(19)国家知识产权局
(12)发明专利申请
(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 202210227350.6
(22)申请日 2022.03.08
(71)申请人 安徽农业大学
卷烟器地址 230000 安徽省合肥市长江西路130号
(72)发明人 刘英男 肖亚庆 朱璐 周裔彬
郑明明 张强 余振宇
(74)专利代理机构 苏州翔远专利代理事务所
hbv疫苗
(普通合伙) 32251
专利代理师 王华
(51)Int.Cl.
检测卡
G01N 21/78(2006.01)
G01N 21/64(2006.01)
(54)发明名称一种监测虾肉新鲜度的方法及其使用的比卡(57)摘要一种监测虾肉新鲜度的方法及其使用的比卡，检测方法包括下列步骤：步骤一：将待测样品置于一容器中；步骤二：将权利要求1‑4任一所述的Zein/RhB ‑Flu比率荧光标签放置在步骤一所述的容器中，并避免Zein/RhB ‑Flu比率荧光标签与样品直接接触，然后将所述容器密封；步骤三：在365 nm紫外光照射下，将所述Zein/RhB ‑Flu比率荧光标签与比卡对比，依据颜来得到样品中生物胺的含量；所述比卡采用权利要求1‑4任一所述的比卡。本发明开发出一种简单、快速且经济高效的方法来实时原位监测虾肉生物胺，快速判断其新鲜度，具有重要意义和价 值。权利要求书1页 说明书3页 附图1页CN 114624229 A 2022.06.14
C N 114624229
A
1.一种比卡，其特征在于：制备方法包括下列步骤：
步骤1：将玉米醇溶蛋白分散在乙醇溶液中，密闭后在温度65‑75℃、转速300‑500r/min 条件下，搅拌15‑25min，然后加入甘油，在室温下，转速300‑500r/min继续搅拌5‑15min，得到混合物A；
步骤2：将荧光素的乙醇溶液和罗丹明B的乙醇溶液添加到所述混合物A中，转速250 ‑350r/min搅拌得
到成膜液；将所述成膜液继续搅拌10‑20min后倒入一容器内，然后将容器在温度50‑60℃下干燥4‑8h，得到Zein/RhB ‑Flu比率荧光薄膜，作为Zein/RhB ‑Flu比率荧光标签；
步骤3：将不同浓度的氨水分别容纳于一容器内，然后将Zein/RhB ‑Flu比率荧光标签分别置于容器的上方，静置15‑25min后，用365nm的紫外光照射所述Zein/RhB ‑Flu比率荧光标签并拍摄照片，收集照片并排列后得到比卡。
2.根据权利要求1所述的比卡，其特征在于：步骤1中，乙醇溶液的体积分数为70‑80%，玉米醇溶蛋白与乙醇溶液之间的比例为5‑7 g：70 mL；玉米醇溶蛋白与甘油之间的质量比例为5‑7：1.5‑2。
3.根据权利要求1所述的比卡，其特征在于：荧光素的乙醇溶液的浓度为0.8‑1.2 mg/mL，罗丹明B的乙醇溶液的浓度为0.8‑1.2 mg/mL；荧光素的乙醇溶液与罗丹明B的乙醇溶液之间的体积比为2.5‑3.2‑5‑7。
4.根据权利要求1所述的比卡，其特征在于：不同浓度的氨水的浓度为0 ppm、25 ppm、50 ppm、250 ppm、500 ppm、2500 ppm、5000 ppm、25000 ppm。
5.一种监测虾肉新鲜度的方法，其特征在于：包括下列步骤：
步骤一：将待测样品置于一容器中；
步骤二：将权利要求1‑4任一所述的Zein/RhB ‑Flu比率荧光标签放置在步骤一所述的容器中，并避免Zein/RhB ‑Flu比率荧光标签与样品直接接触，然后将所述容器密封；
步骤三：在365 nm紫外光照射下，拍摄所述Zein/RhB ‑Flu比率荧光标签的照片；将照片与比卡对比，依据颜来得到样品中生物胺的含量；所述比卡采用权利要求1‑4任一所述的比卡。
权 利 要 求 书1/1页CN 114624229 A三相混合步进电机
一种监测虾肉新鲜度的方法及其使用的比卡
技术领域
卡口系统
[0001]本发明涉及一种监测虾肉新鲜度的方法及其使用的比卡，属于检测技术领域。
背景技术
[0002]虾是一种常见的水产品。虾肉营养丰富，肉质松软，易消化吸收，是优质食材，备受消费者欢迎。
