专题二 克隆技术
最新考纲
1．植物组织培养 Ⅱ 2．动物细胞培养和体细胞克隆 Ⅰ 3．动物细胞融合和单克隆抗体 Ⅱ 考纲解读
1．植物组织培养、植物体细胞杂交的过程及应用 2．动物细胞培养、单克隆抗体的制备及应用 3．动物细胞的培养与有毒物质的检测
知识点一 植物组织培养技术
看一看：在诱导愈伤组织分化时哪些物质起作用？
想一想：什么是人工种子？它有什么优点？
议一议：如何通过细胞培养检测有毒物质毒性的大小？
知识点二 动物克隆技术
⎩⎪⎨⎪⎧单克隆抗体⎩⎪⎨⎪⎧制备：
优点：特异性强，灵敏度高，产量大
应用⎩
⎪⎨⎪环己甲酸
⎧作为诊断试剂用于疾病和运载药物：制成○33“ ”
议一议：鼠的单克隆抗体能否用于人体疾病的？
在单克隆抗体的制备过程中，两次筛选的目的不同
(1)由于B 淋巴细胞和骨髓瘤细胞的融合方式有多种，因此第一次筛选的目的是选出杂交瘤细胞，淘汰掉未融合的或同种细胞融合的细胞。
(2)由于从小鼠体内提取的B 淋巴细胞可能有多种，因此第一次筛选到的杂交瘤细胞可能有多种，通过克隆化培养和抗体检测进行第二次筛选，以选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞。自我校对：
①无菌和人工控制 ②离体 ③愈伤组织 ④植物细胞的全能性 ⑤离体 ⑥愈伤组织 ⑦
再分化 ⑧细胞 ⑨细胞 ○10纤维素酶和果胶酶 ⑪纤维素酶和果胶酶 ⑫原生质体 ⑬脱分化 ⑭愈伤组织 ⑮人工种子 ⑯花药 ⑰纯合二倍体 ⑱极大地缩短了育种年
限，节约了人力物力 ⑲无菌、无毒 ⑳营养 ○
21温度、pH ○22气体环境 ○23两个 ○24DNA ○
25杂交 ○26远缘 ○27B 细胞—B 细胞 ○28杂交瘤细胞 ○
29骨髓瘤—骨髓瘤细胞 ○30杂交瘤细胞 ○31产生专一抗体 ○32单克隆抗体 ○33生物导弹 看一看：植物激素在愈伤组织的分化中起重要作用，生长素用于诱导细胞的分裂和根的分化。细胞分裂素是促进细胞的分裂和不定芽的分化。
想一想：①人工种子是以植物组织培养得到的胚状体、不定芽、顶芽和腋芽等为材料，包装上人工薄膜制成。
②它的优点是可以保持优良品种的遗传特性，生产上也不受季节的限制。
议一议：用含有一定浓度有毒物质的细胞培养液和正常细胞培养液同时培养正常细胞，通过对照观察变异细胞的百分数来确定其毒性强弱。
95202272议一议：不能。因为小鼠的B 淋巴细胞所产生的抗体与人体B 淋巴细胞产生的抗体是不同的。
，植物组织培养与动物细胞培养的比较
高考地位：5年9考 （2011江苏卷、安徽卷，2010浙江卷……）
提醒 ①植物组织培养需要生长素和细胞分裂素，其中生长素可诱导愈伤组织生根，细胞分裂素可促进愈伤组织生芽。
②在动物细胞的传代培养中，细胞可能癌变。
③两种技术手段培养过程中都进行了有丝分裂，都是无性繁殖，都可称克隆，都不涉及减数分裂。
④植物组织培养最终产生新个体，体现了细胞的全能性；动物细胞培养产生大量细胞，不形成新个体，故不能体现细胞的全能性。
本考点多与基因工程综合在一起考查，以非选择题的形式进行命题，近年高考单科试卷也多有涉及，也多与必修内容综合在一起考查。
【典例1】►(2011·江苏)下列有关植物组织培养的叙述，正确的是( )。 A ．愈伤组织是一团有特定结构和功能的薄壁细胞
B ．二倍体植株的花粉经脱分化与再分化后得到稳定遗传的植株
C ．用人工薄膜将胚状体、愈伤组织等分别包装可制成人工种子
D ．植物耐盐突变体可通过添加适量NaCl 的培养基培养筛选而获得
