蒲地蓝消炎颗粒的抗菌、解热、抗炎作用研究

蒲地蓝消炎颗粒的抗菌、解热、抗炎作用研究
邢玉娟;王建国;潘康锁;乔登江;杨彦平;陈玉库
【摘 要】为研究蒲地蓝消炎颗粒的抗菌、解热、抗炎作用,试验设高、中、低剂量给药组,同时设阴性对照组、阳性对照组,体外试验通过试管二倍稀释法测定最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC)、体内试验对金黄葡萄球菌引起小鼠死亡的保护作用,评价蒲地蓝消炎颗粒体外、体内抑菌作用.通过对2,4-二硝基苯酚致大鼠体温升高的影响,评价其解热作用.通过二甲苯所致的小鼠耳肿胀试验,评价其抗炎作用.结果表明,蒲地蓝消炎颗粒对金黄葡萄球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、白念珠菌的 MIC 分别为6.25、25、100、12.5 mg/mL,MBC对腹腔注射金黄葡萄球菌引起小鼠死亡有一定的保护作用,对2,4-二硝基苯酚引起的大鼠体温升高具有良好的解热作用,能显著抑制二甲苯所致的小鼠耳肿胀.结果显示蒲地蓝消炎颗粒抗菌、解热、抗炎作用效果确切.%To study the antibacterial,antipyretic and anti-inflammatory effects of Pudilan antiphlogistic granules,the tube double dilution method was used to determine the MIC and MBC in vitro,the protection against death induced by Staphylococcus aureus in mice were evaluated,and the bacteriostatic action of Pudilan anti
phlogistic granules were conducted in vivo with high,medium and low three doses of groups, drug control group and negative control group,positive control group in the experiment.The antipyretic effect was evaluated by 2,4-dinitrophenol induced high temperature in rats,and the anti-inflammatory effect was evaluated by dimethylbenzene induced ear swelling in mice.The results showed that the mini-mum inhibitory concentrations of Staphylococcus aureus,Escherichia coli,Pseudomonas aeruginosa and Candida albicans were 6.25,25,100,12.5 mg/mL,respectively.There was protective effect on the death of mice induced by Staphylococcus aureus and antipyretic effect in rats with high temperature induced by 2,4-dinitrophenol.And the mouse ear edema induced by dimethylbenzene was significantly inhibited.The results showed that Pudilan antiphlogistic granules have obvious antibacterial,antipyretic and anti-inflammatory actions.
【期刊名称】《动物医学进展》
【年(卷),期】2018(039)003
【总页数】5页(P58-62)
【关键词】蒲地蓝消炎颗粒;抑菌作用;抗炎作用;解热作用
【作 者】邢玉娟;王建国;潘康锁;乔登江;杨彦平;陈玉库
【作者单位】江苏农牧科技职业学院,江苏泰州225300;山东省威海市环翠区动物疫病预防控制中心,山东威海264203;陕西省动物疫病预防控制中心,陕西西安710016;内蒙古乌兰察布市兴和县动物疾病预防控制中心,内蒙古乌兰察布市013650;西安雨田农业科技有限责任公司,陕西西安710086;江苏农牧科技职业学院,江苏泰州225300
【正文语种】中 文
赋码管理是什么意思【中图分类】S853.76
蒲地蓝消炎口服液是由蒲公英、黄芩、板蓝根、苦地丁 4 味中药组成,具有清热解毒、抗炎消肿的功效,用于疖肿、腮腺炎、咽炎、淋巴结炎、扁桃体炎等疾病的[1-2]。近年来,我们在蒲地蓝消炎口服液的基础上,将口服液改为颗粒剂,应用在鸡传染性支气管炎
的对症,取得了良好的效果。为进一步探讨蒲地蓝消炎颗粒感染性疾病的药理作用机制,开展了以下研究。
主动防御1 材料与方法
数码理疗仪1.1 材料
1.1.1 试验药物 蒲地蓝消炎颗粒,西安雨田农业科技有限责任公司生产,100 g/袋,1.5 g生药/g,批号20120205。用双蒸馏水超声溶解,配成浓度为200 mg/mL的供试品原液,常规消毒后备用;蒲地蓝消炎片,云南白药集团股份有限公司生产,批准文号:国药准字Z20064017。
