透射电镜生物样品制备步骤一.取材:组织块小于1立方毫米二.固定: 巴氏杀菌锅
金属槽筒
2.5%戊二醛,磷酸缓冲液配制固定2小时或更长时间。用0.1M磷酸漂洗液漂洗 15分 三次1%锇酸固定液固定 2-3小时用0.1M磷酸漂洗液漂洗 15分 三次三.脱水: 50%乙醇 15-20分70%乙醇 15-20分90%乙醇 15-20分90%乙醇 90%丙酮(1:1) 15-20分90%丙酮 15-20分以上在4度冰箱内进行 100%丙酮 室温 15-20分三次
四.包埋:
纯丙酮+包埋液(2:1)室温 3-4小时
纯丙酮+包埋液(1:2)室温 过夜
纯包埋液 37度 2-3小时
五.固化:
微型直线电机37度烘箱内 过夜
45度烘箱内 12小时
60度烘箱内
48小时
六.超薄切片机切片70 nm
光滑塞规七.3%醋酸铀-枸橼酸铅双染多拉寻物大冒险
八.透射电镜JEOL JEM-1230(80KV)观察。拍片。