纯化技术介绍常用纯化技术和方法简介
一、纯化的常用方法及原理
滤小、电
荷吸附白杂质分
易堵塞
离心
度和沉
降速率
固液
电动卷帘门控制器分离
单;不适
合大规模
使用
萃取
白质的
跆拳道护具性质不
质分离
一般
比较经
济;处理
时间长,直播延时
残留物检
测分
级盐
解性
蛋白
质分离
二、纯化方法的应用和选择
焙烧回转窑1、抗体:
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目前我们最常用的的技术方法是离心和深层过滤。
在实验室级别的样品制备和纯化,从效率和经济成本方面考虑,通常会使用离心的方法去除细胞和大部分颗粒碎片。在大规模的情况下一般使用深层过滤,相比较离心,深层过滤在大规模发酵料液的处理过程中效率更高,对设备要求较低(与离心机比较),并且目前市面上复合材料的深层过滤器具有去除HCP和DNA等杂质的效果。
因此不同情况下应选择不同的方案。
(2)亲和
深层过滤之后,在绝大部分情况下会使用亲和层析。亲和层析是应用生物高分子与配基可逆结合的原理,将配基通过共价键牢固结合于载体上而制得的层析系统。这种可逆结合的作用主要是靠生物高分子对它的配基的空间结构的识别。Protein A由于其与抗体Fc片段良好的特异亲和性,较高的纯化倍数,工艺的简易性而被用于大多数抗体纯化工艺中的捕获阶段。
亲和层析的填料价格较为昂贵,因此亲和层析可能需要设计通过几次循环层析来捕获这一批产品的目标蛋白。在这里要考虑和平衡好
时间长短和经济成本的影响。时间太长,对上样液中目标蛋白的稳定性不利;循环次数太低,填料需求量太大,生产成本会提高。
(3)离子交换层析
离子交换层析有阴离子层析和阳离子层析。依据蛋白的酸碱性,极性,所带阴阳离子的不同。电荷不同的物质,对填料上的离子交换剂有不同的结合和力,改变冲洗液的离子强度和pH值,物质就能依次从层析柱中分离出来。这两种层析根据蛋白的特性来选择结合或者穿透模式进行纯化。
其中,往往会有一个离子交换层析主要用来分离目标蛋白中的酸性、中性和碱性组份;另一个离子交换层析用于少量杂质,如:HCP、DNA、内毒素等物质的分离。
(4)疏水层析
疏水层析从分离纯化生命物质的机制来看,也属于吸附层析一类,利用固定相载体上偶联的疏水性配基与流动相中的一些疏水分子发生可逆性结合而进行分离。该方法基于的是蛋白质的疏水差异,在高盐溶液中,蛋白质会与疏水配基相结合,而其他的杂蛋白则没有此种性质,利用此种性质,可以将蛋白质进行分离。

本文发布于:2024-09-24 17:10:09,感谢您对本站的认可!

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标签:纯化   层析   结合   蛋白   分离   方法
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