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Human Schwann Cells
海鲜机
雪旺细胞是神经嵴的衍生物，形成周围神经髓磷脂轴突的髓鞘。它们分别环绕在周围神经轴突的轴上，沿着轴突节形成一层髓磷脂髓鞘。雪旺细胞对周围神经的发育，功能和再生起着重要作用。当轴突快死亡时，雪旺细胞环绕其周围帮助消化轴突。留下连续的雪旺细胞形成一个空的管道，新的轴突在管道的末端开始生长。在周围神经中雪旺细胞的数量是受到严格调控的.体外增殖受到诸如PDGF，FGF，神经元和其它多肽类生长因子的刺激。雪旺细胞提供相对简单，明确，易得的哺乳动物模型以用来研究一系列发育问题。了解血旺细胞的生物学特征具有重要的临床意义，不仅对于研究神经病变产生的环境和神经的再生，而且细胞或他们的前体可能特别适合用作中枢神经系统修复的植入物。
HSC由ScienceCell 实验室从人脊神经分离而来。HSC超低温保存和运输，每只冻存管含>5 x 10^5 细胞/毫升。HSC荧光免疫法检测具有特征 ，具有S-100, GFAP 和 CD90. 细胞HSC H
IV-1, HBV, HCV, mycoplasma, 细菌, 酵母菌和真菌均阴性. HSC 应确保在ScienCell 实验室提供的条件下进一步培养。 推荐使用Schwann Cell Medium (SCM, Cat. No. 1701)半轴螺栓培养雪旺细胞。
产品使用
HSC仅用于科研。未经核准用于人或动物，或用于体外诊断程序。
储存
收到细胞后立即将细胞从干冰直接转移到液氮中，直到用于实验时取出。 运输
干冰
Reference
[1] Jessen, K. R. and Mirsky, R. (1999) Schwann cells and their precursors emerge as major regulators of nerve development. Trends Neurosci. 22:402-410.
[2] Syroid, D. E., Maycox, P. R., Burrola, P. G., Liu, N., Wen, D., Lee, K. F., Lemke, G., Kilpatrick, T. J. (1996) Cell death in the Schwann cell lineage and its regulation by neuregulin. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 93:9229-9234.
[3] Rahmatullah, M., Schroering, A., Rothblum, K., Stahl, R. C., Urban, B and Carey, D. J. (1998) Synergistic regulation of Schwann cells proliferation by heregulin and forskolin. Mol. Cell. Biol. 18:6245-6252. 酒罐
细胞培养说明
玩具直升机结构注意：冷冻保存的细胞非常脆弱。将小瓶冻存管置于37°C水浴融化细胞，然后尽快移入培养液中，尽量减少操作。
经过以下步骤后开始培养细胞
1.准备多聚赖氨酸包被的培养瓶(2 μg/cm2，推荐用T-75的培养瓶)。向T-75瓶内加入10ml无菌水，然后加入15μl多聚赖氨酸原液(10mg/ml,ScienCell cat. no. 0413).将培养瓶放入培养箱中孵育过夜(至少在37°C中过一小时)
2.准备完全培养基：用70%的酒精为培养基和添加物的外表面消毒，然后放到无菌的地方。在无菌环境下打开每一个添加物小管并用吸管加入到基本培养基中。用培养基冲洗每一个小管以保证添加物全部加入基本培养基中。
3.用无菌水冲洗多聚赖氨酸包被的培养瓶两次并向瓶内加入20 ml完全培养基。将培养瓶放入超净台中，然后融化细胞。
4.将小瓶放入37°C水浴中，轻轻地握住并旋转小瓶直到完全融化。将小瓶立刻移出水浴，擦干，用70%的酒精冲洗小瓶，然后放到无菌环境中。小心地打开盖子，注意手指不要碰到里面的螺纹。用1ml eppendorf吸管使管内物重悬。
5.将管中内含物放入平衡的，多聚赖氨酸包被的培养瓶中。推荐接种密度大于10,000 cells/cm2。
注意：细胞融化后不推荐稀释和离心，因为这些操作比培养基中DMDO残留物对细胞的伤害大。细胞接种在多聚赖氨酸包被的培养瓶中能促进细胞贴壁。
6.盖好盖子，轻轻地摇晃培养瓶以使细胞分布均匀，如需气体交换则均匀的瓶盖。
7.将培养容器放入培养箱中。
8.为了得到良好的结果，在培养开始后至少16个小时内不要动培养物。第二天更换培养基以去除残留的DMSO和未贴壁的细胞，然后每隔一天进行如上操作。良好的培养细胞将呈现特殊的椭圆形，有明显的细胞核和两极延伸，呈完全地纺锤形状，并且细胞数量在培养2-3天后会加倍。
培养的维持
电缆防盗
1.从冰冻的细胞构建培养物后，第二天早晨更换含有添加物的培养基。随后的传代培养中，每隔48小时更换一次培养基。
2.每隔一天更换一次培养基，直到培养物有50%融合
3.一量培养物达到50%融合，则要每天更换培养基直到培养物大约达到80%融合
传代培养：
1.细胞达到90%融合时需传代培养
2.准备多聚赖氨酸包被的培养瓶(2 μg/cm2)二波罗蜜
3.加热培养基，胰酶/EDTA消化液，胰酶中和液和DPBS(磷酸盐缓冲液)到室温。我们不推荐在使用前用37°C水浴加热试剂和培养基。
4.用DPBS冲洗细胞
5.用10 ml胰酶/EDTA消化液孵化细胞(以T-75的培养瓶为例)。直到80%细胞呈圆形(在显微镜下观察)。立刻加入10 ml 胰酶中和液并轻轻摇晃培养瓶。
注意：使用ScienCell实验室的胰酶/EDTA消化液，会把胰酶消化对细胞的损害减少到最低。
6.收取细胞并将其移入 50ml离心管中。另外用10ml培养基冲洗培养瓶以收集残留的细胞。在显微镜下观察剩余细胞数量以确定是否收集成功。剩余细胞数应小于5%
7.以1000转离心收取的细胞5分钟，然后在培养基中重悬细胞
8.细胞计数然后将它们接种到新的，多聚赖氨酸包被过的培养瓶中，细胞密度以推荐数值为准。
注意：处理人来源的产品存在潜在的风险。尽管每一株细胞都经检测艾滋病毒，乙肝病毒，丙肝病毒呈阴性，检测不能达到100%准确，因此，必须采取适当的保护措施避免无意的暴露。操作这些材料时要带手套和安全镜。不要用嘴吸。我们推荐以下通用的程序来处理人类来源的产品：以最小的预防来对抗污染。
以上由北京裕恒丰科技有限公司提供
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