蛋白质分离纯化方法汇总(简洁版)思维导图

02分离纯化  1.流程
1.前处理  1.目的溶液溶解状态释放酶
2.方法  1.细胞破碎  1.微生物(细菌)超声振荡
石英砂研磨
溶菌酶处理
阻燃屏蔽控制电缆2.动物
电动捣碎机
超声处理3.植物石英砂研磨
纤维素酶
2.提取
加缓冲液,过滤或离心除去细胞碎片及不溶物2.粗分级分离  1.目的分离所需蛋白和其他杂蛋白
2.方法  1.易沉淀盐析
等电点沉淀
有机溶剂分级分离
2.不易沉淀超过率凝胶过滤
冷冻真空干燥
3.细分级分离
1.目的制品纯化,除去大部分杂蛋白
2.方法  1.柱层析凝胶过滤层析
离子交换层析
吸附层析
亲和层析
2.电泳
凝胶电泳
绝对值角度编码器
冷冻水产品等电聚焦4.结晶只有某种蛋白质在溶液中占有绝对数量优势,才能形成结晶
结晶本身也伴随一定程度的纯化,纯度越高,越容易结晶
2.分类(按纯化依据)  1.分子量  1.测定透析法
超离心法japanese tecther2
沉降平衡法
沉降速度法
凝胶过滤法
SDS-PAGE
质谱法
2.纯化凝胶过滤(分子筛层析)
SDS-PAGE
超过滤
2.电荷电泳纸电泳
聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)
毛细管电泳
等电聚焦(IEF)
双向电泳第一向:IEF
第二向:SSDS-PAGE
离子交换层析
3.溶解度盐析
等电点沉淀
有机溶剂分级分离
4.亲和力亲和层析
5.极性逆流分配
纸层析
薄层层析
聚丙烯酰胺薄膜层析
3.纯度鉴定  1.电泳分析IEF
PAGE防盗电子狗
SDS-PAGE
2.超速离心
薄片蒸汽眼罩3.HPLC(高效液相谱)

本文发布于:2024-09-21 04:21:11,感谢您对本站的认可!

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