两虫检测方法说明

隐孢子虫和贾第鞭毛虫检测的方法说明
一、 标准接种
    吸取2ml吐温-20稀释液(0.001%)加入标样管中,涡旋混匀后倒入乘有约1-2L纯水的广口瓶中,(标样共接种于10L水中,剩余水应在抽滤过程中分3次倒入)向标样管中加入3ml纯水,涡旋洗涤(并将标样管倒置,使管帽也被充分洗涤),将洗涤后标样管中的液体,倒入广口瓶中,重复5次。将广口瓶放置在磁力搅拌器上,并向其中投入磁力搅拌子。链接蠕动泵及过滤装置,开始过滤,流速控制在1-2L/min。(清洗容器应使用纯水,不要使用清洁剂)
二、 样品的淘洗和浓缩
1. 准备缓冲液
在开始混合缓冲液前,首先确定有多少样品进行淘洗,根据样品量配制缓冲液。需要准备400ml纯水用于淘洗设备的预冲洗,每个样品至少需要400ml缓冲液。
PS:配置1升淘洗液:在容器中加入8g NaCl,0.2g KCl,2.9g Na2HPO4以及0.2g KH2PO4溶在0.9L的试剂级纯水中。调PH值到7.4。加0.1ml吐温-20溶液到容器中再搅拌10分钟。(注意:吐温-20溶液非常粘,应该用吸液管小心移出)
2. 转移到缓冲液瓶中
缓冲液瓶包括一个10L瓶子和一个4L的瓶子,建议10L瓶子放淘洗液,4L瓶子用来盛放纯水。
3. 初始化的系统检测
在样品淘洗前用纯水代替缓冲液进行操作,用于检测设备系统可否正常使用,并可对系统内部的管路进行冲洗。
a. 将一个未使用过的滤芯放入滤器中(这个滤芯如果只作为初始化系统检测及清洗管路时使用,可重复使用一个月)
b. 完成样品淘洗过程的1-8步。
c. 在淘洗结束后将离心管里的液体倒掉。
d. 把滤器从淘洗设备中取下,然后把出口分流调节装置从滤器上取下。
e. 用70%的酒精擦洗QC干体。
f. 进行正式的样品淘洗。
4. 淘洗样品
a. 打开两虫淘洗设备的开关(开:电源开关——空气压力阀,关:空气压力阀——电源开关)打开空气压力泵。绿的灯(显示电源)和红的灯(显示设备处于准备状态)会亮。
b. 把500ml锥形离心管的盖子打开,并把它放到淘洗设备里的离心管支架上。
c. 把分流调节装置连接到滤器上的QF干体装置上。
d. 滤器的上端向下,把分流调节器放在离心管上,这时会有水从分流调节器中流到离心管中。
e. 把滤器上的QC主体连接到两虫淘洗装置上的QC肢体上。
f. 确保缓冲液已经放在缓冲瓶中了。确保有插管的瓶盖盖到缓冲瓶上,且密封环完好,并把瓶盖拧紧。
g. 按控制面板上的F1键开始两虫淘洗过程。
h. 淘洗过程结束后,把滤器从淘洗设备上取下,然后把出口分流调节器从滤器上取下。
i. 把滤芯从滤器中取出,并丢弃(通常经过高压处理后再弃掉)。
j. 盖上离心管并从淘洗设备中取出。
k. 用酒精清洗QC干体装置。
l. 进行下一个样品淘洗。
m. 用纯水代替缓冲液清洗残留在设备内部管路中的缓冲液。如果超过一周不使用淘洗设备需将设备中的水排干,将瓶中的水倒掉,空抽一次。
熏蒸桶5. 离心浓缩及转移浓缩液
a. 离心机应放在牢固的工作台或地板上,尽量减少晃动。
b. 平衡对称的离心管,和适配器、离心桶一起平衡,重量差别不超过0.5g,尽量减少摆动。注意:如果离心管不被平衡则会产生额外的震动,影响到目标物的沉淀。
c. 设置离心机参数2000g,15min。样品在离心机中自然惯性停止,不可使用刹车系统急停。
d. 用真空泵或蠕动泵吸取离心管中的上清液,在进口处装一个移液头(如5ml头)以减少进口的真空力度。最终留取5-8ml(可预先在管上做好标记)。流速控制在200±20ml/min。注意把移液管放到液面中心,接近液面处上吸取上清液,以减少沉淀的损失。精油与肌肤百度影音
e. 将离心管中的剩余的浓缩液在涡旋混合器上混匀20秒。
f. 用缓冲液润洗移液将所有液体转移至L型试管中。                (注意:移液头需要用缓冲液润洗下,是为了避免移液管壁因干燥而将两虫挂壁。)
g. 使用纯水清洗两次移液管(如剩余体积为7ml,则每次1.5ml),并将清洗液移入同一个L型试管中,每次冲洗后都要我选20秒再移出液体。
三、 两虫的捕获pgm_430mei
道路bim隐孢子虫/贾第鞭毛虫磁珠分选试剂盒:10XSLTM-BufferA,10XSLTM-BufferB,Dynabeads anti-Cryptosporidium—隐孢子虫磁珠,Dynabeads anti—贾第鞭毛虫磁珠。
数据监控

本文发布于:2024-09-21 17:33:06,感谢您对本站的认可!

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