防喷盒
摘要：目的 研究槲皮素对大鼠慢性酒精性肝损伤的保护作用。方法 将68只SD大鼠随机分为对照组、模型组和槲皮素低、中、高剂量组，采用白酒灌胃的方法建立大鼠酒精性肝损伤模型，给予不同剂量槲皮素混悬液保护。8周后计算肝指数，测定大鼠血清甘油三酯（TG）、谷丙转氨酶（ALT）和谷草转氨酶（AST）及肝组织匀浆中超氧化物歧化酶（SOD）、微安表谷胱甘肽（GSH）和丙二醛（MDA），观察肝脏组织学变化。结果 槲皮素能降低酒精性肝损伤大鼠肝指数，降低血清中TG、ALT和AST水平；提高肝组织中SOD活性和GSH含量，降低肝组织中MDA含量。肝组织病理结果显示槲皮素能改善酒精性肝损伤。结论 槲皮素对酒精性肝损伤具有保护作用，其机制与增强肝脏抗氧化功能有关。
关键词：槲皮素；酒精性肝损伤；大鼠
Protective Effects of Quercetin on Chronic Alcoholic Liver Injury in Rats
封胶机Abstract: Objective To study the protective effects of quercetin on alcoholic liver injury in rats.
Methods Rats were randomly divided in to 5 groups: normal group, model group,low-dose group,middle-dose group and high-dose group. The rat model of chronic alcoholic liver injury was induced by stomach perfusion alcohol,and the rats in quercetin group were given quercetin at the same time. After 8 weeks, liver index and the level of TG,ALT,AST in serum and SOD,GSH,MDA in liver tissue were detected.HE staining was used to observe the pathological changes of liver. Results Compared with model group, quercetin can lower liver index,decrease the level of serum TG,ALT,AST and hepatic MDA,increase hepatic SOD and GSH.The hepatic injuries of rats in the quercetin group were recovered obviously. Conclusion Quercetin has obviously protective effects on alcoholic liver injury in rats. The mechanism is associated with increased hepatic antioxidant capacity.
Key words: Quercetin; alcoholic liver injury; Rats
长期大量饮酒可引起酒精性脂肪肝、酒精性肝炎、肝纤维化以及肝硬化等不同程度的肝损伤。酒精参与肝细胞内氧化应激反应，其在肝脏中过量代谢使肝细胞产生大量自由基，促进肝细胞的变性、坏死和炎症细胞浸润导致肝损伤。槲皮素是广泛存在于植物中的黄酮类化合物，具有较强的抗氧化、抗炎、抗肝纤维化、抗肿瘤、清除自由基等药理作用，其临床研究应用多集中在抗衰老、保护心血管、抗过敏性疾病、肿瘤防治等方面，而在酒精性肝病方面的研究较少。本研究通过建立大鼠慢性酒精性肝损伤模型，观察槲皮素对酒精性肝损害的保护作用并初步探讨其发生机制。
1 材料与方法
1.1 动物 健康雌性SD大鼠（清洁级）68只，体重200±20g，购自华中科技大学同济医学院实验动物中心。
1.2 药物 槲皮素购自美国Sigma公司。甘油三酯（TG）、谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、丙二醛 (MDA)、谷胱甘肽（GSH）、超氧化物歧化酶 (SOD)、考马斯亮兰蛋白测定试剂盒均购自南京建成生物工程研究所。56度红星二锅头购自北京红星股份有限公
司。
1.3 方法
1.3.1 动物分组及处理 大鼠适应性喂养1周后随机分为五组：对照组8只，其余4组每组15只。对照组：给予生理盐水15 ml/kg·d灌胃8周；模型组：给予56°红星二锅头15 ml/kg·d灌胃8周；槲皮素低、中、高剂量组：将槲皮素分别以10mg/ kg·d、30mg/ kg·d、50mg/ kg·d的剂量溶于酒中制成混悬液按15 ml/kg·d灌胃8周。期间各组大鼠正常进食饮水。
1.3.2 标本采集及测定 末次灌胃禁食16 h后，处理各组动物。大鼠麻醉后心脏穿刺采全血分离血清，检测TG、ALT和AST水平。剖取肝脏在冷生理盐水中漂洗，滤纸吸干，肉眼观察外观并称重，计算肝指数，肝指数（%）=肝质量（g）／ 体质量（g）×100%。取肝左叶，用冷生理盐水冲洗后制备成10% 的肝匀浆，考马斯亮兰测定总蛋白量，检测SOD活力、GSH和MDA 含量。取肝右叶用10%中性甲醛溶液固定，石蜡包埋切片，苏木精-伊红（HE）染，光镜下观察病理改变。病理分级标准参照文献[1] ：1级：脂肪变< 30%，局灶水样变，少数小坏死灶；2 级：脂肪变> 30%，气球样变, 多数小坏死灶，Mallory小体形成，局部中性粒细胞浸润；3级：脂肪变> 50%，变性坏死重或形成桥接坏死；4 级：脂肪
变> 75%, 损伤广泛。
1.4 统计学方法 应用Spss13.0软件进行统计分析，计量资料用± s 表示，组间比较采用方差分析；病理学等级资料比较采用Ridit分析法，P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
水溶液锂电池2.1槲皮素对大鼠肝指数及血清TG、ALT和AST的影响 除模型组有5只大鼠死亡，槲皮素低剂量组有3只大鼠死亡，其余组无大鼠死亡。模型组与对照组比较，肝指数显著升高（P<0.01）。槲皮素中、高剂量组与模型组比较，肝指数降低（P<0.05）。模型组与对照组比较，TG、ALT和AST水平显著升高（P<0.01）。槲皮素中、高剂量组与模型组比较，TG、ALT和AST水平显著降低（P<0.05），见表1。
表1 槲皮素对大鼠血清ALT和AST活性的影响（± s）
组别 | 肝指数（%） | TG (mmol/L) | ALT (U/L) | AST (U/L) |
对照组 模型组 槲皮素低剂量组 槲皮素中剂量组 槲皮素高剂量组 | 3.23 0.28** 4.96 0.47 4.58 0.39 3.98 0.24* 3.83 0.26* | 0.51 0.12** 2.65 0.32 2.58 0.36 1.54 0.27* 1.66 0.29* | 37.03 2.87** 122.58 玻璃钢蓄水池 11.69 109.83 12.74 67.49 10.26** 64.67 9.86** | 31.34 4.78** 93.44 9.62 62.57 5.92* 55.93 6.38* 54.33 5.32* |
| | | | |
注：与模型组比较* P<0.05，**P<0.01
2.2 槲皮素对大鼠肝组织中SOD、GSH及MDA的影响 模型组与对照组比较，大鼠肝匀浆中SOD活性和GSH含量明显降低（P<0.01），MDA水平显著升高（P<0.01）。槲皮素中、高剂量组提高了肝脏抗氧化能力，将降低的SOD和GSH升高，升高的MDA水平降低（P<0.05），见表2。
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