—、概述
支原体是一类无细胞壁、呈高度多形态性，能通过除菌滤器，在人工培养基上能生长繁殖的最小原核型微生物。 （一）分类与命名 支原体种类繁多，分布广泛。支原体科分为支原体和脲原体两个属。在支原体属中，对人类有致病性的主要为肺炎支原体、人型支原体、生殖道支原体、穿通支原体等；而脲原体属解脲脲原体（也称溶脲脲原体）对人类有致病。 （二）生物学特性
1.形态与结构 支原体个体微小，大小约0.2～0.3μm，呈高度多形态，有球形、杆形、分支丝状等。革兰染为阴性，但不易着，常用吉姆萨染。
无细胞壁仅有细胞膜是与细菌区别的主要特点。支原体的细胞膜，由外、中、内三层所组成，内外两层主要为蛋白质，中间层系脂质，其中胆固醇类含量高。凡能作用于胆固醇的物质如二性霉素B、皂素及洋地黄苷均可破坏细胞膜致其死亡。
2.培养特性 支原体大多数需氧或兼性厌氧，通常在含95%N2、5%CO2环境中生长良好。营养要求较一般细菌高，可在含牛心浸液、马血清与酵母浸液的培养基上生长。支原体与脲原体对最适pH要求不同。
支原体的菌落特征与细菌L型菌落极相似，37℃培养3～10天可形成直径为0.2～0.5mm大小的菌落，用低倍镜观察，菌落呈“荷包蛋”样，即中央部分较厚，不透明，向下长入培养基内，周边为一层薄薄的透明颗粒区。
支原体有许多特性与细菌L型相似，如多形性、可通过滤菌器、对低渗敏感、菌落呈“荷包蛋”样。两者不同点在于细菌L型在无抗生素等诱导因素作用下，易返祖为原菌，而支原体为独立的一类微生物，不出现返祖现象。
3.生化反应 常以发酵葡萄糖、水解精氨酸和尿素等生物学特性不同，作为初步鉴别支原体的依据。肺炎支原体、生殖道支原体等可分解葡萄糖产酸不产气，人型支原体等不能分解葡萄糖，但可利用精氨酸产NH3解脲脲原体不能利用葡萄糖和精氨酸，但可利用尿素作为能源，分解尿素产碱。
四氮唑还原能力、亚甲蓝抑制、溶解红细胞、吸附红细胞等生物学特性不同，作为支原体进一步鉴别的依据。
4.抗原成分 支原体的抗原性主要来自细胞膜，其外层蛋白质是主要的型特异性抗原，具有免疫原性。生长抑制试验（GIT）和代谢抑制试验（MIT）利用针对此抗原的型特异性血清来抑制支原体在培养基上生长，可将支原体分成若干血清型。 5.抵抗力 支原体对热的抵抗力一般与细菌相似，有的较弱。45℃经15～30分钟或55℃经5～15分钟即告死亡。支原体耐冷，不耐干燥。支原体对一些化学物质比细菌敏感，容易被重金属盐类、苯酚、来苏儿等化学消毒剂灭活。
支原体因无细胞壁，对渗透压敏感，对作用于细胞壁的抗生素，如青霉素、头孢菌素等不敏感，对抑制或影响蛋白合成的抗生素如四环素、红霉素等敏感。
蚕丝被加工设备 （三）微生物检验 由于支原体无固定形态，染结果不易与标本中的组织碎片等杂物区别，故取患者标本直接镜检对各种支原体的诊断意义不大。微生物检验方法主要靠分离培养与血清学检验。
二、肺炎支原体
（一）生物学特性 菌体呈短细丝状，长约2～5μm，典型的形态类似酒瓶状。吉姆萨染呈淡紫。分离培养的最适pH为7.6～8.0。P1蛋白是肺炎支原体的主要特异性免疫源，是目前血清学诊断的主要抗原。
（二）致病性 肺炎支原体可从口腔、呼吸道分离到，主要通过飞沫传播，是人类原发性非典型性肺炎的主要病原体之一。儿童和青年易感，首先引起上呼吸道感染，然后下行感染。病理变化主要是间质性肺炎、急性细支气管炎。还可引起肺外并发症。 （三）微生物检验 采集咽分泌物、痰、支气管分泌物、胸水等。