[0003]生物胺（biogenic amine，BA）是一类具有生物活性、含氮的低分子量有机化合物的总称，可
看作是氨分子中1‑3个氢原子被烷基或芳基取代后而生成的物质，是脂肪族、酯环族或杂环族的低分子量有机碱，常存在于动植物体内及食品中。虾肉中富含蛋白质，微生物可降解蛋白质生成氨基酸，氨基酸进一步降解转化会生成酮酸及胺类等一些小分子化合物。虾肉中大部分的生物胺是由微生物产生的脱羧酶在适合的条件下促使氨基酸脱羧生成的。不恰当的运输及存储条件可能导致微生物通过酶促反应产生生物胺，这些累积的生物胺可作为虾肉腐败的直接标志。因此，检测虾肉中生物胺含量对于监测虾肉新鲜度及评估虾肉质量至关重要。
[0004]目前，已经开发了多种检测生物胺的分析方法，包括气相谱法、液相谱法、电子鼻法、电子舌法、毛细管电泳法等。但这些方法大多依赖于昂贵且复杂的仪器设备、繁琐的样品前处理以及专业技术很强的技术人员。因此，它们不适合用于生物胺的实时、原位、快速检测，也不是普通操作人员可使用的检测方法。
发明内容
[0005]本发明的目的在于提供一种监测虾肉新鲜度的方法及其使用的比卡。[0006]为实现上述目的及其他相关目的，本发明提供的技术方案是：一种比卡，制备方法包括下列步骤：
步骤1：将玉米醇溶蛋白分散在乙醇溶液中，密闭后在温度65‑75℃、转速300‑500r/min条件下，搅拌15‑25min，然后加入甘油，在室温下，转速300‑500r/min继续搅拌5‑15min，得到混合物A；
步骤2：将荧光素的乙醇溶液和罗丹明B的乙醇溶液添加到所述混合物A中，转速250 ‑350r/min搅拌得到成膜液；将所述成膜液继续搅拌10‑20min后倒入一容器内，然后将容器在温度50‑60℃下干燥4‑8h，得到Zein/RhB‑Flu比率荧光薄膜，作为Zein/RhB‑Flu比率荧光标签；
步骤3：将不同浓度的氨水分别容纳于一容器内，然后将Zein/RhB‑Flu比率荧光标签分别置于容器的上方，静置15‑25min后，在365nm的紫外光照射下拍摄所述Zein/RhB‑Flu 比率荧光标签的照片，收集照片并排列后得到比卡。
[0007]优选的技术方案为：步骤1中，乙醇溶液的体积分数为70‑80%，玉米醇溶蛋白与乙醇溶液之间的比例为5‑7g：70mL；玉米醇溶蛋白与甘油之间的质量比例为5‑7：1.5‑2。[0008]优选的技术方案为：荧光素的乙醇溶液的浓度为0.8‑1.2mg/mL，罗丹明B的乙醇溶
液的浓度为0.8‑1.2mg/mL；荧光素的乙醇溶液与罗丹明B的乙醇溶液之间的体积比为(2.5‑3.2):(5‑7)。
[0009]优选的技术方案为：不同浓度的氨水的浓度为0 ppm、25ppm、50ppm、250ppm、500ppm、2500ppm、5000ppm、25000ppm。
[0010]为实现上述目的及其他相关目的，本发明提供的技术方案是：一种监测虾肉新鲜度的方法，包括下列步骤：
步骤一：将待测样品置于一容器中；
步骤二：将权利要求1‑4任一所述的Zein/RhB‑Flu比率荧光标签放置在步骤一所述的容器中，并避免Zein/RhB‑Flu比率荧光标签与样品直接接触，然后将所述容器密封；
步骤三：在365nm紫外光照射下拍摄所述Zein/RhB‑Flu比率荧光标签的照片；将照片与比卡对比，依据颜来得到样品中生物胺的含量；所述比卡采用权利要求1‑4任一所述的比卡。
[0011]由于上述技术方案运用，本发明与现有技术相比具有的优点是：
本发明开发出一种简单、快速且经济高效的方法来实时原位监测虾肉生物胺，快速判断其新鲜度，具有重要意义和价值。
附图说明
[0012]图1比卡示意图。
[0013]图2本发明的判定方法示意图。
[0014]图3为测定的虾的TVB‑N含量。
具体实施方式
[0015]以下由特定的具体实施例说明本发明的实施方式，熟悉此技术的人士可由本实施例所揭露的内容轻易地了解本发明的其他优点及功效。
