第一章
丝锥磨床
1、现代生物技术:也称生物工程。在分子生物学基础上建立的创建新的生物类型或新生物机能的实用技术，是现代生物科学和工程技术相结合的产物。2、基因重组：gene recombination 造成基因型变化的核酸的交换过程。 3、酶工程：enzyme engineering 酶制剂在工业上的大规模应用，主要由酶的生产、酶的分离纯化、酶的固定化和生物反应器四个部分组成。
4、蛋白质工程：protein engineering 按人们意志改变蛋白质的结构和功能或创造新的蛋白质的过程。
5、快速无性繁殖：
7、生物工程：bioengineering应用生命科学及工程学的原理，借助生物体作为反应器或用生物的成分作工具以提供产品来为社会服务的生物技术。包括基因工程、细胞工程、发酵工程、酶工程等。
8、细胞工程：cell engineering应用细胞生物学和分子生物学的方法，通过类似于工程学的步骤在细胞整体水平或细胞器水平上，遵循细胞的遗传和生理活动规律，有目的地制造细胞产品的一门生物技术。
9、发酵工程：是指采用现代工程技术手段，利用微生物的某些特定功能，为人类生产有用的产品，或直接把微生物应用于工业生产过程的一种新技术。
10、转基因工程：转基因工程又叫重组DNA技术，重组是指在体外将分离到的或合成的目的基因（object gene）,通过与质粒、病毒等载体（vector）重组连接，然后将其导入不含该基因的受体细胞(host cell)，使受体细胞产生新的基因产物或获得新的遗传特性。
11、生物固氮：是指固氮微生物将大气中的氮气还原成氨的过程。
12、人类基因组计划：human genome project于20世纪80年代提出，由美、英、日、中、德、法等国参加并于2001年完成的针对人体23对染体全部DNA的碱基对（3×109）序列进行排序，对大约25 000基因进行染体定位，构建人类基因组遗传图谱和物理图谱的国际合作研究计划。
13、愈伤组织：callus;calli(复) 原指植物体的局部受到创伤刺激后，在伤口表面新生的组织。它由活的薄壁细胞组成，可起源于植物体任何器官内各种组织的活细胞。现多指切取植物体的一部分，置于含有生长素和细胞分裂素的培养液中培养，诱导产生的无定形的组织团块。
第二章
一、名词解释
1 、DNA变性：在某些理化因素作用下，DNA双链解开成两条单链的过程叫DNA的变性。DNA的变性是DNA二级结构破坏、双螺旋解体的过程。DNA的变性中以DNA的热变性最常见。 1.增效应：DNA变性时其溶液0D260智慧交通沙盘增高的现象。 2.Tm：热变性的DNA是在一个相当窄的温度范围内完成。在这一范围内。医学教`育网搜集整理紫外光吸收值达到最大值的50%时的温度称为DNA的解链温度，又称融解温度（meltingtemperature，Tm）。其大小与G+C含量成正比。
2、复制子：（replicon）是DNA复制是从一个DNA复制起点开始，最终由这个起点起始的 复制叉完成的片段。DNA 中发生复制的独立单位称为复制子。每个复制子使用一次，并且在每个细胞周期中只有一次。
栓剂模具3、启动子：promoter DNA分子上能与RNA聚合酶结合并形成转录起始复合体的区域，在许多情况下，还包括促进这一过程的调节蛋白的结合位点。
4、内含子：（introns）是真核生物细胞DNA中的间插序列。这些序列被转录在前体RNA中，经过剪接被去除，最终不存在于成熟RNA分子中。内含子和外显子的交替排列构成了割裂基因，在前体RNA中的内含子常被称作“间插序列”。
5、限制性内切酶：生物体内可以识别并切割特意的双链DNA序列的一种内切核酸酶，简称限制酶。它们能将外来的DNA切断，即能够限制异源DNA的侵入并使之失去活力，但对自己的DNA却无损害作用，这样可以保护细胞原有的遗传信息。
磁性刀架6、酶切位点：DNA上一段碱基的特定序列，限制性内切酶能够识别出这个序列并在此将DNA序列切成两段。
7、PCR：聚合酶链式反应，其英文Polymerase Chain Reaction是体外酶促合成特异DNA
片段的一种方法,由高温变性、低温退火（复性）及适温延伸等几步反应组成一个周期,循环进行,使目的DNA得以迅速扩增,具有特异性强、灵敏度高、操作简便、省时等特点。它不仅可用于基因分离、克隆和核酸序列分析等基础研究,还可用于疾病的诊断或任何有DNA,RNA的地方．
8、基因克隆载体：在基因工程重组DNA技术中将DNA片段（目的基因）转移至受体细胞的一种能自我复制的DNA分子。三种最常用的载体是细菌质粒、噬菌体和动植物病毒。
9、质粒：细菌细胞内一种自我复制的环状双链DNA分子，能稳定地独立存在于染体外，并传递到子代，一般不整合到宿主染体上。现在常用的质粒大多数是经过改造或人工构建的，常含抗生素抗性基因，是重组DNA技术中重要的工具。
10、Ti质粒：（Ti-plasmid）根瘤农杆菌染体外的环状双链DNA质粒，能诱导植物产生异常氨基酸和冠瘿碱或二者之一，并诱生冠瘿瘤。
11、噬菌体载体：
