一、名词解释（10分,每题2分）
原生质体—
再分化——
愈伤组织——
体细胞胚状体——
二、选择题（15分,每小题1.5分）:
A.3% B.5% C.7% D.9%
2.外植体进行表面消毒，所用酒精浓度是________
A.75% B.80% C.90% D.95%
3.培养基的pH一般为________
A.5.0—5.2 B.5.8—6.0 C.6.8—7.0 D.9—10
4.配制6-BA时，由于它不溶于水，常用少量________溶解后，再用水定容至刻度。 A.乙醇 B.NaOH C.HCl
5.培养基进行消毒灭菌时，应在________Mpa（或℃）压力下保持15—20分钟。
A.0.05 (110℃) B. 0.07 (115℃) C. 0.1 (121℃) D. 0.15 (125℃)
6.在茎尖培养中，外植体应选用________。
A. 芽 B. 茎段 C. 叶片. D.子叶
7.要诱导无根试管苗生根，常应在培养基中加入________。
磁铁块A.6-BA B.2，4—D C.IBA D.ABA
8.对水稻花药培养时，常用________培养基效果最好。
A.MS B.N6 C.White D. SH E.B5
9.要诱导愈伤组织的形成，通常在培养基中加入________。
A.IAA B. 2，4—D C. 6-BA D.KT(激动素)
10.使单倍体植物细胞染体加倍，常用的药剂是________。
A.聚乙二醇 B.秋水仙碱 C.山梨醇 D.DTT(二硫苏糖醇).E.甘露醇
三.填空题(每空1分, 共12分):
1. 植物组织培养按培养过程中是否需要光，可分为_______培养和_______培养。
2. 在组织培养中，不耐热的物质用__________法灭菌，而培养基常用__________法灭菌。
3. 在组织培养中，非洲菊是靠茎尖快繁的方式进行繁殖的，而蝴蝶兰是以__________的方式进行快繁的。
4. 在无毒苗的组织培养中，外植体的大小与其成活率成__________，而与脱毒效果成__________。
5. 发根农杆菌和根癌农杆菌都是植物基因遗传转化的载体，因为它们分别含有_______质粒和_______质粒。
磁卡电表6．分离植物原生质体是，需在酶液中加入_______和_________和半纤维素酶等酶类。
7.在配制含抗生素的固体培养基时,抗生素溶液要等经高温蒸汽灭菌的培养基在超净工作台上冷却到_______度时才能加入.
四、是非题（每题1分,共11分）:
1. 试管苗是无毒的（ ）。
2. 胚状体能从愈伤组织中产生（ ）。
3. 在茎尖培养中，所培养的茎尖大小与成活率成正比，与脱病毒率成反比（ ）。
4. 培养基配好后，可在一周内灭菌（ ）。
5. 由于漂白份易使植物漂白,所以在消毒植物叶片时根本不能采用( ).
6. 维生素等有机成分可与植物激素配制成一种母液（ ）。
7.为了消毒灭菌的效果最好，培养基高压蒸汽灭菌时温度越高，时间越长好（ ）。
8. 配制母液的好处在于节省药品（ ）。
9. IAA(吲哚乙酸)较容易氧化失活，故在配培养基时不能使用它（ ）。
10. 由于2，4—D能成功的诱导愈伤组织，因而在分化培养基中也常使用它来促进愈伤组织分化（ ）。
11．培养农杆菌的条件是用YEＢ培养基在３７℃的条件下振荡培养（ ）。
五、简答题（可选3题，其中第5题必选，每题10分，共30分）
sys81.想获得去病毒植株，可通过什么方法实现？在外植体获得和培养过程中应注意什么问题？
2.试述固体培养和液体培养的异同及各自的优点。
3.何谓体胚?影响体胚发生的主要因素有哪些？
4.如何区分不定芽和胚状体的结构？
5.某同学在实验课配制了培养基组成为ＭＳ＋６－ＢＡ４.0mg/L+NAA0.5mg/L的固体培养基，但经过高压灭菌并冷却后，发现，培养基是透明的固体，而是呈很稀的流体状态．请你帮该同学分析，他培养基配制失败的可能原因？
一、名词解释（15分,每题3分）
分化——
外植体——
原生质体——
愈伤组织——
胚状体——
二、填空题(10分,每空1分):
1. 植物组织培养按培养过程中是否添加琼脂，可分为_______培养和_______培养。
2. 在组织培养中，不耐热的物质用__________法灭菌，而培养基常用__________法灭菌。
3. 在组织培养中，兰属植物蝴蝶兰是以__________的方式进行快繁的。
4. 在无毒苗的组织培养中，外植体的大小与其成活率成_________比，而与脱毒效果成__________比。
5. 在植物组织培养过程中，体胚的形态发生有__________和__________两种情况。
6.在分离植物原生质体时，常采用__________法制备原生质体。
