番茄组织培养作者:雷蕾来源:《世纪之星·交流版》2016年第03期 [摘 要]蛇板
针对组织培养中污染这个首要问题及番茄种子的特点对其进行消毒处理,采用次氯酸钠(商品名为安替福民)对两个供试品种即五彩番茄和抗寒番茄进行消毒。两个品种各进行四次处理。每次处理有一组变量,处理结束后取出芽多污染少的变量作为下次处理的必要条件。通过不同的消毒结果,分析出最佳的番茄消毒措施。 [关键词]番茄;种子;次氯酸钠;消毒
植物组织培养是20世纪初开始,以植物生物学为基础发展起来的一项植物繁殖技术。番茄组织培养技术也已用于遗传进化,因而获得无菌苗是番茄组培的关键。污染是组织培养过程中首先遇到的问题,且难以控制,不能把污染降低到可以接受的范围,也就意味着这项工艺不能进行下去。因此,控制污染成了组织培养中的首要技术。对番茄进行组织培养,首先应该得到无菌苗。那么第一步就要对番茄种子进行消毒处理。番茄种子扁平,灰黄带绒毛。所以根据番茄种子的特点及导师的指导和两种消毒液的特点:次氯酸钠对种子无毒害而
防尘接线盒抑制IAA对细胞的影响和幼苗的生长,从而大大降低种子的活力。
一、材料与方法
1. 供试材料
试验选用两个品种,即抗寒番茄、五彩番茄。
2. 滑线导轨试验仪器与药品
高压蒸汽灭菌锅,烘箱,光照培养箱,镊子,小烧杯,玻璃棒,量筒,超净工作台,酒精灯,精密试纸,牛皮纸,标签笔,1N NaOH,1N HCl,次氯酸钠原液,95%医用酒精,蒸馏水等。
3.试验方法
(1)培养基。以1/2MS异位发酵床为基本培养基,不加任何其它激素。1/2MS培养基共1000ml/次。调pH值为5.8,每瓶分装约25ml,共40瓶,并在121℃和1个大气压下灭菌15分钟。
(2)接种前的准备工作。
①配制培养基。称取琼脂10g,蔗糖30g,蔗糖放入少许蒸馏水溶解,用量筒量取MSA100ml,北斗接收机 MSB 10ml ,铁盐10ml直链烷基苯,有机成份10ml。混匀备用。将琼脂放入电磁炉中加水溶解,彻底溶解后加入蔗糖和母液再加入蒸馏水定容到1000ml,同时不断搅拌使混合均匀一般要求pH5.8-6.0。过酸或过碱用0.1N NaOH或0.1N HCl调节。