1.分离与鉴定 这是确诊支原体感染的可靠方法之一。常以牛心消化液为基础另加20%小牛血清及新鲜酵母浸液制成液体或固体培养基。初次分离生长缓慢，通常先将标本接种于液体培养基中增菌，1周后培养基指示剂颜改变，液体清晰，可转种于固体平板培养基，在5%CO2环境中培养，初次分离肺炎支原体需1～2周才长菌落。菌落常不出现“荷包蛋”
样，需经数次传代后，菌落开始典型。肺炎支原体分离培养有时需20天或更长时间，对临床快速诊断意义不大。
支原体在固体培养基上长出典型菌落，以此可初步诊断，再进一步进行生化反应和血清学鉴定。生化反应如：
（1）葡萄糖、精氨酸、尿素分解试验：发酵葡萄糖产酸，不能利用精氨酸、尿素。
（2）氯化三苯基四氮唑（TTC）还原试验：使无TTC还原为粉红。
（3）生长抑制试验（GIT）和代谢抑制试验（MIT）。
（4）红细胞吸附试验：肺炎支原体的菌落能发生红细胞吸附。
2.血清学试验
（1）特异性血清学试验
1）ELISA技术：敏感性和特异性髙，可检测IgM呼IgG抗体。利用ELISA捕获法，以抗P1蛋白单抗检测标本中的肺炎支原体P1蛋白。
2）补体结合试验：诊断肺炎支原体常用的血清学方法，一般血清滴≥1:64～1:128即为阳性，病程中双份血清至少效价有4倍增长，近期感染可能性越大。主要检测IgM抗体。初次感染时出现阳性，再次感染时常不出现阳性。
3）间接血细胞凝集试验：敏感度略高于补体结合试验，主要检测IgM抗体。
（2）非特异性血清学试验：
冷凝集试验：将患者的稀释血清与O型Rh阴性红细胞在4℃下作凝集试验。一般血清滴度≥1:64即为阳性，病程中双份血清至少效价有4倍增长，近期感染可能性越大。
3.PCR试验快速检测。
一个度导航 三、解脲脲原体
（一）生物学特性 解脲脲原体在液体培养基中菌体以球形为主，直径约50～300nm。
吉姆萨染呈紫蓝。生长最适pH为5.5～6.5，因其具有尿素酶分解培养基中的尿素产氨，使pH升高，可加速其死亡。解脲脲原体除脂多糖抗原和蛋白抗原外，还有脲酶抗原，后者是种特异性抗原。
（二）致病性 解脲脲原体是人类生殖道最常见的寄生菌之一，在特定的环境下可以致病。主要通过性行为传播，是非淋菌性尿道炎的主要病原体之一。若上行感染，还可引起男性和女性的其他泌尿生殖道炎症。另外解脲脲原体还可通过垂直传播，引起新生儿，特别是早产儿，呼吸道感染和中枢神经系统感染。
（三）微生物检验 合理采集相应标本，如尿液、前列腺液、精液、阴道分泌物等。
1.诊断解脲脲原体感染，分离培养是相对容易和快速的。取标本少许接种于含酚红、尿素及血清的液体培养基内，最好在95%N2和5%CO2环境中，37℃孵育，1～2天内即可出现生长现象。取培养物少许（约0.2ml）转种在相应的固体培养基上，培养48小时。
如出现典型菌落，则进行形态观察及生化试验，进行初步鉴定。解脲脲原体只分解尿素，不分解葡萄糖、精氨酸。进一步利用特异性血清作MIT和GIT试验进行最终鉴定。
2.核酸检测 以部分脲酶基因的核酸序列为模板，利用PCR方法扩增后的产物进行核酸杂交，鉴定解脲脲原体，其特点是快速、敏感、稳定、可靠。
3.解脲脲原体的血清学诊断意义不大，主要原因是有些无症状者也可有低效价的抗体。
四、人型支原体
人型支原体（M。hominiS，Mh）主要寄居于生殖道，21%～53%的性成熟女性子宫颈或阴道内可分离出Mh，男性尿道携带率低。通过性接触传播，可引起盆腔炎、输卵管炎、产后热、阴道炎、宫颈炎及肾盂肾炎等。此外，Mh也能引起新生儿感染，如脑膜炎、脑脓肿、硬脑膜下脓肿等。