三、选择题（15分,每小题1.5分）:
1.在茎尖培养中，外植体应选用________。
A.芽 B.茎段 C.叶片.D.子叶
2.要诱导无根试管苗生根，常应在培养基中加入________。
A.6-BA B.2，4—D C.IBA D.ABA
3.对水稻花药培养时，常用________培养基效果最好。
A.MS B.N6 C. White D. SH E. B5
4.要诱导愈伤组织的形成，通常在培养基中加入________。
A.IAA B.2，4—D C.6-BA D.ABA
5.使单倍体植物细胞染体加倍，常用的药剂是________。
A.聚乙二醇 B.秋水仙碱 C.山梨醇 D.DTT(二硫苏糖醇).E.甘露醇
6.常用培养基的蔗糖含量为________
A.3% B.5% C.7% D.9%
7.外植体进行表面消毒，所用酒精浓度是________
A.70% B.80% C.90% D.95%
8.培养基的pH一般为________
A.5.0—5.2 B.5.8—6.0 C.6.8—7.0 D.9—10
9.配制6-BA时，由于它不溶于水，常用少量________溶解后，再用水定容至刻度。
A.乙醇 B. NaOH C. HCl
10.培养基进行消毒灭菌时，应在________Mpa（或℃）压力下保持15—20分钟。
A.0.05(110℃汽车指纹防盗) B. 0.07(115℃) C. 0.1(121℃) D. 0.15(125℃)
四、是非题（15分，不答不给分，答错倒扣一分）:
1. 试管苗一定是无毒苗（ ）。
2. 胚状体可从外植体产生的愈伤组织中产生（ ）。
3. 在茎尖培养中，所培养的茎尖大小与成活率成反比，与脱病毒率成正比（ ）。
4. 培养基灭菌后，可在二月内使用（ ）。
5. 利用花药培养获得单倍体植株，是由药隔组织的细胞经分裂和分化而成的（ ）。
6. 维生素等有机成分可与植物激素配制成一种母液（ ）。
7. 为了消毒灭菌的效果最好，培养基高压蒸汽灭菌时温度越高，时间越长好（ ）。
8. 配制母液的好处在于节省药品（ ）。
9. IAA(吲哚乙酸)较容易氧化失活，故在配培养基时不能使用它（ ）。
10. 由于2，4—D能成功的诱导愈伤组织，因而在分化培养基中也常使用它来促进愈伤组织分化（ ）。
四、问答题（可选3题，每题10分，共30分）
6.如何区分不定芽和胚状体的结构？
7.何谓体细胞杂交？请举例说明体细胞培养的方法和过程。
8.何谓体胚?影响体胚发生的主要因素有哪些？
提前放电避雷针9.请描述配制培养基的基本过程及有关的注意事项（可用流程图表示）。
五．实验结果分析题（15分）
1. 某同学在实验课配制了培养基配方为ＭＳ+ＫＴ３mg/L+NAA0.5 mg/L+0.9%琼脂+3%蔗糖（pH6.2）的固体培养基，但经过高压蒸汽灭菌后，发现该培养基不是呈透明的固体，而是呈较稀的流体状态，且颜呈浅棕，现请你帮该同学分析，出他培养基配制失败的可能原因？（10分）
2.张三同学利用消毒剂消毒烟草叶片外植体有，接种到已灭菌的固体培养基中培养，一周后发现，所接种的烟草叶片组织块部分出现黄化或褐化，部分培养瓶内出现菌斑有的甚至长出灭菌菌丝？请你结合你的实验经验，帮张三同学分析造成其实验失败的可能原因？（5分）
实验例题：
李明同学做毕业论文实验需采用母液法配制５００毫升固体培养基．其配方如下：ＭＳ＋６－ＢＡ２.０mg/L+NAA0.5 mg/L+3%蔗糖＋０.９％琼脂;而实验室已配备好的供李明使用的母液如下表所示:
培养基组分 | 每升培养基所需用母液量（mL/L 或g／Ｌ） | 配制李明培养基所需用量（单位:mL;或g;或mg,请根据） |
ＭＳ 大量元素母液（） | 50ml/L | ( ) mL |
MS微量元素母液 | 1ml/L | ( ) mL |
MS有机组分母液 | 10ml/L | ( ) mL |
MS铁盐母液 | 5ml/L | ( )热熔胶封箱机 mL |
6-BA 母液,1mg/ml | ( ) mL | ( ) mL |
NAA母液, 1mg/ml | ( ) mL | ( ) mL |
蔗糖(分析纯) | ( ) g | ( ) g |
琼脂(纯度99.9%) | ( ) g | ( ) g |
| | |
(1)现请你帮李明同学计算所需各组分的用量，并将计算结果对应填入该表格的空白处(共12处,每处1.0分,共12分)．
(2)用文字或流程图方式向李明同学描述培养基配制的基本过程及有关的注意事项(10分)．
康大学院生物技术专业《植物组织培养》试题
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