1.1.2 试验菌株 金黄葡萄球菌ATCC 25923、大肠埃希菌ATCC 25922、铜绿假单胞菌ATCC 27853、白念珠菌CMCC (B)10231,由陕西中医药大学医学技术学院医学检验实验中心提供。
1.1.3 主要试剂和器材
1.1.3.1 主要试剂 营养肉汤培养基、营养琼脂培养基、改良马丁培养基;2,4-二硝基苯酚(化学纯)、二甲苯(分析纯),购自国药集团化学试剂有限公司。
1.1.3.2 主要器材 比浊仪,法国生物梅里埃公司产品;超净工作台(SW-CJ-1FD),苏州净化设备有限公司产品;手提式灭菌锅,河北华泰设备医疗有限公司产品;恒温培养箱、电热恒温干燥箱,上海一恒科技有限公司产品;电子天平(BX320S),上海精密仪器仪表有限公司产品。
降弓1.1.4 实验动物 ICR小鼠,体重18 g~22 g,雌雄各半,由西安交通大学医学院实验动物中心提供,动物生产许可证号SCXK(陕)2007-001;SD大鼠50只,雄性,体重180 g~220 g,由西安交通大学医学院实验动物中心提供,动物生产许可证号SCXK(陕)2007-001。
1.2 方法
1.2.1 体外抑菌试验
1.2.1.1 菌悬液的制备 无菌条件下,分别用接种环取金黄葡萄球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌第2代菌悬液,在营养琼脂培养基上划线,35℃培养24 h;取白念珠菌的第2代菌天燃气燃烧机
悬液在改良马丁培养基上划线,25℃培养48 h。无菌条件下,用接种环调取单个菌落,置于装有5 mL灭菌生理盐水的试管中,震荡摇匀,校正其浓度为0.5麦氏比浊标准(MCF)约108 CFU/ mL 的菌悬液[3]。
充气浴池
1.2.1.2 最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC)测定 采用试管二倍稀释法[4]。取灭菌具塞试管10支,编号排列于试管架上。每支试管加入2 mL营养肉汤培养基,于第1支试管中加入2 mL供试品原液,混合均匀,取2 mL加入第2支试管中,振摇混合均匀后,取2 mL加入第3个试管中,依此类推,直到稀释到第8个试管,将第8支试管混合均匀后,从中取出2 mL弃去,得到蒲地蓝消炎颗粒的浓度分别为100、50、25、12.5、6.25、3.125、1.562 5、0.781 25 mg生药/mL。
取0.5 MCF的菌悬液,用无菌生理盐水稀释10倍,于每支试管分别加入0.1 mL稀释后的菌悬液,作为试验组。第9支试管不加供试药物,加入0.1 mL的供试菌悬液,为阳性对照。第10支试管加入营养肉汤培养基2 mL,再加入供试品原液2 mL不加菌液,为阴性对照。将试验组、阳性对照组、阴性对照组各管置37℃的培养箱中培养24 h,取出,观察。在阳性对照管细菌生长正常阴性对照管无菌生长的条件下,营养肉汤未发现浑浊的最低稀释浓度
即为该样品的最低抑菌浓度(MIC),分别吸取以上各试验管培养物0.1 mL移种在不含药物的琼脂培养基上,经孵育过夜,分别菌落计数,其菌落数少于5个的药物浓度即为最低杀菌浓度(MBC)。试验重复3次。
1.2.2 对腹腔注射金黄葡萄球菌引起小鼠死亡的保护作用
1.2.2.1 菌液的制备 将浓度为0.5麦氏比浊标准(MCF)约108 CFU/ mL 的金黄葡萄球菌菌悬液,用生理盐水以10倍顺序稀释为10-1、10-2、10-3、10-4、10-5、10-6、10-7、10-8等不同浓度的菌液,备用。
1.2.2.2 预试验 将不同浓度的菌液分别腹腔注射于体重为18 g~22 g的小鼠,每浓度组5只,每只0.5 mL,观察小鼠在7 d内的死亡情况,选用引起小鼠80%~100%死亡的菌液浓度进行药物防治试验。预试验结果,引起90%的小鼠死亡的浓度为107个/mL,所以防治试验中细菌用量为0.5 mL/只(浓度107个/mL)[5]。
1.2.2.3 感染及给药方法 取18 g~22 g小鼠60只,雌雄各半,按性别、体重随机分为6组,蒲地蓝消炎颗粒高、中、低剂量组含生药分别为9.6、4.8、2.4 g/kg,药物对照组(蒲地蓝
消炎片,4.8 g生药/kg),阳性对照组,阴性对照组。将药物分别溶解于生理盐水0.5 mL,灌胃。各给药组连续灌胃给药3 d,每天1次,每次0.5 mL,阴性对照组灌胃等容量的生理盐水。于末次给药30 min后,1组~5组小鼠腹腔注射107个/mL金黄葡萄球菌造成感染,每只0.5 mL,阴性对照组腹腔注射0.5 mL生理盐水。观察小鼠的死亡情况,连续7 d,统计各组的死亡率,卡方检验比较各组差异[6]。
1.2.3 对2,4-二硝基苯酚所致大鼠发热的解热作用
1.2.3.1 2,4-二硝基苯酚溶液的配制 精密称取2,4-二硝基苯酚150 mg,置于80 mL生理盐水中,滴加5 mol/L NaOH溶液,不断搅拌,待药液变为亮黄,再加入生理盐水至100 mL。
1.2.3.2 造模及给药方法 雄性大鼠,试验前以MC-612型电子数字式体温计测定大鼠肛温,每日早晚各测量体温1次,连续3 d,选取肛温波动在0.5℃以内者纳入试验,随机分为5组,每组10只,即蒲地蓝消炎颗粒高剂量组(6.8 g/kg)、中剂量组(3.4 g/kg)、低剂量组(1.7 g/kg),药物对照组(蒲地蓝消炎片3.4 g/kg),阳性对照组。试验日各组大鼠灌胃给药,1 mL/100 g,阳性对照组灌胃给予等量的生理盐水,给药后1 h于背部皮下注射2,4-二硝基苯
酚1 mL/100 g(15 mg/kg),每60 min测体温1次,连续测定4 h[7-8]。

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