小鼠实验操作

小鼠实验操作
(一)、 实验动物的选择原则
  1、尽量选择与人体结构、机能、代谢及疾病特征相似的动物;
   2、选用的实验动物的解剖、生理特点应符合实验目的;
  3、根据人与实验动物对同一刺激的反应差异,选用具有明显反应的动物;
   4、 根据生物医学研究必须达到的精确度,选用结构功能简单又能反映研究指标的动物;
   5、选用患有人类类似疾病的近交系或突变系动物;
   6、选用与实验设计、技术条件、实验方法等相适应的标准化动物;
   7、在不影响实验目的与结果的前提下,选择最易获得、最经济、便于操作管理的动物;
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   8、 供实验用的动物应具备质量合格证。
(二)、常用实验动物的特点
1、小白鼠 
是实验室最常用的一种动物。易于大量繁殖,且价廉,适用需要大量动物的实验,如药物筛选、半数致死量测定、药物效价比较、抗感染、抗肿瘤药物及物的研究等。
阳光天井 2、 大白鼠
自制室内单杠与小白鼠相似。一些在小白鼠身上不便进行的实验可选用大白鼠,如药物抗炎作用的实验常选用大白鼠踝关节制备关节炎的模型。此外,也可用大白鼠直接记录血压、作胆管插管,或用大白鼠观察药物的亚急性或慢性毒性。大白鼠的血压和人相近,且稳定,现常用于抗高血压药物实验。
3、豚鼠 
是实验室常用动物之一。对组织胺很敏感,容易致敏,常用于平喘药和抗组胺药的实验。
对结核菌亦敏感,故也用于抗结核药的研究。此外还用于离体心脏及平滑肌实验,其乳头肌和心房常用于电生理特性及心肌细胞动作电位实验,研究抗心律失常药物的机理。
(三)、实验动物选择的注意事项
  由于动物对外界刺激的反应存在个体差异,在选择实验动物时,还应注意动物的年龄、体重、性别、生理状态、健康状况及其品系、等级等因素对实验的影响。
二、实验动物的性别鉴别与编号
  (一)、 实验动物的性别鉴别
  药理学实验常用的动物中,较大的动物(如家兔、猫、犬等)可以从生殖器分辨其性别,而较小的动物(如小白鼠、大白鼠、豚鼠等)的性别鉴别,通常以肛门与生殖孔之间的距离来判断,距离近者为雌性,距离远者为雄性。
智能抄表  (二)、实验动物的编号
  药理实验中常用多只动物同时进行实验,为避免混乱应将动物进行编号。实验动物编号的
目的在于将观察范围内的同种动物进行区别,以便于观察。常用的方法有染法、耳缘剪孔法、烙印法和号牌法等,可根据实验目的、动物种类和具备的条件选用,一般编号应具有清晰易辨、简便耐久的特点。猫、犬、兔等较大的动物可用特别的号码牌固定于身上。小白鼠、大白鼠及白家兔等用黄涂于动物不同部位进行染标记而编号。例如在小白鼠,右前肢皮肤外侧涂标记为1号,腹部右外侧皮肤涂标记为2号,右后肢皮肤外侧涂标记为3号,头部皮肤涂标记为4号,背部正中皮肤标记为5号,尾巴根部标记为6号,7、8、9号在左侧同1、2、3号,第10号不涂黄。大白鼠的编号与小白鼠相同。
第二节  实验动物的捉拿、给药和处死方法
(一)、小白鼠、大白鼠
  1、捉拿法:小白鼠 可采取双手法和单手法两种形式。
  双手法:右手提起鼠尾,放在鼠笼盖或其他粗糙面上,向后方轻拉,小白鼠则将前肢固定于粗糙面上。此时迅速用左手拇指和食指捏住小白鼠颈背部皮肤(图1),并以小指与手掌尺侧夹持其尾根部,固定于手中。
  单手法:小白鼠置于笼盖上,先用左手食指与拇指抓住鼠尾,手掌尺侧及小指夹住尾根部,然后用左手拇指与食指捏住颈部皮肤。
大白鼠 容易激怒咬人,捉持时左手应戴防护手套或用厚布盖住大鼠,先用右手抓住鼠尾,再用左手拇指和食指握住头部,其余手指与手掌握住背部和腹部(图2)。不要用力过大,切勿捏其颈部,以免窒息致死。
  2、给药方法
小白鼠
 (1)、灌胃(po):左手固定小鼠,右手持灌胃器,灌胃针头自口角进入口腔,紧贴上腭插入食道(图3),如遇阻力,将灌胃针头抽回重插,以防损伤。常用灌胃量为~ ml/10g。
(2)、皮下注射(ih):可用腹部、背部、腹股沟的皮下,此处皮肤比较松弛,也可由助手协助。注药量一般为~ ml/10g。
自制自慰器 (3)、肌肉注射(im):一人抓住小鼠头部皮肤和尾巴,另一人持连4号针头的注射器,将针头刺入后腿外侧肌肉。注射量一般不超过~ ml/只。
(4)、静脉注射(iv):将小鼠置入固定器,酒精涂擦尾部,以使血管扩张。自尾部末端刺入,刺入血管后抽针芯可见回血。常用注射量为~ ml/10g。
(5)、腹腔注射(ip):将小鼠固定后,从下腹部外侧进针,深度较皮下注射深(图4)。常用注射量为~ ml/10g。