解析 本题考查植物细胞工程，同时考查综合分析与迁移能力。愈伤组织细胞是一团排列疏松而无规则，高度液泡化的呈无定形状态的、具分生能力的薄壁细胞，不具有特定的结构和发布任务
功能。二倍体植株的花粉中只含一个染体组，培养得到的个体为单倍体，高度不育，幼苗用秋水仙素处理后得到的植株才能稳定遗传。人工种子中包裹的不能是愈伤组织。用特定的选择培养基可筛选出所需要的突变体类型。 答案 D
【训练1】►动物细胞培养与植物组织培养的重要区别在于( )。 A ．培养基不同
B ．动物细胞培养不需要在无菌条件下进行
C ．动物细胞可以传代培养，而植物细胞不能
D ．动物细胞能够大量培养，而植物细胞不能
解析 动物细胞培养所用的培养基是液体培养基，其中通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等。而植物组织培养所用的培养基是固体培养基，通常含有水、矿质元素、激素、蔗糖、氨基酸、琼脂等。可见，动物细胞培养所用的培养基与植物组织培养的培养基是不相同的。 答案
me0407
医用护理床
A
，植物体细胞杂交与动物细胞融合的比较
高考地位：5年6考 （2011福建卷、浙江卷……）
提醒 (1)在细胞融合时，可出现多种细胞，如B 细胞—B 细胞，骨髓瘤细胞—骨髓瘤细胞，B 细胞—骨髓瘤细胞。
(2)动物细胞融合和植物体细胞杂交，均需对细胞进行筛选，但筛选的方法不同，前者可用免疫法，后者可用机械方法、生理学或遗传学方法。
(3)各项技术在使用中一般要借助于其他某种技术的协助，如动物细胞融合、单克隆抗体的制备、胚胎移植、核移植等，其中动物细胞培养是动物细胞工程技术的基础。
本考点内容是高考命题的热点内容，特别是单克隆抗体的制备是高考命题的热点，复习中应引起重视。速记机
【典例2】►(2010·福建卷)[生物—现代生物科技专题]
红细胞生成素(EPO)是体内促进红细胞生成的一种糖蛋白，可用于肾衰性贫血等疾病。由于天然EPO 来源极为有限，目前临床上使用的红细胞生成素主要来自于基因工程技术生产的重组人红细胞生成素(rhEPO)，其简要生产流程如右图。
请回答下列问题。
(1)图中①所指的是________技术。
(2)图中②所指的物质是________，③所指的物质是________。
(3)培养重组CHO 细胞时，为便于清除代谢产物，防止细胞产物积累对细胞自身造成危害，应定期更换________。
(4)检测rhEPO 的体外活性需用抗rhEPO 的单克隆抗体。分泌该单克隆抗体的________细胞，可由rhEPO 免疫过的小鼠B 淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合而成。
解析 (1)核DNA 的体外扩增是利用PCR 技术。(2)由图示分析：从人胚胎干细胞提取出②，经反转录可形成cDNA ，可知②为翻译EPO 的模板mRNA ，③为rhEPO 。(3)细胞培养过程中，应定期更换培养液，以添加营养物质，清除代谢废物。(4)由rhEPO 免疫过的小鼠B 淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合，可以筛选出能够分泌抗rhEPO 的单克隆抗体的杂交瘤细胞。 答案 (1)PCR (2)mRNA rhEPO (3)培养液 (4)杂交瘤
【训练2】►(2011·金华模拟)下列有关植物体细胞杂交的叙述，不正确的是( )。 A ．用酶解法去掉细胞壁，分离出有活力的原生质体
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