苯并芘检测 3通迅作者：韩林涛(1976-)，男，湖北中医学院中药资源与中药复方省部共建教育部重点实验室学术秘书、助理研究员。Tel:
(027)62029728;E 2mail:hanlt711@163
陆文亮1
，李鸿彬1
，黄 芳2
，韩林涛
23
(11天津天士力集团研究院，天津300402;
21湖北中医学院中药资源与中药复方省部共建教育部重点实验室，湖北武汉430061)
摘 要：目的：建立以HP LC 法测定感冒颗粒中葛根素含量的方法。方法：谱柱为Agilent C 18(250mm ×416mm,5
μm )，流动相为甲醇-水(25∶75)，流速为018m l/m in，检测波长为250n m 。结果：葛根素平均回收率为99145%,RS D 为1163%(n =5)。结论：本法准确、快捷、灵敏度高，重现性好，可用于感冒颗粒质量控制。
关键词：感冒颗粒；葛根素；高效液相谱法；含量测定
中图分类号:R28413 文献标识码:A 文章编号:1000-0704(2008)10-0055-02
感冒颗粒是由葛根、麻黄、桂枝、杏仁、甘草等组成的纯中药制剂，具有清热解毒和止咳平喘的功能，适于病毒性感冒的。方中麻黄辛温，解表散寒，可治外感热病；葛根辛平，解肌发表，可治太阳风寒在表之证；二者相互协同，具有散风解表、止痛退热的功效。葛根为常用的祛风解毒药，其味甘辛、性平，具有降低血管阻力、改善心脑血液循环、减慢心率和降低心肌耗氧量等作用。主要有效成分为异黄酮类化合物，如葛根素、大豆苷元、芒柄花素、大豆苷等，其中以葛根素的含量最高。笔者通过测定葛根素含量，旨在建立感冒颗粒的质量标准，以便更好地控制药品质量。
1 仪器与试药
Agilent1100液相谱仪;Agilent 紫外检测器;Chr o mTek Work Stati on 工作站；感冒颗粒(天津天士力集团研究院研
制批号:20060308,20060309,20060315,20060318,
20060320)；葛根素对照品(中国药品生物制品检定所提供
批号:110752-200209);T D 101树脂(天津市试剂二厂生产，谱用,60～80目)；试剂：甲醇为谱纯；水为超纯水。
2 方法与结果211 检测波长的确定
根据《中华人民共和国药典》2005版有关葛根素含量测定的报道，葛根素的最大吸收波长为250nm [1]。取葛根素对照品适量，用流动相溶解，绘制紫外吸收光谱图(见图1)。结果表明，葛根素在25013nm 处有最大吸收。因此，我们选取葛根素检测波长为250n m 。
212 谱条件
Agilent C 18柱(250mm ×416mm,5
μm )；流动相：甲醇-水(25∶75)；测定波长:250nm；流速:018m l/m in;
led节能灯制作
柱温:25℃。
精密称取葛根素对照品12112mg，加甲醇溶解于50m l 量瓶中，并稀释至刻度，摇匀即得，浓度为012424mg/m l 。
214 供试品溶液的制备
取本品适量，研细，取约011g，精密称定，加水20m l 超声使溶解，以018m l/m in 过D101大孔吸附树脂小柱
(8c m ×018c m )，先用10m l 水洗涤，再用甲醇以015～1m l/m in 速度缓慢洗脱，收集洗脱液并定容至10m l，摇匀即得。215 阴性对照溶液的制备
本品中除葛根外，还含麻黄、桂枝、甘草和糊精等辅料，为了考察其它成分对葛根素测定是否有干扰，我们将空白颗粒剂(缺葛根药材制成的制剂)，按供试品溶液制备方法制成缺葛根的阴性对照溶液。
216 专属性试验蜡烛杯
僧侣鞋
取阴性对照溶液、样品溶液和葛根素对照品溶液，分别注入HP LC 谱仪进行测定，结果供试品和对照品溶液在相应位置上出现相似峰，而阴性对照溶液无干扰。结果如图1。
217 标准曲线的制备
分别精密吸取葛根素对照品溶液2m l 、4m l 、6m l 、8m l 、
10m l 于10m l 容量瓶中，用甲醇稀释并定容至10m l，摇匀
即得。精密吸取各溶液10
μl 进样，注入HP LC 谱仪，测・
55・2008年第30卷第10期 湖北中医杂志
图1 葛根素对照品(B)、样品(A)、
阴性对照(C)HPLC谱图
定葛根素峰面积。以葛根素的进样量为横坐标，以峰面积为纵坐标，进行回归。回归方程为Y=456018X+5134，其相关系数R=01999。由此可知，葛根素进样量为014848～21424μg时，线性关
系良好。
218 精密度试验
取对照品溶液，连续进样5次，每次10μl。以峰面积计算。结果表明，仪器精密度良好,RS D为1106%。
219 稳定性试验
取20060308批号的样品按上述方法处理。在室温条件下分别于0h、4h、8h、12h、24h测定样品中葛根素峰面积，结果是RS D为1146%，表明供试品溶液在制备后24h内较稳定。
2110 重现性试验
取批号为20060308的样品5份，精密称定，分别制备供试品溶液，进样测定，按上述含量测定方法测定葛根素的含量，计算得葛根素平均质量分数为1012mg/g,RS D为0174%。
2111 回收率试验
取批号为20060308的样品5份，每份0105g，精密称定，置具塞锥形瓶中，分别加入上述葛根素对照
品溶液211m l，制备供试品溶液，进行测定，计算得平均回收率为99145%,RS D为1163%，结果见表1。
表1 葛根素回收率试验结果(n=3)
编
号
样品中含量
(mg)
加入量
(mg)
测得值
(mg)
回收率
(%)
平均回收率
(%)
RS D
(%) 1015101511102100100 201500151110199120 301490151019998105991451163 4015201511104101196 501480151019898103
2112 样品测定
取20060308、20060309、20060315、20060318、20060320五批样品，制备供试品溶液。精密吸取供试品溶液和对照品溶液各10μl，按上述谱条件进行测定，外标法计算葛根素质量分数，结果见表2。
表2 感冒颗粒中葛根素含量测定结果(n=2)
批号葛根素/(mg/g)
2006030810121图像识别系统
2006030910114
2006031591720
2006031891851
2006032011122
3 讨论
感冒颗粒中除含有葛根外，另含有麻黄、桂枝、干姜、甘草和辅料糊精等。对于感冒颗粒样品处理方法，我们曾按照药典法和文献方法[2,3]，以甲醇或含水乙醇超声提取后进样，结果表明，处理制得供试品溶液杂质成分多，对葛根素峰干扰较严重，分离效果不好。反复试验后，本法利用大孔吸附树脂富集感冒颗粒样品有效成分并分离干扰杂质，结果：葛根素谱峰峰型对称，无杂质干扰，分离效果较好。试验结果表明，改进药典处理方法后，制备的样品HP LC分离度好，葛根素无杂质干扰，适合本品中葛根素的含量测定，同时也为其他含有葛根素的中药复方制剂提供值得借鉴的方法。
参考文献:
[1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典，第1部[S].北
标定板
京：化学工业出版社,2005.233-234.
[2] 李向阳，李振国.葛根芩连片中葛根素含量测定方法的验证
[J].中医研究,2007,20(5):29-31.
[3] 原红果，王万，陈博，等.感冒清热颗粒中葛根素的含量测
定研究[J].时珍国医国药,2006,17(6):945-946.
(收稿日期:2008-03-10 编辑：郑晓屏)
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・湖北中医杂志 2008年第30卷第10期
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