多功能酶标仪基本操作规程
1、首先打开连接酶标仪的电插板上的全部开关。打开酶标仪主机背面电源线上端的开关。
2、再打开电脑开关。（注意，一定要先开仪器，后开电脑，以免仪器连接出现问题。） 4、仪器自检后，酶标板托架自动伸出（注意仪器前部不要放置物品，以免档住托架的伸出）。将酶
标板按数字正确的方向（A1位于左上角）放在托架上。
5、点击仪器下部最右侧的[move plate in] 图标，酶标板将自动进入仪器中。（注意：千万不要用手 将酶标板推入仪器，造成仪器损坏）。
6、在屏幕上选Start measurement。点击绿箭头。
7、在Select a File窗口左上角选Obtain Raw Date 然后点击绿箭头。
8、在plate 栏中的plate definition 下拉条中，对板的类型进行选择。酶标的吸光度测定，一般情况
下选xxxxx xx Flat Transparent (x孔，平底，透明板)。（注意测定紫外吸收时要使用可以透过紫外光的透明板）如果板要加盖子，就要再选中Plate with cover。
9、在Measurements 栏内双击Absorbance ，出现Absorbance的对话框。
10、在Absorbance的对话框中：
⑴在Wavelength栏中Measurement项输入测定波长值；Reference项，在需要扣除背景波长时选中并
输入背景波长值。一般情况不选.
⑵在Multiple read per well栏中对于吸光值的测定可不选
⑶在Read 栏中: Number of flashes 项一般选10；Settle time（使平静时间）项对于96或384孔
板一般选0；对于其他孔数的板可考虑输入适当的值；孔数越少的板，Settle time 设置时间要较长，以防止在测定过程中板移动距离大，对液面平稳的影响。
⑷在Label栏中Name后输入你为此块板自定义的英文名；也可不设置。
11、在Part of plate 栏中，用鼠标左键拉框，选择要测定的样品孔（使待测定的样品孔变为黄），
（注意：待测孔只可横向或纵向连续选择，不可以被间断）。如果选择错误需要更改，不要做任何删除，只要再直接重新选择即可。点击本栏中的Detail 对所选的样品孔进行确认后，点击OK，（如果选孔有错误，选择Cancel 返回上页再重复以上操作。）
12、点击OK后，箭头变绿，点击绿箭头，在Measurement 的workspace处输入（日、月、年-
自定义文件名wsp）再点击Start，仪器开始自动测定。
13、测定结束后，点击File 选择print，直接打印测定参数与结果，或在最上方Edit选择Copy to Excel，
然后打开下方出现的Excel表（显示为板式数据）并打印结果。
14、关机，退出当前界面，点击左下角Exit Megellan 回到主屏幕。关电脑，关仪器电源和插板电
源。
1、首先打开连接酶标仪的电插板上的全部开关。打开酶标仪主机背面电源线上端的开关。
2、再打开电脑开关。（注意，一定要先开仪器，后开电脑，以免仪器连接出现问题。）
3、在电脑主屏幕上选择[Magellan6]。
无级调速器
4、仪器自检后，酶标板托架自动伸出（注意仪器前部不要放置物品，以免档住托架的伸出）。将酶
标板按数字正确的方向（A1位于左上角）放在托架上。
5、点击仪器下部最右侧的[move plate in] 图标，酶标板将自动进入仪器中。（注意：千万不要用手
将酶标板推入仪器，造成仪器损坏）。
6、在屏幕上选Start measurement。点击绿箭头。
7、在Select a File窗口左上角选Obtain Raw Date 然后点击绿箭头。
8、在plate 栏中的plate definition 下拉条中，对板的类型进行选择。荧光酶标的测定，一般情况下
选xxxxx xx Flat black (x孔，平底，黑板。6孔板测定时没有黑板可选，可选择6孔，平底，透明板)。
（注意在选择底部测定时模式时要选择底部透明的黑板）如果板要加盖子，就要再选中Plate with cover。
9、在Measurements 栏内双击Fluorescence Intensity ，出现Fluorescence Intensity的对话框。
10、在Fluorescence Intensity的对话框中：
⑴在Wavelength栏中:Excitation项输入激发波长值；Emission项输入发射波长值
⑵在Mode栏：根据被测物质的性质进行适当选择。
Top 为顶部测定，适合于透明均匀的液体的荧光测定
Bottom 为底部测定，适合于贴壁细胞类的荧光测定
⑶在Integration栏：
Log time （滞后时间）除在做时间分辨荧光测定时需要选择，一般荧光测定时不选。
Integration time （整体测定时间）一般在20～40µs范围内选择
羽毛球柱⑷在Multiple read per well栏：
对于透明均匀的液体的荧光测定可不选。对于贴壁细胞类的荧光测定要选择。选择形式，参看栏目中的图形。
⑸在Read 栏中：
Number of flashes 项一般可选3~5次；
Settle time（使平静时间）项对于96或384孔板一般选0；对于其他孔数的板可考虑输入适当的值；孔数越少的板，Settle time 设置时间要较长；以防止在测定过程中板移动距离大，对液面平稳的影响。
⑹在Gain（增益）栏：根据实验要求的不同进行选择
Manual gain （人工增益）项：要做多块板之间的数据比较时选择该项；固定一个合适的增益值，选
择范围在1～225之间.