[0016]请参阅图1‑3。须知，本说明书所附图式所绘示的结构、比例、大小等，均仅用以配合说明书所揭示的内容，以供熟悉此技术的人士了解与阅读，并非用以限定本发明可实施的限定条件，故不具技术上的实质意义，任何结构的修饰、比例关系的改变或大小的调整。提供以下实施例以便更好地理解本发明，而非限制本发明。以下实施例中的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的实验材料如无特殊说明，均为常规生化试剂商店购买所得。
[0017]实施例1：一种监测虾肉新鲜度的方法及其使用的比卡
一种利用比率荧光标签监测虾肉新鲜度的方法，其特征在于，包括以下技术步骤。[0018]（1）制备比率荧光标签
将5.6g玉米醇溶蛋白（Zein）分散在70mL的75%乙醇溶液中，密闭，在温度70℃、转速400 r/min条件下，保温磁力搅拌20 min；然后加入1.68g甘油，在室温下，转速400r/min 继续搅拌10min，得到混合物A。
[0019]配制荧光素（Flu）乙醇溶液（2.8mL，1mg/mL）和罗丹明B（RhB）乙醇溶液（5.6mL，1mg/mL），将Flu乙醇溶液、RhB乙醇溶液添加到上述混合物A中，转速300r/min得到成膜液；将所得成膜液搅拌15 min后倒入直径为90 mm的一次性无菌培养皿（15 mL /皿），然后将培
养皿在温度55℃下干燥6 h，得到Zein/RhB‑Flu比率荧光薄膜，作为比率荧光标签。[0020]所述的Zein、Flu和RhB均为分析纯。
[0021]所制得的Zein/RhB‑Flu比率荧光标签，在365 nm的紫外光照射下呈现红荧光；经过氨气、生物胺等处理后，在365 nm的紫外光照射下呈现绿荧光。
[0022]（2）建立比卡
以氨水为模拟生物胺，建立比卡。首先，在24孔培养板孔内分别加入1mL不同浓度的氨水，然后将8片Zein/RhB‑Flu比率荧光标签分别置于培养板孔上方。所述的不同浓度氨水，浓度分别为0ppm、25ppm、50ppm、250ppm、500ppm、2500ppm、5000ppm、25000ppm。注意避免Zein/RhB‑Flu比率荧光标签与氨水直接接触；静置20min后，立即在365nm的紫外光照射下拍摄Zein/RhB‑Flu比率荧光标签的荧光照片；收集照片，建立比卡，如图1所示。[0023]（3）样品检测
所述的样品为整只虾或整个虾仁，单个样品重量约4.0‑10.0g；虾是河虾、对虾、沼虾、青虾中的一种。
[0024]将样品放入无菌培养皿中，将Zein/RhB‑Flu比率荧光标签放置在培养皿内，注意避免Zein/RhB‑Flu比率荧光标签与样品直接接触；然后将所有培养皿密封，并在不同温度（‑20℃、4℃和25℃）下放置1‑5天。在此期间通过相机记录在365 nm紫外光照射下的Zein/ RhB‑Flu比率荧光标签照片；将照片与比卡对比，依据颜来得到样品中生物胺的含量，如图2所示。同时测定虾的TVB‑N含量，如图3所示。
[0025]（4）虾新鲜度判断
aoi测试将Zein/RhB‑Flu比率荧光标签的检测结果与标准TVB‑N方法的检测结果进行比较，以验证荧光标签检测结果准确性。根据生物胺含量来评估虾新鲜度：生物胺含量低于50 ppm时，虾是新鲜的；当生物胺含量在50‑250 ppm范围内时，表明虾已经开始腐败但仍然是可以食用的；当生物胺含量超过250 ppm时，表明虾已经腐败、不能食用。
[0026]实施例2：一种监测虾肉新鲜度的方法及其使用的比卡
以市售鲜虾为真实样品，进行生物胺的检测。
[0027]采用发明方法检测，将采购的新鲜虾分为3份，分别在3种条件下贮存：25℃下保存5天、4℃下存放5天、‑20℃下存放5天。
[0028]在25℃下保存1天后的虾，测得生物胺含量为500‑2500ppm，表明虾已经完全变质。[0029]在4℃下存放3天后的虾，测得生物胺含量为50‑250ppm，表明虾已经开始变质。[0030]在‑20℃下存放5天后的虾，检测生物胺含量为25‑50ppm，表明虾仍然新鲜可食用。[0031]以上所述者仅为用以解释本发明之较佳实施例，并非企图具以对本发明做任何形式上之限制，凡有在相同之发明精神下所作有关本发明之任何修饰或变更，皆仍应包括在本发明意图保护之范畴。
豫公网安备41160202000603
站长QQ:729038198
关于我们
投诉建议