精液的透射电镜制样方法

精液的透射电镜制样方法
丁卫东 (白求恩国际和平医院中心实验室 石家庄 050082)
摘要 采用近似生理环境的体外处理方法,对患者的精液进行清洗和低速离心,最小限度地减少了人为损伤因素,使精子的超微结构得以较完好保存。因此在电镜观察中,精子的全貌及各种细胞器结构清晰显现,较大程度的为临床诊断及研究提供了尽可能多的观察内容。
关键词 精液 显微镜检查,电子 标本制作
网络取书中图号 R321.1
  精子属游离细胞,故较分散,不易行常规电镜制样处理,且精液中含有较多的精浆成分,会影响电镜观察,所以在精液透射电镜样品制备时,必须对其进行特殊处理。
1 材料和方法
取临床病人精液,约1ml左右,置清洁干燥的盘尼西林小瓶中,放37℃温箱约40min液化后,移至离心管中,并加入约2倍于精液体积的0.9%生理盐水或0.067mol/L磷酸缓冲液,用吸管上下抽动将其混匀。然后采用低转速、短时间离心(1500r/min,5min)。再弃上清。共重复3次离心。
风能路灯
离心完毕后,将离心管中上清液弃去,加入3.1%戊二醛1~2ml(pH7.2~7.4,0.067mol/L 磷酸缓冲液配制),置冰箱(4℃),固定保存。固定2h后,用适当的工具(可自制)将离心团块轻轻挑取出来,规整修块成约1mm3方块,然后将其移至标本瓶中,再用0.067mol/L缓冲液(pH7.2~7.4,加蔗糖)清洗3遍,置4℃过夜。以后步骤按透射电镜常规制样技术[1]操作。即经1%O S O4后固定、乙醇或丙酮梯度脱水、Epon812包埋聚合、超薄切片、铀铅双染,最后电镜观察。
2 观察结果
水析仪>包装箱制作通过以上方法观察到的精子超微结构如图1~4所示。由于采用了近似生理环境的体外处理,
图1 较完整精子,可见精子头、颈、尾部 ×10
000
图2 精子头部,可见精子顶体及其内外膜及腔隙 ×20000
之离心时转速较低,时间也较短,故人为损伤较小,各种细胞器的保存较完好(病理因素应排除在外)。图示可见精子顶体的内膜和外膜以及二者之间的腔隙,轴丝的9组双管和中央的两条微管,以及大量
生的学习,改进讲课方法,认真备课以每一手术为出发点,应用联想推理法[1]教导学生,使他们的知识由薄※厚※薄,强调掌握基础知识的前提下,强化实践操作。烟雾过滤器
参考文献
1 陈光华.联想推理法用于临床护理教学.护理学杂志, 6;()56~5
刮刀钻头
[55收稿]
81
 山西医科大学学报(J Shanxi Med Univ)1997;28(Suppl.) 
19911:7
1997-0-0

本文发布于:2024-09-20 10:49:28,感谢您对本站的认可!

本文链接:https://www.17tex.com/tex/4/191032.html

版权声明:本站内容均来自互联网,仅供演示用,请勿用于商业和其他非法用途。如果侵犯了您的权益请与我们联系,我们将在24小时内删除。

标签:精子   精液   离心   临床   方法
留言与评论(共有 0 条评论)
   
验证码:
Copyright ©2019-2024 Comsenz Inc.Powered by © 易纺专利技术学习网 豫ICP备2022007602号 豫公网安备41160202000603 站长QQ:729038198 关于我们 投诉建议