Optimal(自动最佳)项：仪器根据实时测定时该板上的最强荧光值，自动给出合适的增益.一般在作单板内的数据比较时选择该项
Calculated form well项：以一个孔内的阳性物荧光值为比较时, 选择该项.
在Label栏中Name后可输入你为此块板自定义的英文名；也可不设置。
11、在Part of plate 栏中，用鼠标左键拉框，选择要测定的样品孔（使待测定的样品孔变为黄），
（注意：待测孔只可横向或纵向连续选择，不可以被间断）。如果选择错误需要更改，不要做任何删除，只要再直接重新选择即可。点击本栏中的Detail 对所选的样品孔进行确认后，点击OK，（如果选孔有错误，选择Cancel 返回上页再重复以上操作。）
12、点击OK后，箭头变绿，点击绿箭头，在Measurement 的workspace处输入（日、月、年-
自定义文件名wsp）再点击Start，仪器开始自动测定。
13、测定结束后，点击File 选择print，直接打印测定参数与结果，或在最上方Edit选择Copy to Excel，
然后打开下方出现的Excel表（显示为板式数据）并打印结果。
14、关机，退出当前界面，点击左下角处Exit Megellan 退回到电脑主屏幕。
15、关电脑，关仪器电源和电插板电源。
三、可见、紫外、荧光测定的标准曲线法
1、开机：首先打开电插板上的全部开关。打开酶标仪主机背面电源线上端的开关。打开电脑开关。（注意，一定要先开仪器，后开电脑，以免仪器连接出现问题。）
2、在电脑主屏幕上选择[Magellan6]。
3、放酶标板：仪器自检后，酶标板托架自动伸出（注意仪器前部不要放置物品，以免档住托架的
伸出）。将酶标板按数字正确的方向（A1位于左上角）放在托架上。点击仪器下部最右侧的[move plate in] 图标，酶标板将自动进入仪器中。（注意：千万不要用手将酶标板推入仪器，造成仪器损坏）。
4、创建方法：
4.1 在屏幕上选。Create/edit a method点击绿箭头，
4.2 选New然后点击绿箭头。
4.3 选板型：在plate 栏中的plate definition 下拉条中，
①可见、紫外吸光度的酶标测定，一般情况下选xxxxx xx Flat Transparent (x孔，平底，透明板)。（注意测定紫外吸收时要使用可以透过紫外光的透明板）如果板要加盖子，还要选中Plate with cover。
②荧光的酶标测定，一般情况下选xxxxx xx Flat black (x孔，平底，黑板。6孔板测定时没有黑板可选，可选择6孔，平底，透明板)。（注意在选择底部测定模式时要选择底部透明的黑板）如果板要加盖子，就要再选中Plate with cover。
5、测定方法和参数的选择：在Measurements 栏内
⑴选择可见、紫外吸光度的酶标测定：双击Absorbance 出现Absorbance的对话框。
出租车计价器传感器在Absorbance的对话框中：
①在Wavelength栏中Measurement项输入测定波长值；Reference项，在需要扣除背景波长时选中并
输入背景波长值。一般情况不选.