形态结构与溶脲脲原体相似，基因组大小为700kb，DNA的G＋C含量为27.3～33.7mol%。Mh能分解精氨酸，不分解尿素和葡萄糖。培养最适pH为7.2～7.4，对1:2000的与红霉素（100mg/L）不敏感，对四环素和林可霉素敏感。在液体培养基中因分解精氨酸产氨，pH增至7.8以上，易死亡。在固体培养基上菌落大小为40～60μm，个别菌保安对讲机
落达100～200μm，呈典型“油煎蛋”样。
微生物学检验与溶脲脲原体相似。
五、穿通支原体
（一）生物学特性 菌体形态为杆状或长烧瓶状。大小（0.2～0.4） μm ×（0.8～2.0） μm，一端为尖形结构，具有黏附、穿入细胞的作用。营养要求高，培养基中需加血清，在改良的SP-4培养基上生长，菌落呈“油煎蛋”样。生长较慢，初代多在10天以上，发酵葡萄糖，水解精氨酸，但不分解尿素，在液体培养基上生长时，呈透明状，无明显混浊或沉淀。本菌对红霉素、四环素、林可霉素敏感，但对青霉素不敏感。
（二）致病性 研究认为穿通支原体、发酵支原体、梨支原体三种新支原体是加速AIDS进程的一个协同因子。2000年国内学者从AIDS患者尿中分离到1株穿通支原体，从病原学上证实我国AIDS和HIV患者中存在感染。
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（三）微生物检验 采集咽分泌物、血清、尿液等。
1.分离培养 选SP-4培养基，每份标本液用改良的SP-4培养基稀释成不同浓度（1:10、1:50、1:100），置37℃温箱培养，每天观察颜变化，若由红变黄透明无沉淀，视“培养可疑阳性”，再用滤膜过滤。滤液转种传代，当培养基颜再度由红变黄，则认为“初代培养阳性”。汽水取样
2.鉴定
1）生化反应：发酵葡萄糖试验、水解精氨酸试验及尿素分解试验。
2）代谢抑制试验。
3）PCR：此法可扩增特异性DNA，具有灵敏度高、特异性好及快速的特点。
4）抗体检测：国外学者在HIV感染者中用ELISA法检测出大量本菌抗体，其中无症状者的阳性率为20%，艾滋病患者为40%。
六、其他支原体
人型支原体最常见的寄生部位是泌尿生殖道，多引起妇女泌尿生殖道感染，还能感染胎儿和在分娩时感染婴儿，造成新生儿感染和死胎。
穿通支原体、发酵支原体、梨形支原体被认为是加速AIDS进程的一个协同因子。
【例题】脲酶试验阳性的支原体是 A.肺炎支原体 B.解脲脲原体 C.人型支原体 D.生殖道支原体 E.发酵支原体 |
| 『正确答案』B 『答案解析』解脲脲原体可引起泌尿生殖道感染，并被认为是非淋球菌性尿道炎中仅次于衣原体（占50%）的重要病原体，脲酶试验为阳性。 |
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二次沉淀池 【例题】下列支原体肺炎叙述正确的是 A.夏季多见 B.对青霉素敏感 C.血清中的抗体具有较好的保护性 D.老年人发病率高 E.儿童和青少年发病率高 |
| 『正确答案』E 『答案解析』肺炎支原体可从口腔、呼吸道分离到，主要通过飞沫传播，是人类原发性非典型性肺炎的主要病原体之一。儿童和青年易感，首先引起上呼吸道感染，然后下行感染。病理变化主要是间质性肺炎、急性细支气管炎。还可引起肺外并发症。 |
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