  大鼠 灌胃、腹腔注射、皮下注射及尾静脉注射与小鼠相似。静脉注射也可在麻醉下行舌下静脉注射。
 3、处死方法
(1)、颈椎脱位法:
术者左手持镊子或用拇指、食指固定小鼠头后部,右手捏住鼠尾,用力向后
上方牵拉,听到鼠颈部喀擦声即颈椎脱位,脊髓断裂,鼠瞬间死亡。
  (2)、打击法:用手抓住鼠的尾并提起,朝地面用力撞击鼠头致死(也可用小木锤用力打击鼠头
  (3)、吸入麻醉法:吸过量的乙醚。
  (4)、大量放血法:可采用眼眶动、静脉放血致死。
    (5)、空气栓塞法:将空气急速注入静脉致死。小白鼠可注入空气。
(三)、豚鼠 
1、捉拿法:
豚鼠性情温顺不咬人,可用左手直接从背侧握持前部躯干,体重小者用一只手捉持,体重
大者宜用双手,右手托住臀部(图6)
2、给药方法
灌胃(见图6)、皮下注射、肌肉注射及腹腔注射方法基本同小鼠,给药量稍多。静脉注射可选后脚掌外侧静脉或颈外静脉
3、处死方法
豚鼠可采用注射麻醉法,即注射钠麻醉处死。豚鼠可注射麻醉剂量的3倍以上的量腹腔内注射。还可采用吸入麻醉法。
第二节    实验动物的取血方法
一、小鼠和大鼠
  1、剪尾取血法:
将清醒鼠装入深颜的布袋中,将鼠身裹紧,露出尾巴,用酒精涂擦或用温水浸泡使血管扩张,剪断尾尖后,尾静脉血即可流出,用手轻轻地从尾根部向尾尖挤捏,可取到一定量的血液。取血后,用棉球压迫止血。也可采用交替切割尾静脉方法取血。用一锋利刀片在尾尖部切破一段尾静脉,静脉血即可流出,每次可取~ ml,供一般血常规实验。三根尾静脉可替换切割,由尾尖向根部切割。由于鼠血易凝,需要全血时,应事先将抗凝剂置于采血管中,如用血细胞混悬液,则立即与生理盐水混合。
  2、眼球后静脉丛取血法:
左手持鼠,拇指与中指抓住颈部皮肤,食指按压头部向下,阻滞静脉回流,使眼球后静脉丛充血,眼球外突。右手持1%肝素溶液浸泡过的自制吸血器,从内呲部刺入,沿内下眼眶壁,向眼球后推进4~5 mm,旋转吸血针头,切开静脉丛,血液自动进入吸血针筒,轻轻抽吸血管(防止负压压迫静脉丛使抽血更困难),拔出吸血针,放松手压力,出血可自然停
止。也可用特制的玻璃取血管(管长7~10 cm,前端拉成毛细管,内径~ mm,长为1 cm,后端管径为 cm)。必要时可在同一穿刺孔重复取血。此法也适用豚鼠和家兔。
  3、眼眶取血法:
左手持鼠,拇指与食指捏紧头颈部皮肤,使鼠眼球突出,右手持弯镊或止血钳,钳夹一侧眼球部,将眼球摘出,鼠倒置,头部向下,此时眼眶很快流血,将血滴入预先加有抗凝剂的玻璃管内,直至流血停止。此法由于取血过程中动物未死,心脏不断跳动,一般可取鼠体重4%~5%的血液量,是一种较好的取血方法,但只适用一次性取血。
  4、心脏取血:
动物仰卧固定于鼠板上,用剪刀将心前区毛剪去,用碘酒、酒精消毒此处皮肤,在左侧第3~4肋间用左手食指摸到心搏,右手持连有4~5号针头的注射器,选择心搏最强处穿刺,当针头正确刺入心脏时,鼠血由于心脏跳动的力量,血自然进入注射器。
  5、断头取血:
实验者带上棉手套,用左手抓紧鼠颈部位,右手持剪刀,从鼠颈部剪掉鼠头迅速将鼠颈端向下,对准备有抗凝剂的试管,收集从颈部流出的血液,小鼠可取血~ ml,大鼠可取血5~10 ml。
  6、颈动静脉、股动静脉取血:
麻醉动物背位固定,一侧颈部或腹股沟部去毛,切开皮肤,分离出静脉或动脉,注射针沿动静脉走向刺入血管。20 g小鼠可抽血 ml,300 g大鼠可抽血8 ml。也可把颈静脉或颈动脉用镊子挑起剪断,用试管取血或注射器抽血,股静脉连续多次取血时,穿刺部位应尽量靠近股静脉远心端。
  二、豚鼠智能一体机
  1、心脏取血:
需二人协作进行,助手以两手将豚鼠固定,腹部面向上,术者用左手在胸骨左侧触摸到心脏搏动处,一般在第4~6肋间、选择心跳最明显部位进针穿刺。针头进入心脏,则血液随心跳而进入注射器内,取血应快速,以防在试管内凝血。如认为针头已刺入心脏,但还未
出血时,可将针头慢慢退出一点即可。失败时应拔出重新操作,切忌针头在胸腔内左右摆动,以防损伤心脏和肺脏而致动物死亡。此法取血量大,可反复采血。
  2、背中足静脉取血:
助手固定动物,将其右或左后肢膝关节伸直提到术者面前,术者将动物脚背用酒精消毒,出背中足静脉,以左手的拇指和食指拉住豚鼠的趾端,右手拿注射针刺入静脉,拔针后立即出血,呈半球状隆起,用纱布或棉花压迫止血。可反复取血,两后肢交替使用。

本文发布于:2024-09-22 03:47:49,感谢您对本站的认可!

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