②在Multiple read per well栏中对于吸光值的测定可不选
③在Read 栏中: Number of flashes 项一般选10；Settle time（使平静时间）项对于96或384孔
板一般选0；对于其他孔数的板可考虑输入适当的值；孔数越少的板，Settle time 设置时间要较长，以防止在测定过程中板移动距离大，对液面平稳的影响。
④在Label栏中Name后输入你为此块板自定义的英文名；也可不设置。
⑵选择荧光的酶标测定：双击Fluorescence Intensity ，出现Fluorescence Intensity的对话框。
在Fluorescence Intensity的对话框中：
①在Wavelength栏中:Excitation项输入激发波长值；Emission项输入发射波长值
②在Mode栏：根据被测物质的性质进行适当选择。
Top 为顶部测定，适合于透明均匀的液体的荧光测定
Bottom 为底部测定，适合于贴壁细胞类的荧光测定
③在Integration栏：
Log time （滞后时间）除在做时间分辨荧光测定时需要选择，一般荧光测定时不选。
Integration time （整体测定时间）一般在20～40µs范围内选择
④在Multiple read per well栏：
对于透明均匀的液体的荧光测定可不选。对于贴壁细胞类的荧光测定要选择。选择形式，参看栏目中的图形。
⑤在Read 栏中：
Number of flashes 项一般可选3~5次；
过氧化氢酶活性测定
Settle time（使平静时间）项对于96或384孔板一般选0；对于其他孔数的板可考虑输入适当的值；孔数越少的板，Settle time 设置时间要较长；以防止在测定过程中板移动距离大，对液面平稳的影响。
⑥在Gain（增益）栏：根据实验要求的不同进行选择
Manual gain （人工增益）项：要做多块板之间的数据比较时选择该项；固定一个合适的增益值选择
范围在1～225之间.
Optimal(自动最佳)项：仪器根据实时测定时该板上的最强荧光值，自动给出合适的增益.一般在作单板内的数据比较时选择该项
Calculated form well项：以一个孔内的阳性物荧光值为比较时, 选择该项.
⑦在Label栏中Name后可输入你为此块板自定义的英文名；也可不设置。
6、酶标板的样本布局
①在Well Assign 对话框中各个符号所表示的意义：
SM （Sample）样品
BL （Blank）空白
ST （Standard）标准
PC （Positive control）阳性对照
NC （Negative control）阴性对照
LPC （Low Positive control）弱阳性对照
HPC （High Positive control）强阳性对照
BF （Polarization reference buffer）偏振参照缓冲液
RF （Polarization reference ）偏振参照
CL （Calibrator）校正因子
②在Part of plate 栏中，首先用鼠标左键拉框，选择要测定的不同物质预备放置的孔（使待放置的孔变为黄），确认Exp group号（同一类型的实验或一个系列的标曲为一组）和Fix numbe-复孔数，然后单击以上相应的表达符号，鼠标右键选Fill selection使该孔加上相应的标记。（例：某些孔准备放置标准品，在选孔后，单击Well Assign 对话框中ST，标右键选Fill selection这些孔就被加上了ST的标记）
孔中的符号表示：
ST：标准
给皂器
X ：第n个实验组（Exp group号）
Y ：第n个实验组的第几个标准（ID-num）
Z ：重复数，1/z ：重复数的第一个（Fix numbe ）
7、标准孔浓度的输入
在plate layout 栏中点击Conc，随后，在跳出的对话框中依次输入相应的标准系列浓度值和单位。
8、标准曲线类型的确认
在concentration栏中点击standard curve ，点击analysis type ，在该项下选择曲线的类型
Point to point （点对点）（最少需要两个邻近基本点）
Linear Regression （线性回归）
Non-linear regression （非线性回归）
Cubic Spline （样条函数）
Polynomial （多项式）
Akima
Four Parameters （四参数）
Four Parameters- Marquardt（四参数Marquardt算法）
Five Parameters-Marquardt （五参数Marquardt算法）
Logitlog （对数对数）
HDPE多孔加筋缠绕波纹管
在Date Scaling 的下拉条中选择座标类型[Lin（x）Lin（y）；Lin（x）Log（y）；
Log（x）Lin（y）；Log（x）Log（y）；
Extrapolation fact 拓展因子（一般情况下默认值是1）确认曲线类型后点击绿箭头进入下一步
13、在Filename存入方法名在Method password 处可以输入密码（也可不设密码）
14、如果要立即进行样品测定，选择绿箭头前的“Run this method now”（如果只存方法，此项不
选，直接进入步骤存方法），点击绿箭头。仪器开始自动测定。
15、测定结束后屏幕上自动显示测定获得的原始值。
查看标准曲线图：点击左上角Concentration栏在该栏中选Graph standard cure 现示标曲
查看样品浓度：在Concentration栏选Single conc 显示每孔浓度
查看复孔样品的平均浓度：选Mean Conc显示多孔平均浓度。
16、储存或打印结果：在屏幕显示每孔浓度后，点击左上角Edit选择copy to Excel ，仪器自动储存
样品测定结果在Excel表中；在标曲图的左上角Edit选择copy，然后将标曲图粘贴至相应的Excel表中。
17、在对话框中workspace xx（日）xx（月）xxxx（年）—xxx（测试项目的特征名）输入相应特
征名后。点击绿箭头，完成方法编辑与储存。待测定时直接调用。
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