12、基因芯片：gene chip固定有寡核苷酸、基因组DNA或互补DNA等的生物芯片。利用
这类芯片与标记的生物样品进行杂交，可对样品的基因表达谱生物信息进行快速定性和定量分析。
13、cDNA文库：cDNA library：是以特定的组织或细胞mRNA为模板，逆转录形成的互补DNA（cDNA）与适当的载体（常用噬菌体或质粒载体）连接后转化受体菌形成重组DNA克隆，这样包含着细胞全部mRNA信息的cDNA克隆集合称为该组织或细胞的cDNA文库。cDNA文库特异地反映某种组织或细胞中，在特定发育阶段表达的蛋白质的编码基因，因此cDNA文库具有组织或细胞特异性。
14弯板机、转化：（transformation）是某一基因型的细胞从周围介质中吸收来自另一基因型的细胞的DNA而使它的基因型和表型发生相应变化的现象。
15、转导：（transduction）由噬菌体将一个细胞的基因传递给另一细胞的过程。它是细菌之间传递遗传物质的方式之一。其具体含义是指一个细胞的DNA或RNA通过病毒载体的感染转移到另一个细胞中。
16、克隆子：摄取外源DNA并令其稳定维持的受体细胞。
17、报告基因：(reporter gene)是一种编码可被检测的蛋白质或酶的基因，也就是说，是一个其表达产物非常容易被鉴定的基因。把它的编码序列和基因表达调节序列相融合形成嵌合基因，或与其它目的基因相融合，在调控序列控制下进行表达，从而利用它的表达产物来标定目的基因的表达调控，筛选得到转化体。
18、DNA杂交：（DNA hybridization）一种用互补碱基配对的程度，来分析不同生物品种来源的两条或多条DNA链间彼此关系密切程度的实验技术。
19、southern印迹杂交：利用琼脂糖凝胶电泳分离经限制性内切酶消化的DNA片段，将胶上的DNA变性并在原位将单链DNA片段转移至尼龙膜或其他固相支持物上，经干烤或者紫外线照射固定，再与相对应结构的标记探针进行杂交，用放射自显影或酶反应显，从而检测特定DNA分子的含量。
20、northern印迹杂交：一种将RNA从琼脂糖凝胶中转印到硝酸纤维素膜上的方法。RNA印迹技术正好与DNA相对应，故被称为Northern印迹杂交，与此原理相似的蛋白质印迹技术则被称为Western blot。
二、思考题
1、基因工程操作流程？
目的基因或DNA片段的获取、重组DNA分子的构建、重组DNA分子引入受体细胞、目的基因或DNA片段的扩增或表达。
2、原核生物与真核生物基因及转录的区别？
基因的区别：真核生物基因编码区有内含子与外显子的区别，内含子不能编码蛋白质；原核生物没有内含子。
转录的区别：1）真核生物有由核膜包裹的细胞核，因此，基因的转录和翻译有时间和地点的差别；而原核生物没有细胞核，转录和翻译可以同时同地点进行。2）真核生物基因有内含子，转录所得的前提mRNA需要经过修饰，除去由内含子转录得到的mRNA序列而得到成熟mRNA；原核生物基因因没有内含子，转录得到的mRNA收腰羽绒服不需要经过修饰。
3、EcoR1的识别序列，酶切位点？
EcoR1是从大肠杆菌R菌株中分离出来的第一个限制酶,EcoR表示是从大肠杆菌的R型菌株分离来的,“Ⅰ”表示是从大肠杆菌R菌株中分离出来的第一个限制酶。EcoR1切割序列，切割位点在G与A之间，形成黏性末端。
4、PCR基本原理？
PCR是一种体外DNA 扩增技术，是在模板DNA、引物和4种脱氧核苷酸存在的条件下，依赖于DNA聚合酶的酶促合反应，将待扩增的DNA片段与其两侧互补的寡核苷酸链引物经“高温变性——低温退火——引物延伸”三步反应的多次循环，使DNA片段在数量上呈指数增加，从而在短时间内获得我们所需的大量的特定基因片段。
5、MCS连杆？衔接头？
6、PBR322、λ噬菌体载体、cosmid载体、YAC载体的结构、特点、主要用途？
PBR322质粒：大小为4362bp，含有两个抗药性基因，一个复制起始点和多个用于克隆的限制酶切点。有7种限制酶的识别位点位于四环素抗性基因内部，，两种限制酶识别位点位于该基因启动区内，3种限制酶识别位点位于氨苄青霉素抗性基因内。
λ噬菌体载体：λ噬菌体的基因组长达50 Kb，共61个基因，其中38个较为重要。可分为裂解周期和溶原周期。细菌处于溶原化状态时，细胞质中有一些λ CI基因的产物CI蛋白,这是一种阻遏蛋白，可以阻止λ左、右两个早期起动子的转录，使之不能产生一些复制及细胞裂解的蛋白。λ的DNA随着宿主的染体复制而复制。但在UV诱导下Rec蛋白可降解CI蛋白诱导90％的细胞裂解。有时λ也可自发地从宿主的染体上游离出来，进行复制，最终导致宿主细胞的裂解，此称为治愈（curing）。游离在细胞质中的λ可以进行滚环复制，产生多个拷贝，并合成头部和尾部蛋白，包装成完整的λ噬菌体，使细胞裂解，释放出λ噬菌体再感染新的细胞。因为λ噬菌体的DNA也有整合在染体上和游离于细胞质中两种状态，所以也称做附加体。但和F因子不同，λ噬菌体有细胞外形式，而F因子无细胞外形式。
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