Hoechst是一种膜通透性的荧光染料，故正常细胞和中早期调亡细胞均可被Hoechst着，但是正常细胞核Hoechst染的形态呈圆形，淡蓝，内有较深的蓝颗粒；而调亡细胞的细胞核由于浓集而呈亮蓝，或核呈分叶，碎片状，边集。 常用Hoechst33258和Hoechst33342，前者渗透性不如后者好，多用于活细胞染，而后者活细胞和死细胞均可。Hoechst33342 能透过胞膜完整的细胞,嵌入细胞核DNA ,使之发出明亮的蓝荧光。凋亡的细胞核染增强,荧光更为明亮,呈圆状或固缩状、团块状结构。非凋亡细胞核呈现荧光深浅不一的结构样特征。二者形态迥然相异,很易判别。 Hoechst 染方法：1. 贴壁细胞 A. 取普通洁净盖玻片于70%乙醇中浸泡5分钟或更长时间，无菌超净台内吹干或用细胞培养级PBS或0.9%NaCl等洗涤三遍，再用细胞培养液洗涤一遍。将盖玻片置于六孔板内，种入细胞培养过夜，使约为50%-80%满。 分词技术
B. 刺激细胞发生凋亡后，吸尽培养液，加入固定液，固定10分钟或更长时间（可4℃过夜）。 C. 去固定液，用PBS或0.9%NaCl洗两遍，吸尽液体。洗涤时宜用摇床，或手动晃动数次。 D. 加入终浓度为10μg/ml的 Hoechst染液，染5分钟。也宜用摇床，或手动晃动数次。
E. 用PBS或0.9%NaCl洗两遍。
F. 将贴有细胞的盖玻片盖于载玻片上，尽量避免气泡。切勿弄反。
G. 荧光显微镜或激光共聚焦显微镜检测。
2. 悬浮细胞
A. 离心收集细胞样品于1.5ml离心管内，加入固定液，缓缓悬起细胞，固定10分钟或更长时间（可4℃过夜）。
B. 离心去固定液，用PBS或0.9%NaCl洗两遍，每次3分钟。
C. 最后一次离心后吸去大部分液体保留约50μl液体，再缓缓悬起细胞，滴加至载玻片上，尽量使细胞分布均匀。
D. 稍晾干，使细胞贴在载玻片上不易随液体流动。
E. 均匀滴加Hoechst染液，染5分钟。用吸水纸从边缘吸去液体，微晾干。
F. 用PBS或0.9%NaCl洗两遍。
G. 盖上一洁净的盖玻片，尽量避免气泡。
H. 荧光显微镜或激光共聚焦显微镜检测。
3. 组织切片
麻元友A. 对于任何常见切片，处理至常规可以进行免疫染时，或完成常规的免疫染后，即可进行后续的Hoechst染。
B. PBS或0.9%NaCl洗两遍，每次3分钟，吸尽液体。洗涤时宜用摇床，或手动晃动数次。可在六孔板中操作。
C. 加入Hoechst染液，染5分钟。也宜用摇床，或手动晃动。
D. 用PBS或0.9%NaCl洗两遍，每次3分钟。
E. 将切片置于载玻片上，盖上一洁净的盖玻片，尽量避免气泡。
F. 荧光显微镜或激光共聚焦显微镜检测。
烷基叔丁基醚 荧光物质均易发生淬灭，染后的样品宜避光。 在使用抗淬灭封片液的情况下可以减缓淬灭，但仍宜尽量避光。注意控制染时间，染时间过长容易出现假阳性。
防辐射面料
PI单染
重新随机进程将处于对数生长期的细胞，经过不同浓度的药物处理不同时间后，离心（太阳能光伏密封胶1000 rpm，5 min）收集贴壁和悬浮的所有细胞，PBS洗涤，再次离心（1000 rpm，5 min），每个离心管的细胞重悬于500μL 预冷的PBS中，缓慢注入3mL预冷无水乙醇进行固定，4℃下保存（可保存1～2周），待检。细胞上机检测前低速离心除去乙醇，PBS洗涤2次，每个离心管分别加入500 μL PBS重悬细胞，然后加入10 μL 10mg/mL无DNase的Rnase A，37℃孵育30 min，转入冰浴，加入25 μL 10mg/mL PI，冰上避光染30 min，300目筛绢过滤，于EPICS XL型流式细胞仪中进行检测及分析数据。
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